甲狀腺乳頭狀癌患者術前超聲造影與淋巴結轉移、蛋白酶表達、術后無復發生存的相關性*

陸勝楠 施勝龍 侯劍華 黃春鑫 趙禹喆

1.齊齊哈爾醫學院附屬第三醫院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161099；2.齊齊哈爾醫學院附屬第二醫院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161000 3.齊齊哈爾市中醫醫院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161099

甲狀腺乳頭狀癌是臨床上最常見的甲狀腺癌類型，整體惡性程度較低、預后情況較好，但仍有部分甲狀腺乳頭狀癌患者容易早期發生淋巴結轉移并影響遠期生存率[1,2]。因此，本課題組提出假設：通過CEUS檢查能夠通過反映甲狀腺癌病灶內的微血管分布來評估病情。為了驗證這一假設及術前CEUS檢查對甲狀腺乳頭狀癌患者病情的評估價值，本研究具體分析了甲狀腺乳頭狀癌患者術前超聲造影與淋巴結轉移、蛋白酶表達、術后無復發生存的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年2月-2016年8月期間在我院接受手術切除治療的甲狀腺乳頭狀癌患者作為研究對象，入組標準：①接受甲狀腺全切除+頸部淋巴結擴大清掃；②經術后病理診斷為甲狀腺乳頭狀癌；③術前均接受CEUS檢查。排除標準：①甲狀腺病灶直徑<0.5cm；②對造影劑過敏；③既往有其他惡性腫瘤病史。共納入78例患者，包括男性44例、女性34例，年齡32-63歲、平均43.94±0.64歲，病灶直徑0.6-3.2cm、平均1.41±0.18cm。

1.2CEUS檢查方法 應用ARIETTA 70彩色超聲儀進行CEUS檢查，探頭頻率3-9MHz，造影劑為意大利 Bracco 公司生產的主要成份為磷脂包裹的六氟化硫(SF6)的聲諾維(SonoVue)。檢查時，患者取平臥位、頭后仰、充分暴露頸前區，進行常規超聲檢查后確定目標結節、選擇顯示病灶最大徑的切面，切換至超聲造影模式，將抽取配制好的造影劑混懸液 2.0 ml 經外周靜脈團注，隨后推注 5.0 ml生理鹽水沖管，注入造影劑的同時按下計時鍵及動態存儲鍵，連續觀察病灶灌注60s，觀察結節內增強程度以及被膜侵犯情況，計算達峰時間(TTP)和平均通過時間(MTT)[3]。

1.3MMP2、MMP9的免疫組化染色方法 取手術切除的甲狀腺癌病灶，制作石蠟切片。結果判讀，陽性細胞數<10%、著色較淡為陰性，陽性細胞數≥10%、著色呈棕黃色顆粒者為陽性。

1.4術后無復發生存的隨訪 手術結束后進行隨訪，隨訪截止時間為2018年12月，記錄患者無復發生存情況。

1.5統計學方法 采用SPSS21.0軟件錄入數據，組間計數資料的比較采用卡方檢驗、計量資料的比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1CEUS特征、參數與淋巴結轉移的相關性 CEUS的圖像如圖1所示。CEUS高增強、等增強、低增強患者的淋巴結轉移率比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的淋巴結轉移率比較有顯著性差異(P<0.05)。淋巴結轉移患者的CEUS參數TTP、MTT均明顯低于無淋巴結轉移患者，差異有統計學意義(P<0.05)。

圖1 甲狀腺癌的CEUS圖像左圖顯示病灶內高增強、邊界不清、被膜受侵犯；右圖顯示病灶內低增強、邊界清晰、被膜未受侵犯。

2.2超聲造影特征、參數與蛋白酶表達的相關性 甲狀腺癌病灶內MMP2、MMP9免疫組化染色如圖2所示。CEUS高增強、等增強、低增強患者甲狀腺癌病灶內MMP2、MMP9的陽性表達率比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者甲狀腺癌病灶內MMP2、MMP9的陽性表達率比較有顯著性差異(P<0.05)。MMP2、MMP9陽性表達患者的CEUS參數TTP、MTT均明顯低于MMP2、MMP9陰性表達患者(P<0.05)。

圖2 蛋白酶的免疫組化染色圖左圖為MMP2的免疫組化染色圖右圖為MMP9的免疫組化染色圖。

2.3超聲造影特征與術后無復發生存的相關性 CEUS高增強、等增強、低增強患者的術后無復發生存曲線比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的術后無復發生存曲線比較有顯著性差異(P<0.05)。

3 討 論

本研究對甲狀腺乳頭狀癌患者CEUS特征與MMP2、MMP9表達的相關性進行了分析，結果如下：CEUS增強信號越強、MMP2及MMP9的陽性表達率越高，被膜受侵犯患者的MMP2及MMP9的陽性表達率高于被膜未受侵犯患者。這一結果提示CEUS特征與MMP2、MMP9的表達存在相關性，MMP2和MMP9的高表達能夠增加病灶內血供、促進病灶被膜受侵犯，進一步通過分析MMP2、MMP9表達與CEUS參數的關系可知：MMP2、MMP9陽性表達患者的CEUS參數TTP、MTT均明顯低于MMP2、MMP9陰性表達患者。這一結果與CEUS特征與MMP2、MMP9表達相關性的分析結果一致，提示MMP2、MMP9是引起甲狀腺乳頭狀癌患者CEUS特征及參數變化的分子，兩者的高表達有利于增加病灶內血供。

綜上所述，甲狀腺乳頭狀癌患者術前超聲造影與淋巴結轉移、蛋白酶表達、術后無復發生存存在相關性，能夠用于病情評估。