血清STIP1、sPD-L1水平與肝癌TACE術后患者預后的關系*

陳燕波,周奕彬,張卓敏

普寧市人民醫院：1.檢驗科;2.肝膽科,廣東普寧 515300

原發性肝癌是臨床上常見的惡性腫瘤之一，具有侵襲性強、增殖速度快、復發率和病死率高等特點，其病死率在所有消化系統惡性腫瘤中居第3位[1]。由于患者發病早期癥狀不明顯，大部分患者就診時已處于中晚期，導致患者治療相對困難，嚴重影響著患者生存預后。肝動脈化療栓塞術(TACE)是目前晚期肝癌患者的主要治療方式之一，可有效控制肝內病灶進展，延長肝癌患者的生存期[2]。磷酸化應激誘導蛋白1(STIP1)能夠通過調節熱激蛋白70(HSP70)和HSP90連接及二聚化參與調控細胞的多個生理過程[3]。有研究報道[4]，血清STIP1在卵巢癌患者表達水平升高，其水平升高與卵巢癌患者的不良預后密切相關。可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1)是由基質金屬蛋白酶裂解細胞膜表面PD-L1而形成，存在于多種惡性腫瘤(如肺癌、胃癌等)的血清中[5]。韓瑞等[6]報道，胰腺癌患者外周血 sPD-L1水平明顯升高，其在評估患者預后方面有較高的臨床價值。目前，血清STIP1、sPD-L1與肝癌TACE術后患者預后關系的研究較少。因此，本研究旨在探討肝癌TACE術后患者血清STIP1、sPD-L1水平，并分析其與患者預后的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2017年6月在本院接受TACE治療的原發性肝癌患者126例為肝癌組，其中男75例，女51例；年齡31～75歲，平均(58.36±10.42)歲。選取本院同期體檢健康者80例為對照組，其中男40例，女40例；年齡28～70歲，平均(56.11±7.39)歲。兩組患者的年齡、性別比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。納入標準：(1)符合《原發性肝癌診療規范(2017年版)》[7]，經影像學和病理學檢查確診為原發性肝癌；(2)均行TACE治療；(3)初診治患者，術前未接受放、化療等抗腫瘤治療；(4)患者自愿參加研究，簽署知情同意書。排除標準：(1)嚴重心肺腎功能障礙者；(2)合并其他器官惡性腫瘤者；(3)凝血功能和自身免疫系統疾病患者；(4)轉移性肝癌患者；(5)臨床隨訪資料不完整者。本研究已獲得本院醫學倫理委員會審批通過。

1.2方法

1.2.1血清STIP1、sPD-L1檢測 所有患者均在入院時及TACE治療1周后空腹狀態下抽取外周靜脈血5 mL，置于 EDTA 抗凝管中靜置30 min，3 000 r/min 離心10 min，取上清液，置于-80 ℃ 冰箱保存待測。采用酶聯免疫吸附法檢測血清STIP1、sPD-L1水平。血清STIP1試劑盒購自上海通蔚實業有限公司，血清sPD-L1試劑盒購自美國RD公司，所有操作均按照試劑盒說明書嚴格進行操作。

1.2.2臨床資料收集 收集原發性肝癌患者的臨床資料，包括患者的年齡、性別、腫瘤數量、腫瘤直徑、有無門靜脈癌栓、有無肝外轉移、Child-Pugh分級和BCLC分期等。

1.3隨訪 采用門診和電話等方式對原發性肝癌TACE術后患者進行為期3年隨訪，術后第1年每2個月隨訪1次，術后第2～3年每3個月隨訪1次。死亡為隨訪終點，隨訪截止時間為2019年12月。

2 結 果

2.1肝癌組與對照組血清STIP1、sPD-L1水平比較 肝癌組患者血清STIP1、sPD-L1水平高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 肝癌組與對照組血清、sPD-L1水平STIP1比較

2.2肝癌組TACE治療前與治療后血清STIP1、sPD-L1水平比較 肝癌患者治療后血清STIP1、sPD-L1水平均低于治療前，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 肝癌組TACE治療前與治療后血清STIP1、sPD-L1水平比較

2.3血清STIP1、sPD-L1評估肝癌TACE術后患者預后的ROC曲線 ROC曲線結果顯示：血清STIP1評估肝癌TACE術后患者預后的AUC為0.818(95%CI：0.732～0.903，P=0.000)，cut off值為61.40 ng/mL，靈敏度和特異度分別為0.781和0.722；血清sPD-L1評估患者預后的AUC為0.861(95%CI：0.791～0.935，P=0.000)，cut off值為6.11 ng/mL，靈敏度和特異度分別為0.797和0.750；兩項聯合檢測評估患者預后的AUC為0.939(95%CI：0.905～0.978，P=0.000)，靈敏度和特異度分別為0.859和0.868。見圖1。

圖1 血清STIP1、sPD-L1評估肝癌TACE術后患者預后的ROC曲線分析

2.4血清STIP1、sPD-L1水平與肝癌TACE術后患者預后的關系 截至2019年12月，共126例獲得隨訪，死亡72例。根據血清STIP1、sPD-L1最佳cut off值，將患者分為高、低STIP1、sPD-L1組。79例高STIP1組患者死亡52例，總生存率為34.18%；47例低STIP1組患者死亡20例，總生存率為57.45%，兩組患者總生存率比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見圖2。74例高sPD-L1組患者死亡48例，總生存率為35.14%；52例低sPD-L1組患者死亡24例，總生存率為53.85%，兩組患者總生存率比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見圖3。

圖2 高、低STIP1組患者生存率比較.

圖3 高、低sPD-L1組患者生存率比較.

