新型冠狀病毒肺炎患者康復后血清抗體水平檢測結果分析

張智州 路華敏

湖北省襄陽市襄州區人民醫院 441100

2019年12月底以來，一場突如其來的疫情逐漸在全球蔓延，引起這場疫情的罪魁禍首就是后來被命名為2019-nCoV的新型冠狀病毒。該病毒傳染性強，人群普遍易感，故感染者眾多，給人民的生命健康造成巨大威脅，給醫療單位和公共衛生系統帶來巨大負擔。目前臨床上多用實時熒光定量PCR(RT-PCR)檢測病毒RNA進行診斷，檢測病毒特異性抗體進行輔助診斷。抗體檢測不僅可彌補RNA檢測易造成假陰性的缺陷，還可對病情進行監測，對患者的恢復情況進行預判，對臨床診療具有一定的指導作用。本研究利用化學發光法檢測新型冠狀病毒肺炎康復者體內的特異性IgG、IgM抗體，動態監測抗體的變化，以了解新型冠狀病毒肺炎患者體內特異性抗體的濃度及其變化規律，以期為臨床診療和流行病學調查提供幫助。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選取2020年1—2月在本院住院的新型冠狀病毒肺炎患者，所有患者經熒光定量PCR檢測，新型冠狀病毒RNA均為陽性，并符合《新型冠狀病毒肺炎診療方案》(試行第六版)的診斷要求，共105例，其中男54例，女51例，年齡9～88歲。根據《新型冠狀病毒肺炎診療方案》臨床分型，將上述患者分為4型，即普通型12例，輕型85例，重型6例，危重型2例。因重型和危重型患者太少，將此二型患者合并為一組進行統計分析。

1.2 儀器試劑 深圳亞輝龍生物科技股份有限公司生產的iFlash3000全自動化學發光免疫分析儀及其配套試劑。

1.3 抗體檢測 依患者發病時間計算，分別于患者發病后2、3、4、6個月采集血液標本，用化學發光法檢測血清中的新型冠狀病毒特異性IgG和IgM抗體。當樣本中抗體濃度>10.0AU/ml時，為有反應性，判為陽性，反之為無反應性，判為陰性。

1.4 統計學方法 所有數據用SPSSAU分析，計數資料以百分率表示，用χ2檢驗，計量資料先進行方差齊性檢驗，符合正態分布的以均數±標準差表示，用單因素方差分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者各階段特異性抗體陽性率比較 三組患者IgM抗體陽性率較低，至3個月時，只有極少數患者呈陽性反應，而IgG抗體陽性率高，至4個月時，各組陽性率仍高達87%以上，但到6個月時，也只有個別患者呈陽性。三組患者各階段特異性抗體陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 三組患者各階段特異性抗體陽性率比較(%)

2.2 三組患者各階段特異性抗體濃度變化比較 大部分患者在發病后，都產生針對病毒的特異性抗體，IgM消失快，濃度逐漸下降，IgG抗體在較長一段時間內呈現高濃度狀態，至6個月左右，抗體基本消失，三組患者各階段特異性抗體濃度比較差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表2。

表2 三組患者各階段特異性抗體濃度變化比較

3 討論

病毒侵犯機體后，一般經過3～7d的潛伏期后出現臨床癥狀，在這個過程中，病原體刺激機體免疫系統發生免疫應答，產生針對病原體的特異性抗體。在這一過程中產生最早的是IgM類抗體，一經感染，迅速產生，且消失較快，因此IgM抗體可作為近期感染的標志。稍晚產生的是IgG抗體，由于IgG抗體的產生晚于IgM抗體，且持續時間較長，因此，IgG抗體一般為感染中晚期或是恢復期的標志。新型冠狀病毒是冠狀病毒家族中的一員，現已證實，其抗體產生也遵循這一規律[1]。

目前臨床多采用RT-PCR方法檢測RNA做為診斷感染的依據，但是很多因素[2-3]影響核酸檢測的陽性率，為了彌補這一缺陷，國家衛健委《新型冠狀病毒肺炎防控方案(試行第七版)》[4]將特異性IgM、IgG抗體作為診斷的輔助指標，李萍[5]、徐萬洲[6]等對抗體的特異度和敏感度做了研究，其敏感度和特異度均較高，可作為新型冠狀病毒感染的有效篩查和診斷指標。

一般認為，隨著病情的好轉，IgM逐漸降低直至消失，而IgG抗體濃度會持續較長一段時間，若恢復期IgG由陰性轉為陽性或是濃度較急性期升高4倍以上，可作為復發的標志。因此，動態監測血清抗體濃度，明確其變化規律，對于明確治療效果、評估患者狀態及判斷病情轉歸具有重要意義，對于流行病學調查也具有重要的意義。

張兵華、謝毓濱等對新型冠狀病毒肺炎康復者較短時期內抗體變化做了研究[7-8]。本研究動態觀察新型冠狀病毒肺炎康復者血清中的抗體情況，分別于患者發病后2、3、4、6個月采集血清標本檢測抗體，以觀察較長時間內抗體的變化。研究發現，2個月時，IgM抗體陽性率已較低，三組的陽性率分別是25.00%、29.41%、62.50%，差異無統計學意義(P>0.05)。3個月時，只有極少數病例呈陽性。IgG抗體陽性率較高，至4個月時，三組的陽性率仍高達91.67%、87.06%、100.00%，但到6個月時，只有個別病例呈陽性。這也證實了IgM和IgG的變化規律，即隨著病情的好轉，IgM快速消失，而IgG持續較長一段時間。對于那些抗體陰性者，可能是因為檢測時，已過了高峰期，抗體濃度下降所致，也可能是有些患者免疫功能較弱，而沒有產生較高濃度的抗體所致。另外，也可能與試劑本身有關，李萍、徐萬洲等的研究顯示[5-6]，IgM和IgG抗體檢測的靈敏度分別只能達到70%左右和90%左右，故而有些患者雖然產生了抗體，但由于試劑靶抗原選擇的原因，而檢測不出，造成假陰性。

本次研究發現，大部分患者在發病后，都產生針對病毒的特異性抗體，一般IgG濃度高于IgM濃度，但有極少數患者IgG濃度小于IgM濃度的現象。2個月時，IgM一般表現為低濃度，但有2例輕型患者，IgM濃度仍異常增高，分別為495.45AU/ml和365.76AU/ml。IgG在較長一段時間內維持較高水平，下降緩慢，至4個月時仍有較高濃度，但到6個月時，濃度多已降到陰性值以下。張兵華等[7]的研究發現，IgG的峰值可能在40d左右，本研究的數據可能已過了峰值，處于緩慢下降期。

對SARS康復者的研究表明，重癥患者抗體濃度高于輕癥患者[9]，有學者[10]推測，新冠肺炎患者可能也是這樣。本研究發現，重型和危重型組在各階段的陽性率和濃度多高于輕型和普通型組，但經檢驗各組間比較沒有統計學差異。每組數值有高有低。個體差異較大，可能與個體的免疫反應的強弱有關，有人反應強，產生的抗體濃度高，反之則低。

通過以上研究發現，新型冠狀病毒肺炎患者康復后，大多能產生針對病毒的特異性抗體，但并不能產生持久的免疫力，IgM抗體可能在2～3個月后消失，而IgG抗體在半年左右消失。

本次研究不足之處在于：病例數太少，特別是重型和危重型患者太少，結果可能存在片面性；早期沒有監測抗體，未能監測到抗體達到峰值的時間；以及監測間隔時間太長，未能明確抗體轉陰的具體時間。