牛結節性皮膚病（lumpy skin disease，LSD）臨床診斷與防治

格桑央宗

摘 要：2019 年 8 月 12 日我國首次確診在新疆伊犁地區爆發牛結節性皮膚病，為充分認識和做好該病的防控工作，防止外來疫情擴散蔓延到我區，現將該病的臨床癥狀、檢測技術以及我區的防控對策進行概括介紹，為有效控制、凈化和根除該病提供指導。

關鍵詞：牛結節性皮膚病;癥狀;檢測;診斷;防控

牛結節性皮膚病（LSD）是由痘病毒科（Poxviridae）、山羊痘病毒屬（Capripoxvirus， CaPV）的牛結節性皮膚病病毒（lumpy skin disease virus，LSDV）引起的，表面廣泛性結節、淋巴結腫大、皮膚水腫為特征的傳染病. LSDV 的自然宿主主要是牛，各品種牛均易感， 無明顯的品種特異性。 家兔、綿羊、山羊、長頸鹿和 黑羚羊等也可能被感染，但沒有證據表明 LSDV 能感染人。OIE 規定的須通報的疫病，《 中國人民共和國進境動物檢疫疫病名錄 》（農業農村部公告 256 號 [2020] ）列為 一類傳染病 。農業農村部《關于做好牛結節性皮膚病防控工作的緊急通知》（農牧發 [2019]26 號）暫對其按 二類動物疫病進行管理。根據農業農村部通知， 1987年、 2002 年在河南、黑龍江 報道疑似病例; 2019 年8月10日，首次在新疆伊犁哈薩克自治州確診，發病 240 頭，死亡2 2 頭; 截至 2021 年5月28日，全國累計15個省、市、自治區發病，累計發病 3272 頭，死亡64 ，捕殺3148頭。

1 牛結節性皮膚病概述

1.1流行病學

該病自然感染的潛伏期 2～5 周，試驗感染的為 4～12 d，通常為 7 d。 病牛體溫升高，可達 41 ℃以 上，呈持續稽留熱型。 初期表現為鼻炎、結膜炎、角膜炎。試驗性感染后第 4～12 天體表皮膚出現硬實、 圓形、隆起、直徑 1～5 cm 的結節，觸摸有痛感，尤其 是頭部、頸部、胸部、會陰、乳房和四肢。 皮膚結節位 于表皮和真皮，可集聚成不規則的腫塊，最后壞死。 病牛體表淋巴結腫大，以肩前、腹股溝外、股前、后肢 和耳下淋巴結最為突出。 眼、鼻、口腔、直腸、乳房和 外生殖器等處黏膜也可形成結節和潰瘍。 泌乳牛可 發生乳房炎，泌乳量下降，孕牛發生流產，公牛病后 不育，肉牛生產性能下降，皮張無法利用。 解剖皮下組織可見灰紅色漿液浸潤。切開結節， 腔內含有干酪樣灰白色的壞死組織，有的有膿血，結 節深達皮下組織或至肋骨組織。 體表、咽、氣管、肺、 瘤胃、皺胃、腎臟表面都可能有類似的結節。在病初， 受損細胞內可見嗜酸性包涵體。 根據這些臨床癥狀 和病理變化特征可以進行初步診斷， 但確診需要進 一步進行實驗室病原學和血清學檢測。 LSDV 能感染所有的牛類， 發病率 5%～85%， 死亡率可達 20%，其中泌乳牛發病最嚴重，導致泌乳牛產奶量顯著下降。由于睪丸炎和睪丸萎縮，可致公牛永久性或暫時性不育，并通過精液長期排毒。另 外，可導致奶牛暫時性不育、流產和胎兒發病。此外， 結節性和壞死性皮膚，易受蚊蠅等昆蟲叮咬，在皮膚中留下深孔，影響皮毛質量 。

