前S1抗原、乙型肝炎病毒的脫氧核糖核酸及乙型肝炎五項檢驗對乙型肝炎患者肝纖維化的診斷價值

程涵芬

漢川市中醫院檢驗科 （湖北漢川 431600）

肝纖維化（Hepaticfibrosis，HF）是乙型肝炎（Chronic Hepatitis B，CHB）向肝硬化發展的必經階段，是一個發展變化的病理過程，故早期準確診斷乙型肝炎患者HF發生情況，并及時進行針對性治療，對抑制病情進展尤為關鍵。肝組織病理學活檢是診斷HF的金標準，但其屬于有創性操作，臨床應用具有局限性，因而需尋求準確、高效、無創的診斷方案。有研究表明，乙型肝炎五項能有效判定乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）的感染情況，有效診斷乙型肝炎［1］；乙型肝炎病毒的脫氧核糖核酸（hepatitis B virus－deoxyribonucleic acid，HBV－DNA）可定量反映病毒復制及繁殖情況，有效反映乙型肝炎疾病進展；前S1抗原是HBV外膜蛋白的主要成分，可影響病毒的感染及復制繁殖，反映乙型肝炎疾病進展情況［2］。鑒于乙型肝炎五項、HBV－DNA、前S1抗原與乙型肝炎疾病發生及進展的關系，推測乙型肝炎五項、HBV－DNA、前S1抗原或可診斷乙型肝炎患者HF情況?；诖?，本研究旨在探討前S1抗原和HBV－DNA及乙型肝炎五項檢驗對乙型肝炎患者HF的診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年12月至2020年1月我院收治的110例乙型肝炎患者作為研究對象。其中男65例，女45例；年齡35～75歲，平均（50.66±5.32）歲；乙型肝炎病程5～15年，平均 （8.50±1.50）年；體質量50～70 kg，平均（60.95±2.34）kg。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準。納入標準：符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》［3］中對乙型肝炎的診斷標準；患者簽署研究知情同意書且配合研究；心、肺、腎功能正常。排除標準：其他類型肝炎病毒感染；免疫功能異常；其他感染性疾病。

1.2 方法

1.2.1 血清樣本獲取

所有患者均在入院后抽取其空腹肘部靜脈血4～5 ml，置于含有枸櫞酸鈉的真空抗凝管1∶9進行抗凝處理，使用上海利鑫堅離心機有限公司提供的H－1600R型高速冷凍離心機，以3 200 r／min的速度離心處理10 min，分離出上層血清待檢。

1.2.2 乙型肝炎五項檢查

選擇美國雅培公司生產的試劑盒，采用化學發光法測定乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、乙型肝炎表面抗體（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、乙型肝炎e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、乙型肝炎e抗體（hepatitis B virus e antibody，HBeAb）、乙型肝炎核心抗體（hepatitis B core antibody，HBcAb）水平。正常范圍，HBsAg為0～0.05 IU／ml，HBsAb為0～10 mIU／ml，HBeAg為0～0.5 PEIU／ml，HBeAb為0～0.2 PEIU／ml，HBcAb為0～0.9 PEIU／ml。

1.2.3 HBV－DNA檢查

使用上海市科華生物技術有限公司提供的試劑盒及美國Pekin Elemer公司提供的GeneAmp 5700定量檢測儀，以熒光定量聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）法嚴格按照說明書操作測定HBV－DNA水平，正常范圍為＜1 000 IU／ml。

1.2.4 前S1抗原檢測

使用上海阿爾法生物技術有限公司提供的試劑盒及雷杜RT－6000酶標儀，以免疫雙抗夾心法測定前S1抗原水平。

1.2.5 肝組織病理學活檢

在完成上述檢查后，實施肝組織病理學活檢，連續切片獲取組織檢查標本，常規蘇木精－伊紅、網狀纖維染色后依據ISHAK組織學評分［3］判定HF程度，S0期無纖維；S1期匯管區纖維化擴大，局限于竇周及小葉內纖維化；S2期匯管區周圍纖維化，纖維間隔形成，小葉結構保留；S3期有纖維間隔伴小葉結構紊亂，無肝硬化；S4期有早期肝硬化。

1.3 評價指標

以肝組織病理學活檢結果作為金標準，分析前S1抗原和HBV－DNA及乙型肝炎五項檢驗對乙型肝炎患者HF的診斷價值。

1.4 統計學處理

采用SPSS24.0統計軟件進行數據處理，采用Shapiro－Wilk進行正態性檢驗，符合正態分布的計量資料以±s表示，組間數據比較采用獨立樣本t檢驗，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，繪制ROC曲線并計算曲線下面積（area under curve，AUC），AUC＞0.90表示診斷性能較高，0.71～0.90表示有一定的診斷性，0.50～0.70表示診斷性能較差，＜0.5表示無診斷價值，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肝組織病理學活檢結果

