哈薩克族食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19的表達情況及臨床意義

孫清超，宗 亮，張海平，張力為

（新疆醫科大學第一附屬醫院胸外科，新疆 烏魯木齊 830054）

調查顯示，我國哈薩克族食管鱗癌的發病率高達155.9/10 萬，比其他民族高2.3 倍[1]。食管鱗癌患者的病情十分隱匿，多數患者的病情都是在進入中期、晚期后才得到明確診斷，故此病患者的5 年生存率僅為14.6%～26.3%。盡早對食管鱗癌患者的病情進行準確的診斷并及時對其進行有針對性的治療對降低其死亡率具有十分重要的意義。有研究表明，LncRNA H19 在多類腫瘤的發生、發展中起到十分關鍵的作用[2]。在本文中，筆者主要是研究哈薩克族食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達情況及相關臨床意義。

1 對象和方法

1.1 研究對象

回顧分析2014 年7 月至2015 年12 月在新疆醫科大學第一附屬醫院接受手術治療的80 例哈薩克族食管鱗癌患者的臨床資料。在這80 例患者中，有男51 例，女29 例；其年齡為35 ～78 歲，平均年齡（51.6±4.1）歲；其中發病部位為胸上段食管的患者有10 例，為胸中段食管的患者有24 例，為胸下段食管的患者有46 例；其中低分化食管鱗癌患者、中分化食管鱗癌患者、高分化食管鱗癌患者分別有18 例、36 例、26 例；其中Ⅰ期食管鱗癌患者、Ⅱ期食管鱗癌患者、Ⅲ期食管鱗癌患者、Ⅳ期食管鱗癌患者分別有17例、29 例、25 例、9 例。

1.2 研究對象的納入及排除標準

納入標準：1）經病理檢查被確診患有食管鱗癌；2）民族為哈薩克族；3）未接受過抗腫瘤治療；4）其本人及其家屬均同意參與本研究，并簽署相關書面協議。排除標準：1）病歷資料不完整；2）發生腫瘤遠處轉移；3）無法正常接受隨訪。

1.3 方法

1.3.1 LncRNA H19 檢測 對這80 例患者進行LncRNA H19 檢測的方法是：對患者的瘤體組織進行切除。同時，切取腫瘤周圍的正常組織（切緣距離腫瘤的距離應＞5 cm）。于十分嚴格的無菌環境中，用配套試劑盒提取上述組織的總RNA，檢測其總RNA 溶液的吸光度。再以LncRNA H19 作引物和總RNA 逆轉錄的cDNA 作模板進行PCR 反應，將miRNA U6 的Ct值作為內參照，計算得出LncRNA H19 的相對表達量。1.3.2 隨訪 對這80 例患者進行為期5 年的隨訪，采用門診復查、電話回訪等方式了解并記錄其5 年生存率和中位生存期。

1.3.3 資料分析 收集這些患者的年齡、腫瘤所在位置、病情惡化與否等資料，分析其各項指標與LncRNA H19 表達水平的關系。觀察其中位生存期，并分析影響其中位生存期的因素。根據癌組織中LncRNA H19 表達水平的高低將其分為LncRNA H19 高表達組〔45 例，LncRNA H19 的相對表達量＞（7.57±0.14）〕與LncRNA H19 低表達組〔35例，LncRNA H19 的相對表達量≤（7.57±0.14）〕，并對比兩組患者的各項臨床指標。

1.4 統計學方法

對本研究所得數據均采用SPSS 22.0 軟件進行處理，計量資料用均數± 標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗或F 檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 這些患者癌組織與癌旁組織中LncRNAH19 的表達水平

這些患者癌組織中LncRNA H19 的相對表達量〔（7.57±0.14）〕高于其癌旁組織中LncRNA H19 的相對表達量〔（1.37±0.08）〕，P＜0.05。

2.2 LncRNAH19 高表達組患者與LncRNAH19 低表達組患者臨床資料的比較

LncRNA H19 高表達組患者中腫瘤臨床分期為Ⅰ～Ⅳ期患者的例數分別為8 例、12 例、18 例、7 例，其中腫瘤處于進展期的患者有19 例。LncRNA H19 低表達組患者中腫瘤臨床分期為Ⅰ～Ⅳ期患者的例數分別為9 例、17 例、7 例、2 例，其中腫瘤處于進展期的患者有5 例。兩組患者的腫瘤臨床分期相比，P＜0.05。兩組患者的年齡（＞60 歲、≤60歲）、性別（男、女）、腫瘤所在部位（胸上段食管、胸中段食管、胸下段食管）、腫瘤分化程度（低、中、高分化）相比，P＞0.05。

2.3 這些患者癌組織中LncRNAH19 表達水平與其生存率的關系

這80 例患者的隨訪時間為5 ～60 個月，平均隨訪時間（37.4±4.2）個月。LncRNA H19 高表達組患者的5 年生存率（20.7%）低于LncRNA H19 低表達組患者的5 年生存率（38.6%），χ2=4.715，P=0.005。詳見圖1。

圖1 這些患者LncRNA H19 表達水平與其生存率的關系

2.4 對這些患者的臨床資料進行單因素分析的結果

這些患者中各個腫瘤臨床分期患者的中位生存期相比，P＜0.05。這些患者中腫瘤處于進展期的患者與腫瘤未處于進展期患者的中位生存期相比，P＜0.05。這些患者中LncRNA H19 在癌組織中呈高表達的患者與LncRNA H19 在癌組織中呈低表達患者的中位生存期相比，P＜0.05。詳見表1。

表1 對這些患者的臨床資料進行單因素分析的結果

2.5 對這些患者的臨床資料進行多因素logistic 回歸分析的結果

進行多因素Logistic 回歸分析的結果顯示，腫瘤的臨床分期、腫瘤是否處于進展期、癌組織中LncRNA H19 的表達水平是這些患者中位生存期的影響因素，P＜0.05。詳見表2。

表2 對這些患者的臨床資料進行多因素logistic 回歸分析的結果

3 討論

在食管鱗癌的發生發展中，遺傳因素是十分重要的影響因素。其中，抑癌基因失活、原癌基因被激活是誘發食管鱗癌的主要因素[3]。LncRNA H19 位于人染色體11p15.5，全長2.7 kb, 是一個母系表達父系印記的基因，在多種腫瘤的發生發展中起著重要的作用。以往有研究發現，LncRNA H19 在肺癌、膀胱癌等癌癥患者的癌組織中均呈高表達水平。這與本研究的結果相一致。程勇等[4]在研究中指出，LncRNA H19 可通過靶向調控miR-675/EHZ2 來影響結腸癌細胞的增殖。趙軍方等[5]在研究中指出，LncRNA H19 可通過靶向調控miR-107/CDK6 信號軸來影響口腔癌細胞的侵襲及遷移能力[5]。近年來，隨著臨床上對LncRNA H19 研究的不斷深入，其在多種腫瘤發生發展中的作用相繼被證實。有研究指出，食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達水平越高，其預后越差。此病患者食管壁出現的癌轉移及浸潤程度的變化均與LncRNA H19 在其癌組織中的表達水平密切相關。食管鱗癌的發生機制十分復雜，LncRNA H19 并不是誘發此病的唯一基因[6]。就目前的研究結果來看，我們仍需對這些致病基因間的相互作用做進一步的研究。

本研究的結果表明，哈薩克族食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達水平高于其癌旁組織，其癌組織中LncRNA H19 的表達水平是其預后的影響因素。