1.2 病原學特征

LSDV 是一種線性dsDNA 病毒 ， 其基因組大小為146090 ～150793 bp （151321bp） ） 。病毒粒子結構復雜 ， 有兩種不同的感染性形式：細胞內成熟的病毒 （IMV） ：外包一單層膜，一直留在細胞內直至細胞被裂解 。 細胞相關囊膜病毒 （CEV） （停留在細胞表面）， 或細胞外囊膜病毒 （EEV） （當再包裹一層膜后，在細胞死亡前從細胞表面釋放出）。與GTPV 和SPPV 在病原生物學 、 免疫學均具有很高的相似性 ， 具有廣泛的血清學交叉反應和交叉保護作用，并具有相對嚴格的種屬特異性 。在形態，理化和血清學上無法區別，只能通過基因組加以區分。

1.2.1外環境中的穩定性

病毒粒子可于pH6.6 ～8.6 環境中長期存活。在4 ℃ 甘油鹽水和組織培養液內存活4-6 個月。室溫，干燥痂皮中可存活1個月以上，在干燥圈舍內可存活幾個月 ;寒冷干燥環境下可存活數年 。病毒耐凍融，置-20 ℃ 以下保存，可保持活力達幾年之久;在-80℃ 可保存10 年。紫外線能使病毒DNA 的嘧啶形成二聚體，致使LSDV 迅速被滅活。在自然條件下，LSDV 失活主要是溫度和陽光中紫外線共同作用的結果。電離輻射均可使病毒滅活 。

1.2.2溫度敏感性

在低溫下LSDV十分穩定，病毒在4 4 ℃ ～7 7 ℃可存活數月，-20℃以下，特別是-50℃ 、-70℃等溫度條件下十分穩定，可保存數年之久。LSDV 對熱比較敏感，對熱敏感， 55 ℃2h或65 ℃30min。

1.2.3 消毒劑敏感性

成熟LSDV 病毒顆粒大部分以裸露的形式留在細胞內，為胞內裸病毒（INV ），還有一些是胞內成熟病毒（IMV ）， 另有少部分釋放到胞外，成為胞外帶宿主胞膜病毒（EEV ）。除了包內病毒粒子，其他成熟的病毒粒子均含有囊膜，而且EEV 不但有囊膜，而且還包裹了一層宿主細胞膜。這使得LSDV和其它的病毒一樣對消毒劑較其他病毒耐受。 對10%漂白粉、2%的硫酸鋅溶液有一定的抵抗力。 對乙醚（20% ）、氯福爾馬林（1%） 、去污劑如十二烷基硫酸鈉敏感，石碳酸（2%15 分鐘）、次氯酸鈉（2-3% ）碘化合物（1：33 ）、衛可（1% ）、季銨類化合物（0.5%）可使其滅火。

1.3臨床特征

人工感染后6～9天，出現發熱，體溫>40.5 ℃/41℃，持續約7天左右;發生鼻炎、結膜炎;泌乳牛產奶量明顯降低; 體表長出直徑2～5 cm的結節，頭部、頸部、乳房和會陰部尤為常見。結節侵害表皮和真皮，初期有漿液滲出，兩周后，有的變成壞死栓，穿透厚厚的皮層;所有體表淋巴結腫大，肢體水腫、不愿活動;眼、鼻、口腔、直腸、乳房和外生殖器黏膜上的結節很快發生潰瘍。出現臨床癥狀后，眼和鼻分泌物變為黏膿性分泌物，并可能出現角膜炎;呼吸系統和消化系統器官表層（真胃、肺）也可出現結節，并進一步引起原發性和繼發性肺炎;懷孕母牛發生流產，有報道稱流產胎兒被結節包裹，公牛患LSD可導致永久性或暫時性不育。機體消瘦，可能發生肺炎和乳房炎。皮膚壞死栓招致蠅蟲叮咬，且脫落后留下深洞。重度感染時恢復緩慢。口腔、喉、氣管、膽囊、子宮、鄒胃等粘膜上產生潰瘍灶（結節）;嚴重病例，氣管、肺臟結節可導致肺炎。