2.5影響肝癌TACE術后患者不良預后的危險因素分析 Cox比例風險模型進行單因素分析結果顯示，腫瘤數量、腫瘤直徑、門靜脈癌栓、肝外轉移、BCLC分期、血清STIP1和sPD-L1可能與患者預后不良有關(均P<0.05)；多因素分析結果顯示，腫瘤數量、腫瘤直徑、門靜脈癌栓、血清STIP1和sPD-L1是影響肝癌TACE術后患者預后不良的獨立危險因素(均P<0.05)，見表3。

表3 影響肝癌TACE術后患者不良預后的危險因素分析[M(P25～P75)]

3 討 論

原發性肝癌是消化道最常見的惡性腫瘤之一，其發病機制與多種因素有關如病毒性肝炎、環境因素、食用黃曲霉素等。目前，隨著人們生活方式的改變，肝癌的發病率也呈現出逐年上升的趨勢，嚴重威脅著人民生命健康安全。肝癌患者不僅病情進展快，極易復發和轉移，且預后較差，5年生存率小于10.00%，病死率大于50.00%[8]。手術是目前肝癌的主要治療方法，但部分患者就診時已發展為晚期肝癌，已不具備手術指征。TACE可通過栓塞阻斷腫瘤動脈，促進肝癌細胞壞死，進而控制患者病情進展，在延長患者生存時間、改善預后方面有積極作用[9]。因此，盡早評估肝癌患者的預后狀況，進而采用有效的治療手段，對改善患者預后具有重要意義 。

STIP1也稱為HSP70、HSP90組織蛋白，是一種62.6×103蛋白，包含3個四肽重復基序和2個核定位信號，其在調節轉錄和細胞內信號轉導及細胞增殖和分裂中起著重要作用。同時，STIP1也可通過結合 ALK2 和活化 SMAD-ID3 信號通路促進腫瘤細胞增殖，與微管蛋白相互錯用調節細胞極化和遷移來促進腫瘤血管生成[10]。既往研究證實，STIP1表達升高與多種惡性腫瘤(如胃癌、甲狀腺癌)的細胞增殖、侵襲、遷移有關[11-12]。研究表明，STIP1在肝癌中過度表達，并可促進肝癌細胞的生長和轉移，STIP1表達升高也與肝癌患者腫瘤分期及生存期有關，并對患者不良預后有較高預測價值[13]。sPD-L1作為一種跨膜轉運糖蛋白，是由免疫細胞在促炎性細胞因子刺激下產生的，受周圍細胞因子、炎癥環境等多種因素調節，并在多種腫瘤的發生、發展中起著重要作用。sPD-L1在功能上與PD-L1相似，其水平升高可與PD-1受體更多結合，抑制T細胞活化，導致機體正常的免疫系統受到抑制，從而導致細胞的凋亡過程受阻，進而使患者病情加重[14]。KUSHLINSKII等[15]報道稱：血清sPD-L1水平與腎細胞癌患者的腫瘤分期及轉移密切相關。研究證實，血清sPD-L1水平升高與晚期食管癌及非小細胞肺癌患者的生存預后較差有關，也是用于評估患者預后狀況的一種生物標志物[16-17]。

本次研究結果顯示，肝癌組患者血清STIP1、sPD-L1水平高于對照組，肝癌治療后的血清STIP1、sPD-L1水平低于治療前，差異有統計學意義，說明血清STIP1、sPD-L1變化在肝癌病變過程中發揮著重要作用，也提示TACE 可通過栓塞作用及化療藥物作用來抑制腫瘤的生長。STIP1也可分泌到細胞外，作為細胞因子影響細胞增殖和凋亡，分泌型STIP1可通過進入機體的循環系統來介導腫瘤細胞的生長和進展，進而血清STIP1表達升高與惡性腫瘤患者總生存期差有關。機體慢性炎癥與腫瘤發生發展密切相關。血清sPD-L1水平受患者的腫瘤負荷和腫瘤外炎性環境共同影響[16]，并在預測惡性腫瘤患者的治療反應及預后方面有著重要作用。研究發現，肝癌合并系統性炎癥患者中血清sPD-L1水平明顯升高，血清sPD-L1升高也是預測患者預后的潛在指標[18]。ROC曲線結果顯示，血清STIP1、sPD-L1兩項聯合檢測評估患者預后的AUC為0.939，靈敏度和特異度分別為0.859和0.868，均高于血清STIP1、sPD-L1單獨檢測，說明聯合檢測血清STIP1、sPD-L1對肝癌TACE術后患者預后的評估價值更高，進而有利于指導患者臨床治療，降低患者病死率。高STIP1、sPD-L1值組患者的生存率分別低于低STIP1、sPD-L1值組，差異有統計學意義，提示血清STIP1、sPD-L1水平變化與肝癌TACE術后患者的生存率有關，而STIP1、sPD-L1高表達不利于肝癌TACE術后患者的預后。多因素回歸分析示：血清STIP1、sPD-L1水平升高是肝癌TACE術后患者預后不良的獨立危險因素，提示血清STIP1、sPD-L1水平越高，肝癌患者的死亡風險越大，與MA等[19]和ELGEBALY等[20]報道相似。STIP1可正向調控癌細胞生長和遷移，并通過調控ID3表達來影響癌細胞EMT轉化，參與癌細胞的侵襲和轉移過程，與患者病情進展及不良預后密切相關。惡性腫瘤細胞和影響其浸潤的免疫細胞可分泌大量PD-L1，二者結合后可抑制免疫細胞活化，使其逃避免疫系統監視，使腫瘤生長、侵襲與轉移活性增強，進而影響患者預后。

綜上所述，血清STIP1、sPD-L1水平變化與肝癌TACE術后患者的預后有關，兩項聯合檢測可用于評估肝癌TACE術后患者預后。