鼻咽部黏膜細胞FH檢測聯合EB-DNA、CEA在鼻咽癌早期診斷中的價值研究

高海彥 楊海寧 張會玲 王發治

甘肅省武威市涼州醫院 733000

鼻咽癌是耳鼻喉科疾病中一種常見的惡性腫瘤，好發于鼻咽腔頂部和側壁，在東南亞、華南地區常見[1-2]。鼻咽癌的發病率在頭頸部腫瘤中居于首位[3]，嚴重危害人類身體健康。鼻咽癌患者早期癥狀不明顯，不易與其他疾病區分開，加之生理解剖位置又比較隱蔽，一般體格檢查難以發現，給臨床診治工作帶來不少困擾。另外，鼻咽癌的局部復發率和遠處轉移率高，而總存活率很低[4]。因此，早發現早治療是改善鼻咽癌預后的關鍵環節，尋求有實際意義的高敏感性檢測方法對鼻咽癌患者提高生存率至關重要[5]。在本次研究中，對108例鼻咽癌患者、80例良性病變患者、80例健康體檢者進行FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的檢測，為臨床醫師對鼻咽癌的早期診斷提供依據。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，選取本院耳鼻喉科2018年6月—2020年6月收治的鼻咽癌患者108例作為A組，良性病變組80例作為B組。所有患者均以手術后病理活檢為金標準進行分組。同期選取選取體檢中心80例健康體檢者作為C組。其中A組年齡25～66歲，平均年齡(44.26±13.86歲)；B組年齡26～64歲，平均年齡(45.26±14.23歲)；C組年齡24～64歲，平均年齡(44.13±13.62歲)。排除標準：合并其他惡性腫瘤、免疫系統或血液系統疾病。三組研究對象的性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。所有入組患者均知情同意，本研究經醫院倫理委員會批準備案。

1.2 檢測方法 三組受試者禁食10h以上于第二天早晨8點空腹采集靜脈血各兩管：EDTA-K2抗凝2ml及無抗凝劑3ml。3 000r/min離心10min，取上清液進行檢測。采用中山大學達安基因股份有限公司實時熒光定量PCR儀檢測EB病毒DNA；采用德國貝克曼公司DXI-800全自動化學發光分析儀檢測CEA。所有檢測試劑均采用儀器配套試劑，所有檢測項目室內質控、室間質評均在控。同時，對所有入組患者采用鼻咽部黏膜滲液采樣器，從鼻咽部位緩慢插入，左右旋轉180°，按照鼻咽后壁、咽鼓管咽口及圓枕、咽隱窩的順序進行緩慢擦拭，采集鼻咽部黏膜滲液，并充分蘸取，將取樣器放入試劑內攪動，使其充分混勻，靜置10min后檢驗。

1.3 判斷標準 所有檢測項目的陽性標準均參考試劑盒說明書。EB病毒DNA檢測曲線呈典型的S型曲線且含量>1×103copies/ml時判定EB-DNA為陽性。CEA>5μg/L可判斷為陽性。FH檢測顯示藍色、綠色、藍綠色為陽性，不變色為陰性。聯合檢測中出現一項陽性即可判斷為陽性。

2 結果

2.1 三組患者血漿EB-DNA、CEA檢測比較 三組患者中A組患者的血漿EB-DNA、CEA檢測值顯著高于B組、C組，B組EB-DNA、CEA明顯高于C組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組患者的EB-DNA、CEA-檢測平均值比較

2.2 A、B組患者鼻咽部FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較 A組的鼻咽部黏膜細胞穩定性FH檢測、EB-DNA、CEA檢測陽性率明顯高于B組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 A、B組患者鼻咽部FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較(%)

2.3 鼻咽癌組患者各項聯合檢測的診斷效能比較 鼻咽癌組的FH檢測聯合血漿EB-DNA、CEA三項檢測的靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值、約登指數分別為92.60%，91.25%，92.02%，93.46%，90.12%，83.85%，三項聯合檢測的診斷效能均有很大程度提高。見表3。

表3 鼻咽癌組的EB病毒DNA、CEA、SF各項聯合檢測效能的比較(%)

3 討論

鼻咽癌是頭頸部的惡性腫瘤之一，轉移性和侵襲性都比較高，我國南方地區的發病率可以達到20～30/10萬[6]。鼻咽部腫瘤多在深部位置，不易發現，早期可能無癥狀或癥狀不明顯，容易誤診、漏診，錯過最佳診斷時間。手術有時無法完全切除原發病灶，因此轉移復發是鼻咽癌患者治療失敗最主要的原因[7]。臨床上早發現早治療是提高鼻咽癌患者生存率及預后的關鍵。

有研究表明[8]，EB病毒感染、食物以及遺傳是造成鼻咽癌發病地域不同的主要原因。EB病毒的檢測已經發展成為鼻咽癌早期診斷的主要實驗室指標之一。EB病毒是Epstein和Barr在1964年研究非洲兒童Burkitt淋巴瘤時發現的一種病毒，是傳染性單核細胞增多癥的病原體，與鼻咽癌密切相關。隨著分子診斷技術的飛速發展，EB-DNA已逐漸成為檢測鼻咽癌的早期診斷指標，具有敏感性高、特異性好的優點[9]。EB病毒的DNA一般采用實時熒光定量PCR檢測技術，能準確測定病毒的拷貝數，真實反映機體病毒的感染情況。EB病毒具有明顯的潛在癌基因，在一定的條件刺激下可從潛在狀態轉化為增殖狀態，在鼻咽癌腫瘤細胞中高度表達，且在早期階段有一定傳染作用[10]。因此對于鼻咽癌的早期診斷作用巨大。

CEA是一種酸性糖蛋白，具有人類胚胎抗原特性，可引起患者的免疫反應。它是一種廣譜的腫瘤標志物，在很多腫瘤細胞中均可表達，在大腸癌、結腸癌、卵巢癌、乳腺癌等中均有表達，針對某種腫瘤單獨檢測特異度、靈敏度不高。在腫瘤的鑒別診斷中一般和其他腫瘤標志物聯合檢測以提高靈敏度和特異度。在本研究中，CEA在鼻咽癌中也有一定程度的表達，這與何平[11]的報道一致。

鼻咽部黏膜細胞FH物質一般是以結合的形式存在于上皮細胞蛋白中。當一些致病因子出現以后會導致細胞穩定性失調、蛋白質的結構發生改變，FH物質從細胞的蛋白質中脫落下來，上皮細胞內FH物質含量也因此增加。基于鼻咽部黏膜細胞穩定性FH檢測可以提示鼻咽部細胞惡變的程度，是具有臨床疾病標志意義的亞細胞分子[12]。

臨床上針對鼻咽癌的單一檢測價值并不高，每一種腫瘤標志物均存在不同程度的缺陷。聯合檢測對提高鼻咽癌的早期診斷水平十分重要[13]。本研究中，鼻咽部黏膜細胞FH檢測聯合血漿EB-DNA、CEA檢測在鼻咽癌的早期診斷中具有較高的診斷效能，聯合檢測的指標可達到靈敏度92.60%、特異度91.25%、準確度92.02%、陽性預測值93.46%、陰性預測值90.12%、約登指數83.85%，這與邱燁等[14]的報道一致。但本次研究樣本量較小，觀察時間較短，尚需要加大樣本量進行更深層次研究。