1.4病理變化

病理變化是發病牛呼吸道出現痘狀瘢痕，心臟出現痘狀病變，膽囊、消化道、等出現痘狀病變和出血。

2實驗室檢測

2.1抗體檢測

采集全血分離血清用于抗體檢測，可采用牛結節性病毒競爭ELISA、牛結節性皮膚病間接ELISA抗體檢測試劑盒。

2.2病原檢測

采集皮膚結痂、口鼻眼肛拭子、抗凝血等用于病原檢測。病毒核酸檢測可采用qPCR、PCR等方法。病毒分離鑒定科采用細胞分離培養病毒、動物回歸試驗等方法。

3綜合防控措施

3.1疫情報告與確認

LSD 實施快報制度：可疑疫情、疑似疫情和確診疫情。 可疑疫情：任何單位和個人發現后，報當地縣獸醫主管部門、動物衛生監督機構或動物疫病防控機構，派2 2 名中級以上技術人員到現場診斷與流調，并采樣送檢。 疑似疫情：可疑病例樣品經縣級以上或認可的實驗室檢測為LSDV 陽性者，為疑似。 確診疫情： ： 疑似病例樣品經省級或授權認可的實驗室復診為LSDV 陽性者，為確診（各省市區首例疫情須中國動物衛生與流行病學中心或認可的實驗室確認）。

3.2疫情處置

3.2.1疫點、疫區和受威脅區

3.2.1.1疫點： 規模化養殖場，以病牛所在的場為疫點;散養場，以病牛所在的自然村為疫點;放牧牛以放牧場地為疫點;運輸過程中，以所載病牛的車、船和飛機等運輸工具為疫點;在市場交易、屠宰過程，分別以交易市場、屠宰場為疫點。

3.2.1.2疫區：疫點邊緣向外延伸3 3 公里的區域。

3.2.1.3 受威脅區：由疫區邊緣向外延伸 10 公里的區域。應根據當地天然屏障（河流、山脈等）、人工屏障和野生動物棲息地、媒介生物分布與活動等，以及疫情追溯調查結果，綜合判斷確定。p

3.3封鎖

所在地縣級以上獸醫主管部門報請同級人民政府對疫情實行封鎖;跨行政區的疫情，由有關行政區共同的上一級人民政府對疫情實行封鎖。對疫點采取的措施（消滅傳染源）： 撲殺并銷毀所有 的發病牛和病原學陽性牛，病死、撲殺的牛及其產品無害化處理;同群病原學陰性牛隔離飼養，防止蟲媒叮咬，提前出欄屠宰。實施蟲媒控制措施： 殺滅飼養場所吸血昆蟲 ，清除其孳生地。對牛的排泄物、污染物或可能被病原污染的飼料、墊料和水源進行無害化處理。 被污染的或可能被污染的物品、交通工具、圈舍及場地徹底消毒，出入車輛、人員和相關設施按規定消毒（污染物消毒）。p

3.4疫區采取的措施

禁止牛只出入，禁止檢驗不合格的皮張、精液和胚胎等產品調出。 實施蟲媒控制措施，殺滅飼養場所吸血昆蟲，清除其孳生地（自然疫源地，星星之火）。對養殖場、牧場、交易市場、屠宰場的牛只檢測排查、感染風險評估，及時掌握疫情動態。在疫情封鎖周圍設立警示標志，出入疫區的交通路口設立檢查站。

3.5受威脅區采取的措施

禁止牛只出入，禁止檢驗不合格的皮張、精液和胚胎等產品調出。 實施蟲媒控制措施，殺滅飼養場所吸血昆蟲，清除其孳生地。對養殖場、牧場、交易市場、屠宰場的牛只檢測排查、感染風險評估，及時掌握

