醫(yī)療器械最終沖洗水中月桂醇聚氧乙烯醚硫酸鈉殘留量測(cè)定

劉延忠，蔡 虎

（1. 甘肅省醫(yī)療器械檢驗(yàn)檢測(cè)所，甘肅 蘭州 730070； 2. 陜西省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，陜西 咸陽(yáng) 712046）

月桂醇聚氧乙烯醚硫酸鈉（AES）為通過(guò)非離子月桂醇聚氧乙烯醚（AEO－3）經(jīng)硫酸化、中和等過(guò)程，由聚氧乙烯鏈連接親水基和疏水基的表面活性劑。其分子結(jié)構(gòu)具有氧乙烯基團(tuán)和硫酸化基團(tuán)，兼有非離子表面活性劑和陰離子表面活性劑（LAS）的優(yōu)點(diǎn)，具備雙重性能［1］，去污、乳化、潤(rùn)濕、增溶、溶解、發(fā)泡等性能均好，抗硬水性強(qiáng)，配伍廣［2－3］，生物降解度高，對(duì)皮膚和眼睛的刺激性低［4－6］。此外，用 AES 部分取代 LAS 還可少用或不用磷酸鹽，并減少總活性物的用量。近年來(lái)，AES 被廣泛用于包括生物醫(yī)藥在內(nèi)的各個(gè)領(lǐng)域，尤其是一次性使用高分子醫(yī)療器械在末道清洗工藝中常選用一定濃度的AES 為清洗劑。比較傳統(tǒng)分光光度法［7－8］、兩相滴定法［9－10］、色譜法［11－12］、電化學(xué)法［13－14］后，本研究中選擇儀器普及率高、操作簡(jiǎn)便、靈敏、快速和重復(fù)性好的分光光度法［15］測(cè)定醫(yī)療器械最終沖洗水中AES 的殘留量?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

DU800 型紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)Beckman公司）；KQ－100VDE 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，功率為 100 W，頻率為 45 kHz）；MS105DU 型電子分析天平（德國(guó)梅特勒－托利多公司，精度為十萬(wàn)分之一）；分液漏斗（配有聚四氟旋塞，規(guī)格為250 mL）。

1.2 試藥

三氯甲烷（色譜純），亞甲藍(lán)（指示劑級(jí)），異丙醇（分析純），均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；一水磷酸二氫鈉（分析純，上海麥克林生化科技有限公司）；AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液（分析純，含量為98%，山東西亞化學(xué)試劑有限公司）；純化水（自制），最終沖洗水（西安× ×醫(yī)療器械有限公司，批號(hào)分別為 190516，190517，190518）。

2 方法與結(jié)果

2.1 定量分析原理

陽(yáng)離子染料亞甲藍(lán)與LAS 作用，生成亞甲藍(lán)活性物質(zhì)，用三氯甲烷萃取，其吸光度與濃度成正比，用分光光度計(jì)在652 nm 波長(zhǎng)處測(cè)量三氯甲烷層的吸光度，可對(duì)LAS 進(jìn)行定量分析。

2.2 溶液制備

取0.1 g AES，精密稱定，加水溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，定容，搖勻，保存于4 ℃冰箱內(nèi)，即得AES 貯備液。臨用新配，精密吸取AES 貯備液1.0 mL，置100 mL容量瓶中，用水定容，搖勻，即得AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液。取一水磷酸二氫鈉25 g，溶于150 mL 水中，轉(zhuǎn)移至500 mL 容量瓶中，緩慢加入濃硫酸3.4 mL，搖勻；取亞甲藍(lán)15 mg，加25 mL 水溶解，轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用水定容，搖勻，即得亞甲藍(lán)溶液。貯存于棕色試劑瓶中。

2.3 方法學(xué)考察

檢測(cè)限（LOD）和定量限（LOQ）考察：對(duì)于光譜法，可與空白信號(hào)區(qū)別的最小信號(hào) XL由下列公式確定：式中，表示空白信號(hào)的平均值；Sb表示空白信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差；k 為根據(jù)置信水平確定的系數(shù)，國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)建議取值為3。由上式可知，LOD 為能產(chǎn)生凈響應(yīng)信號(hào)的被測(cè)物的濃度或質(zhì)量。為確定空白信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差和平均值，測(cè)定20 個(gè)空白樣品的響應(yīng)值（見(jiàn)表 1）。結(jié)果，Sb＝0.001 335，即 LOD 的凈響應(yīng)信號(hào)值為 0.004 004。配制 1，2，3 μg 的標(biāo)準(zhǔn)樣品，對(duì) LOD 進(jìn)行復(fù)核，LOQ 為 LOD 的 3 倍，結(jié)果見(jiàn)表 2?？梢?jiàn)，該方法的 LOD 為 1 μg，LOQ 為 3 μg。

