BMP-2對(duì)BMSCs放射損傷的保護(hù)作用及機(jī)制的初步研究

唐子豪 宗春琳 張維文 趙路 田磊 李德超

大約75%頭頸癌患者需行放射治療［1］，在頭頸部放療并發(fā)癥中，放射性頜骨骨壞死（ORNJ）是最難治的遠(yuǎn)期并發(fā)癥之一。ORNJ可導(dǎo)致皮膚和黏膜潰爛、死骨暴露等，給患者帶來巨大痛苦。目前ORNJ發(fā)病機(jī)制不清、仍缺乏有效的預(yù)防及治療方法。針對(duì)ORNJ發(fā)病機(jī)制，尋找有效的預(yù)防及治療方法，具有重要意義。

自2004年Delanian等［2］提出放射誘導(dǎo)組織萎縮觀點(diǎn)后，近些年來，越來越多學(xué)者認(rèn)同ORNJ是一種放射誘導(dǎo)的纖維化疾病［3］。大量文獻(xiàn)及本課題前期研究發(fā)現(xiàn)，放療后頜骨局部骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）受損，導(dǎo)致其成骨分化能力下降，并出現(xiàn)肌成纖維細(xì)胞（MFB）表型、向成纖維化方向分化，這有可能是導(dǎo)致ORNJ的重要發(fā)病機(jī)制之一［4－6］。

BMP-2的成骨能力得到廣泛公認(rèn)［7］，放射線可抑制BMP-2的表達(dá)［8］，外源性使用BMP-2可增強(qiáng)放射性頜骨骨壞死的成骨能力［9］。在胰腺等其他器官纖維化疾病的研究中，發(fā)現(xiàn)BMP-2有減輕纖維化的作用并且這一作用可能與抑制TGFβ1/Smads通路的表達(dá)有關(guān)［10］，但是在 ORNJ中，BMP-2是否可以抑制放射損傷后BMSCs向成纖維方向分化，尚未見報(bào)道。本研究通過檢測(cè)放射損傷的BMSCs使用BMP-2干預(yù)后，成纖維相關(guān)蛋白分子的變化情況，探究BMP-2對(duì)放射線損傷的 BMSCs的保護(hù)作用，并初步探討 TGFβ1/Smad通路在其中的作用。

1 材料與方法

1.1 大鼠BMSCs來源與培養(yǎng)

BMSCs原代細(xì)胞取自于2～3周齡的SD大鼠，麻醉后，無菌條件取出脛骨，使用含有10%胎牛血清α-MEM培養(yǎng)液沖洗骨髓，于培養(yǎng)皿中培養(yǎng)至3～6代用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 大鼠BMSCs鑒定

成骨與成脂分化誘導(dǎo)：培養(yǎng)細(xì)胞加入成骨誘導(dǎo)液誘導(dǎo)21 d后，進(jìn)行茜素紅染色。……