經肝組織病理學活檢確診，110例乙型肝炎患者中的未發生HF 35例，占31.82%，設為未發生組；發生HF 75例，占68.18%，設為發生組。

2.2 兩組乙型肝炎五項、HBV－DNA、前S1抗原情況比較

發生組HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原水平均高于未發生組，差異有統計學意義 （P＜0.05）；兩組HBsAb及HBeAb水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組乙型肝炎五項、HBV－DNA、前S1抗原情況比較（±s）

表1 兩組乙型肝炎五項、HBV－DNA、前S1抗原情況比較（±s）

注：HBsAg為乙型肝炎表面抗原，HBsAb為乙型肝炎表面抗體，HBeAg為乙型肝炎e抗原，HBeAb為乙型肝炎e抗體，HBcAb為乙型肝炎核心抗體，HBV－DNA為乙型肝炎病毒的脫氧核糖核酸

組別例數HBsAg（IU／ml）HBsAb（mIU／ml）HBeAg（PEIU／ml）HBeAb（PEIU／ml ）75 50.67±5.65 8.62±0.96 5.93±1.34 0.15±0.03未發生組35 25.36±3.20 8.61±0.93 1.85±0.25 0.14±0.04 t發生組24.681 0.051 17.827 1.459 P ＜0.001 0.959＜0.001 0.147組別例數HBcAb（PEIU／ml）HBV－DNA（IU／ml）前S1抗原（ng／ml ）75 8.49±1.15 2 500.25±300.15 1.24±0.23未發生組35 5.36±0.95 1 500.98±200.12 0.78±0.05 t發生組14.015 17.904 11.677 P ＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原單獨及聯合診斷乙型肝炎患者HF的效能分析

將乙型肝炎患者HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原水平作為檢驗變量，HF發生情況作為狀態變量（1＝發生，0＝未發生），繪制ROC曲線圖（圖1），結果顯示，HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原單獨及聯合診斷乙型肝炎患者HF的AUC均＞0.7，具有一定診斷價值，其中聯合診斷效能最好，見表2。

圖1 HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原單獨及聯合診斷乙型肝炎患者HF的ROC圖

3 討論

乙型肝炎病情遷移難愈，各種致病因子會破壞患者肝臟內細胞外基質合成與降解的穩態平衡，當細胞外基質大量形成并沉積在肝臟內后會引起HF。HF持續進展會導致正常肝實質細胞壞死和凋亡，使得肝實質逐步被細胞外基質形成的瘢痕組織取代，最終進展為肝硬化、肝癌甚至是肝衰竭，增加患者的病死率。因此，及早明確乙型肝炎患者HF發生情況，及早實施抗纖維化治療意義重大。

有研究表明，HF的本質是慢性肝病過程中可逆的肝組織損傷后機體整體參與的修復反應，與HBV感染、復制及繁殖情況密切相關［4］。乙型肝炎五項是臨床診斷乙型肝炎的重要手段，可有效反映HBV的感染情況［5］；HBV－DNA是反映HBV復制及活動狀態的敏感指標［6］；前S1蛋白是反映體內HBV復制繁殖能力、傳染性強弱的重要指標［7］。因此，臨床或可通過前S1抗原、HBV－DNA及乙型肝炎五項檢查來輔助診斷乙型肝炎患者HF發生情況。本研究結果顯示，發生組HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原水平均高于未發生組，提示可利用HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原等指標輔助診斷乙型肝炎患者HF發生情況。分析其原因為，HBsAg是乙型肝炎病毒最外層包膜中的一種外殼蛋白，可以刺激體內產生抗體，是感染HBV特異性標志物；HBeAg來自病毒核心，是由基因組表達的蛋白加工后分泌到細胞外，HBeAg存在提示HBV在體內高度活躍；HBcAb是機體感染HBV后在血液中最早出現的特異性抗體。伴隨著HBsAg、HBeAg、HBcAb的不斷升高，乙型肝炎病情可不斷進展，進而不斷損傷肝組織正常生理功能并引起肝組織結構的異常改變，肝組織可出現過度修復反應，增加HF發生風險。HBV－DNA是病毒的遺傳物質，可定量反映病毒復制情況，其水平升高提示病毒處于不斷復制及異?；钴S狀態，可不斷損傷肝組織功能與結構，增加HF發生率。HBV主要通過黏附在前S1蛋白內的肝細胞膜受體上進入肝細胞，前S1蛋白水平升高提示HBV復制繁殖能力增強，可加劇肝功能受損程度，增加HF發生風險［8］。本研究運用ROC進一步深入探討發現，HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原聯合診斷乙型肝炎患者HF的效能最好，提示臨床可利用HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原來診斷乙型肝炎患者HF發生情況。通過聯合診斷可以全面反映HBV感染、復制及繁殖情況，可彌補單項診斷的不足，更加全面地對乙型肝炎患者HF進行評估，提高診斷價值。

表2 HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBV－DNA、前S1抗原單獨及聯合診斷乙型肝炎患者HF的效能分析

綜上所述，前S1抗原、HBV－DNA及乙型肝炎五項診斷乙型肝炎患者HF均有較高的價值，且聯合診斷的價值更高。