李志賽 , 張鑫屹 , 朱 萌 , 周 媛 , 代飛燕 , 肖 嘯
(1.云南農業大學動物醫學院 , 云南 昆明 650201 ; 2.昆明市動物疫病預防控制中心 , 云南 昆明 650201)
近年來,動物腫瘤病的發病率明顯提高,尤其在小動物,如犬、貓腫瘤病的發病率明顯提高,這種情況是多方面原因導致的,而且大多與動物的生活習性有關,并且在老年動物中呈上升的趨勢[1],犬發生腫瘤的機率要大于貓。研究犬腫瘤性疾病就越發的重要,目前診斷腫瘤最為有效的方法是組織病理學檢查[2]。本試驗采集了2018—2019年昆明地區動物醫院犬腫瘤病例,并進行了研究和分析,希望對動物醫院犬腫瘤性疾病診斷提供參考。
1.1 材料 63例腫瘤病料于2018—2019年在云南農業大學附屬動物醫院和昆明市瑪斯康特動物醫院收集。
1.2 方法
1.2.1 臨床腫瘤病例的收集 對來院就診的犬進行臨床檢查,基于臨床的初步癥狀和犬病史的調查,對患有腫瘤的犬與主人協商實施腫瘤摘除手術,收集摘除的腫瘤組織。
1.2.2 腫瘤組織的樣品采集和組織切片的制作 去除手術切除腫瘤組織上多余的脂肪成分,用手術刀切取約1 cm3的腫瘤組織塊,將其置于4%多聚甲醛固定液中,固定48~72 h,固定好后,常規石蠟包埋,切片厚度3 μm,常規H.E.染色,采用Nikon Eclipse E100顯微鏡觀察切片。
1.2.3 腫瘤的分類與相關影響因素的分析 根據病理組織切片的分析結果,對63例腫瘤組織進行鑒定和分類,并對病例動物的品種、性別、年齡、腫瘤發生部位進行了統計和分析。
2.1 腫瘤組織病理組織學檢查 本試驗共收集疑似腫瘤病樣63例,全部確診為腫瘤,其中惡性腫瘤29例,良性腫瘤34例;乳腺腫瘤發病率最高,占全部腫瘤的35.9%;其次是皮下腫瘤,占全部腫瘤的25.4%。
2.2 腫瘤與品種、年齡、性別、腫瘤發生部位的分析 對不同品種犬的發病部位進行了統計,結果見表1,田園犬的發病率最高,其次是泰迪犬和金毛犬。不同年齡犬的臨床腫瘤發生情況統計結果見表2。從4歲開始犬就有可能發生腫瘤性疾病,7~10歲是犬發生腫瘤性疾病的高發年齡。不同性別犬的臨床腫瘤發生情況統計結果見表3。

表1 不同品種犬的臨床腫瘤發生情況統計 (只)

表2 不同年齡犬的臨床腫瘤發生情況統計 (只)