表1 20 個(gè)空白樣品響應(yīng)值測(cè)定結(jié)果Tab.1 Determination results of response value of 20 blank samples

表2 標(biāo)準(zhǔn)樣品響應(yīng)值測(cè)定結(jié)果Tab.2 Determination results of response value of standard sample

標(biāo)準(zhǔn)曲線考察：取梨形分液漏斗7 只，按表3 分別加入純化水和一定體積AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別加入25 mL亞甲藍(lán)溶液和5 mL 異丙醇，搖勻，用單標(biāo)線刻度吸管分別加入15 mL 三氯甲烷，密塞，劇烈振蕩30 s，置漏斗架上靜置分層，在各分液漏斗下出口處塞入少量處理后的脫脂棉（脫脂棉在索氏提取器中用三氯甲烷提取4 h，取出，干燥），將三氯甲烷層通過(guò)脫脂棉，置具塞錐形瓶中，即 得 AES 含 量 為 3.069，5.115，10.230，20.460，30.690，40.920 μg 的系列 AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液，以三氯甲烷為空白溶液，在625 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定上述待測(cè)溶液的吸光度。以標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度減去空白樣品的吸光度（Y）為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)樣品含量（X，μg）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。得回歸方程 Y ＝0.012 7 X －0.015 9（r ＝0.999 8，n ＝ 6）。結(jié)果表明，AES 含量在 3.069 ～ 40.920 μg 范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

表3 AES 系列標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法（mL）Tab.3 Preparation method of AES series standard solution（mL）

加樣回收試驗(yàn)：取分液漏斗7 只，分別加入100 mL最終沖洗水，其中6 只加入AES 標(biāo)準(zhǔn)溶液（質(zhì)量濃度為25 μg ／ mL）各 200 μL，加入亞甲藍(lán)溶液 25 mL、異丙醇5 mL、三氯甲烷15 mL，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法測(cè)定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 AES 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n ＝6）Tab.4 Results of the recovery test of AES（n ＝6）

重復(fù)性試驗(yàn)：由于樣品實(shí)測(cè)值低于LOD，故重復(fù)性試驗(yàn)的 RSD 值采用加樣回收試驗(yàn)的 RSD 值3.00%。

2.4 樣品殘留量測(cè)定

精密量取 3 批（批號(hào)分別為 190516，190517，190518）最終沖洗水各100 mL，分別置250 mL 分液漏斗中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線考察項(xiàng)下方法操作，測(cè)定待測(cè)溶液在652 nm 波長(zhǎng)處的吸光度，以純化水為空白對(duì)照，將樣品溶液測(cè)得的吸光度減去空白樣品的吸光度并帶入線性回歸方程，計(jì)算最終清洗水中AES 的殘留量。結(jié)果3 批最終沖洗水中均未檢出AES，均符合要求。

3 討論

參考《水質(zhì)陰離子表面活性劑的測(cè)定亞甲藍(lán)分光光度法（GB7494－87）》《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法（第四版）》中陰離子洗滌劑亞甲藍(lán)的分光光度測(cè)定方法，加入5 mL 異丙醇，以避免提取過(guò)程中因振搖而發(fā)生乳化現(xiàn)象。比較了pH 值對(duì)結(jié)果的影響，結(jié)果無(wú)論是否調(diào)節(jié)pH值，檢測(cè)結(jié)果均不存在差異，故最終未調(diào)節(jié)pH 值。萃取時(shí)，采用色譜純級(jí)別的三氯甲烷，極大降低了空白值，方法的 LOD 由 5 μg 降至 1 μg。同時(shí)，分離三氯甲烷層后無(wú)需再次定容，可直接測(cè)定，極大簡(jiǎn)化了測(cè)定過(guò)程，減少了三氯甲烷的用量。比較了異丙醇的純度級(jí)別，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論采用分析純或色譜純進(jìn)行測(cè)定，對(duì)空白值和檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著影響。

綜上所述，本研究中建立的分光光度法LOD 低，靈敏度高，重復(fù)性好，可用于最終沖洗水中AES 殘留量的測(cè)定。