永生化綿羊瘤胃成纖維細(xì)胞系的建立

趙霏霏，楊 丹，辛雅明，楊銀鳳

（1. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018；2. 內(nèi)蒙古自治區(qū)獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 內(nèi)蒙古 呼和浩特010018）

傳代細(xì)胞系是開(kāi)展基礎(chǔ)研究和動(dòng)物病毒研究的基礎(chǔ)， 許多與動(dòng)物病毒相關(guān)的研究由于缺乏特定種屬的穩(wěn)定細(xì)胞系受限制， 綿羊源的細(xì)胞系尤其缺乏， 嚴(yán)重阻礙了綿羊病毒的生物學(xué)研究和疫苗的開(kāi)發(fā)。 成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中最主要的細(xì)胞，在動(dòng)物體內(nèi)分布廣泛，體外培養(yǎng)條件相對(duì)簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)速度快，培養(yǎng)成本低，遺傳信息穩(wěn)定［1］。 但正常的原代細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次分裂會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞衰老的現(xiàn)象［2］，因此，需要建立生理狀態(tài)正常并且可以長(zhǎng)期傳代的永生化細(xì)胞系用于試驗(yàn)研究。 目前已知能使細(xì)胞永生化的方法有很多種， 常用的方法有將SV40、HPV、EB 等病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞， 建立永生化細(xì)胞系［3］，此外，還可以將原癌基因?qū)爰?xì)胞或利用放射性因素、 化學(xué)藥物的刺激建立永生化細(xì)胞系， 這些方法建立的細(xì)胞系往往會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)改變、 核型改變或失去接觸性抑制， 成為轉(zhuǎn)化細(xì)胞。 近年來(lái)報(bào)道最多的是將人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）轉(zhuǎn)入細(xì)胞使其永生化，hTERT 永生化細(xì)胞具有原代細(xì)胞的原始特性及傳代細(xì)胞無(wú)限增殖的能力［4］。

端粒是位于真核細(xì)胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，由一段特殊的DNA 重復(fù)序列和相關(guān)的蛋白質(zhì)組成，可保護(hù)DNA 不被降解［5］。 正常體細(xì)胞隨細(xì)胞分裂次數(shù)的增加端粒逐漸縮短， 端?？s短到一定程度時(shí)細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖， 激活端粒酶可延長(zhǎng)端粒?！?br>