3.6疫情動態（ 病毒與抗體檢測 ）

緊急免疫接種： 我國推薦山羊痘疫苗（5 5 倍羊量）免疫 健康非感染牛LSDV 弱毒苗病毒滴度 2.5- 3.5 TCID50 ，保護期1 1年; 80%- 100% 免疫覆蓋率 ，或 95% 的群體 75% 的個體免疫; 免疫或感染的母牛的犢牛3 3- -4 4 月齡免疫（ 母源抗體 ）;放牧（新引進）牛在轉（入）場前 28 天免疫。

3.7檢疫監督

撲殺完成后30天內，禁止疫情所在地活牛調出。各地在檢疫監督過程中，要加強對牛結節性皮膚病臨床癥狀的查驗。

3.8疫情溯源

對疫情發生前30內，對引入疫點的所有牛只及牛皮張等產品進行溯源性調查，分析疫情來源;當有明確證據表明牛只存在疫情風險時，對輸出地牛群進行隔離觀察及采樣檢測，對牛皮張等產品進行消毒處理。

3.9疫情追蹤

對疫情發生前30天至采取隔離措施前，對從疫點輸出的牛及牛皮張等產品進行跟蹤調查，分析評估疫情擴散風險;對有流行病學關聯的牛進行隔離觀察及采樣檢測，對牛皮張等產品進行消毒處理。

3.10解除封鎖

疫點和疫區內最后一頭病牛死亡或撲殺，并按規定進行消毒和無害化處理30天后，經疫情發生所在地地上一級驗收合格后，由所在地縣級以上主管部門向原發布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府發布解除封鎖令，并通報毗鄰地區和有關部門，報上一級人民政府備案。

3.11處理記錄

對疫情處理的全過程必須做好完整詳實記錄，并歸檔。

4防范措施

4.1邊境防控（外防輸入）

邊境獸醫部門應積極配合海關等加強邊境防控，堅持內防外堵，切實落實邊境巡查、消毒等各種防控措施。 禁止從疫區國家進口牛只及其產品，打擊和無害化處理走私非法入境動物及產品。與疫區國家邊境接壤省市區的相關縣市建立免疫隔離帶。

4.2 飼養管理（外防輸入、內防擴散）

飼養、隔離和屠宰等場所必須符合國家動物防疫條件，實施嚴格的衛生消毒制度管理。 提高生物安全水平，實施吸血蟲媒控制措施（入出場前藥浴）。

4.3 日常監測

充分發揮國家動物疫情測報體系的作用，按照疫病監測和流行病學調查計劃，加強重點地區、重點環節的監測;與林草等部門合作，做好易感野生動物、媒介昆蟲調查監測，為牛結節性皮膚病風險評估提供依據。

4.4免疫接種

必要時，縣級以上畜牧獸醫主管部門提出申請，經省級畜牧獸醫主管部門批準，報農業農村部備案后采取免疫措施;實施產地檢疫時對已免疫的牛只，應在不檢疫合格證明中備注免疫日期、免疫批號、免疫劑量等信息。

4.5出入境檢疫監管

各地畜牧獸醫部門要加強與海關、邊防等有關部門協作，加強聯防聯控形成防控合力，嚴禁進口來自牛結節性皮膚病疫情國家和地區的牛只及其風險產品，對非法入境的牛只及其產品按相應規定處置。

4.6宣傳培訓

加強對各級畜牧獸醫主管部門、動物疫病預防控制機構和動物衛生監督機構工作人員的技術培訓;加大牛結節性皮膚病防控知識宣傳普及力度，加強對牛只養殖、經營、屠宰等相關從業人員的宣傳教育，增強自主防范意識，提高從業人員防治意識。

參考文獻：

[1]農業農村部.農業農村部關于做好牛結節性皮膚病防控工作緊急通知.農牧發[2019]26號

[2]《牛結節性皮膚病防治技術規范》。動衛中心中國獸醫發布，2020

[3]中國獸醫科學 2019，49（10）