表3 不同性別犬的臨床腫瘤發生情況統計 (只)
2.3 皮下腫瘤分析 浸潤性脂肪瘤見中插彩版圖1A1和圖1A2,高分化皮下脂肪肉瘤,由成熟的單泡脂肪細胞構成,細胞大小不一,脂肪細胞間質有纖維間隔。乳腺混合瘤見中插彩版圖1B1和圖1B2,瘤組織內可見大量增生的梭形細胞、卵圓形細胞,還可見骨及軟骨,且軟骨樣組織突破包膜向周圍呈灶狀浸潤。肛周腺癌見中插彩版圖1C1和圖1C2,大量肝樣細胞腺管狀排列,胞質豐富,嗜堿性,細胞大小不一,并可見較多核分裂相,癌灶間質可見灶狀鱗狀上皮化生。精原細胞瘤見中插彩版圖1D1和圖1D2,腫瘤組織呈巢狀,細胞體積大,呈圓形,細胞界限分明,胞漿透明,呈嗜酸性,核仁明顯,位于核中央,未見明顯核分裂相;腫瘤細胞間質血管擴張,充滿紅細胞。海綿狀血管瘤見中插彩版圖1E1和圖1E2,多量血管、腔壁厚薄不一,管腔較大、擴張,腔內充滿血液。腺瘤見中插彩版圖1F1和圖1F2,腺上皮增生,呈團狀排列,細胞無異型,腺體分泌物潴留、鈣化。梭形細胞瘤見中插彩版圖1G1和圖1G2,梭形腫瘤細胞排列成席紋狀、條索狀,瘤細胞間含膠原,部分區域細胞密度較高,可見核分裂(<4個/10HPF)。平滑肌瘤見中插彩版圖1H1和圖1H2,腫瘤梭形、細胞無異型,束狀排列,可見圍繞血管生長,瘤細胞間見膠質,有細胞疏松區和豐富區。毛囊瘤見中插彩版圖1I1和圖1I2,真皮內見囊腫,囊壁見毛根、毛鞘、毛球、毛乳頭等分化,囊內見毛干和角質。平滑肌肉瘤見中插彩版圖1J1和圖1 J2,腫瘤內見大片地圖狀凝固性壞死,腫瘤細胞梭形、編織狀排列,細胞密集,核分裂易見。血管肉瘤見中插彩版圖1K1和圖1K2,腫瘤細胞異型,可見核分裂,形成血竇網、實性片狀或在血管腔內堆積形成乳頭,在腎內浸潤性生長,可見大片出血、壞死。免疫組化:腫瘤細胞見中插彩版圖1K3和圖1K4,CD31(+)、CD34(-)、CD10(-)、CK7(-)。CD31(+)表示腫瘤來源于血管源性,CD34(-)與CD10(-)主要區分是否來自腎源性,CK7(+)表示來源于卵巢、肺和乳腺上皮源性。惡性黑色素瘤見中插彩版圖1L1和圖1L2,腫瘤細胞體積小,胞漿少,藍染,少量細胞含黑色素,彌漫性浸潤性生長,表皮內可見腫瘤細胞。免疫組化結果:見中插彩板圖1L3,Melan-A(+)、GFAP(-)、CK(-)、SMA(-)、CD99(-)、CA199(-)。Melan-A(+)與GFAP(-)區分是否來自神經源性,CK是上皮源性標記,SMA是肌源性標記,CD99(-)主要鑒別滑膜肉瘤、原始神經胚層腫瘤,CA199是上皮標記。黑色素瘤見中插彩版圖1M,真皮內見梭形痣細胞,細胞內及細胞外見大量黑色素沉著,細胞結構不清。
隨著社會經濟的發展,腫瘤疾病的診斷方法也日新月異,包括常規的腫瘤組織病理學診斷、細胞學診斷、生化檢查、免疫組織化學檢查、影像學診斷及分子生物學診斷等[3-4]。組織病理學檢查和免疫組織化學的檢查仍是腫瘤確診可依據的最有效方法。臨床上犬皮膚腫瘤最為常見,約占全部腫瘤的1/3,本試驗中犬皮膚腫瘤的發病率約為53.1%;臨床上排第2位的是犬乳腺腫瘤,占母犬腫瘤的25%~42%,其中乳腺癌又占到乳腺腫瘤的50%左右[5-9];本試驗中乳腺腫瘤的發病率為35.9%。年齡因素也是對犬腫瘤病發病率影響的重要因素之一,本試驗發現,4歲以上的犬均有機率發生腫瘤病,7歲以上的犬發病的機率更大。通過本次調查發現,犬皮下腫瘤和犬乳腺腫瘤的發病率為犬高發的腫瘤性疾病,因此需對這些疾病加以關注。本試驗通過組織病理學診斷分析了昆明地區犬常見腫瘤性疾病,希望對臨床上犬腫瘤性疾病的診斷提供參考。