乳腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表達、分子分型及預后分析

曾達通

（玉林市紅十字會醫院病理科，廣西玉林 537006）

乳腺癌起源于乳腺實質細胞，特別是終末導管上皮細胞，是女性最常見的惡性腫瘤之一。近些年臨床分子生物學快速發展，有部分學者通過開展病理組織免疫指標相關研究發現，病理分子標志物與乳腺癌患者治療與預后存在一定相關性[1]。孕激素受體（PR）與雌激素受體（ER）均屬于一種特定功能性蛋白，在乳腺癌細胞生長與分化等方面起到一定調節作用。增殖細胞核抗原（Ki-67）屬于反映腫瘤細胞增殖活性的一種蛋白，半衰期較短且退出細胞周期后可迅速降解；有研究指出，腫瘤細胞內人表皮生長因子受體（C-erbB-2）若被激活則能夠使腫瘤呈現轉化活性狀態[2]。本研究旨在探討乳腺癌組織中ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表達、分子分型及預后，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取玉林市紅十字會醫院2019年1月至12月收治的182例新發乳腺癌患者，進行前瞻性研究，患者年齡31～78歲，平均（54.52±4.65）歲。根據《2013年St Gallen乳腺癌會議國際專家共識薈萃》[3]進行分子分組，Luminal A型34例、Luminal B型（HER2陰 性）64例、Luminal B型（HER2陽 性）41例、Erb-B2過表達型23例、三陰型20例。本研究經院內醫學倫理委員會批準，患者或家屬對本研究知情同意。納入標準：符合《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范（2017年版）》[4]中的相關診斷標準者；患者均為2019年新發病例，符合乳腺癌臨床診斷標準且經過活檢或手術后病理檢查證實；患者在做病理檢查（免疫組化）前均未接受抗腫瘤治療（化療或放療）。排除標準：納入前已接受抗腫瘤治療者；未做免疫組化者。

1.2 方法 病理診斷：所有癌細胞樣本均源于本組乳腺癌患者活檢或手術截取，制作切片，采用顯微鏡（型號：IS-3000，奧林巴斯）對切片進行觀察以判斷腫瘤病理分型。免疫組化檢測：在切片內加入梯度酒精實施脫臘水化、抗原修復，室溫下使用3%過氧化氫進行5～10 min孵育，阻斷過氧化物酶活性，經過蒸餾水沖洗再置于PBS內進行5 min浸泡，隨后使用山羊血清封閉，加一抗，置于生化培養箱內（37 ℃）孵育2 h；PBS浸泡沖洗3次后，選擇DAB進行顯色，蘇木精復染，蒸餾水再沖洗后，進行脫水、復染及封片等操作。陽性對照選擇已知陽性的腫瘤標本作為參照對象，陰性對照選擇已知陰性的正常乳腺導管或小葉組織。

1.3 判定標準 PR、ER、Ki-67主要位于腫瘤細胞核內，陽性表達時細胞核存在棕黃色顆粒，任意5個高倍鏡視野下，平均陽性細胞比例：計數或評估100個以上細胞，＜10%浸潤性癌細胞核染色為陰性，10%～25%為弱陽性，26%～50%為中度陽性，＞50%為強陽性；C-erbB-2主要定位于腫瘤細胞膜，陽性表達時可見細胞膜存在棕黃色顆粒，根據細胞膜或細胞質是否著色判斷陰陽性，陰性不著色，弱陽性為著色弱強度且不連續，中度陽性為著色中強度且部分不連續，強陽性為強著色且著色連續不間斷[5]。

1.4 觀察指標 ①比較各免疫組化指標在乳腺癌組織中的表達情況。總陽性率=（強陽性+中度陽性+弱陽性）例數/總例數×100%。②觀察比較各免疫組化指標的病理特征。③分析ER、PR、C-erbB-2、Ki-67表達的相關性。④比較不同分型淋巴結轉移與脈管瘤栓發生情況。

1.5 統計學分析 采用SPSS 20.0統計軟件分析數據，計數資料以[例(%)]表示，行χ2檢驗；ER、PR、C-erbB-2、Ki-67 表達的相關性采用Pearson分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組織免疫組化指標陽性率 PR表達總陽性率為82.97%，ER表達總陽性率為76.37%，C-erbB-2表達總陽性率為35.16%，Ki-67表達總陽性率為77.47%，C-erbB-2表達總陽性率均低于PR、ER、Ki-67表達總陽性率，各免疫組化指標陽性率經比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1、圖1-4。

2.2 各免疫組化指標的臨床病理特征 50～78歲ER陽性例數占比高于31～49歲，Ⅳ期PR、ER陽性例數占比均低于Ⅰ期，Ⅳ期C-erbB-2、Ki-67陽性例數占比均高于Ⅰ期，有淋巴結轉移C-erbB-2陽性例數占比高于無淋巴結轉移，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

2.3 相關性Pearson分析顯示，ER與年齡呈正相關（r=0.578，P＜0.05）；C-erbB-2、Ki-67與臨床病理分期呈正相關（r=0.824、0.816，均P＜0.05）；PR、ER與臨床病理分期呈負相關（r=-0.379、-0.423，均P＜0.05）；C-erbB-2與淋巴結發生轉移發生呈正相關（r=0.859，P＜0.05）。

圖1 PR陽性表達（×100）

圖2 ER陽性表達（×100）

圖3 C-erbB-2陽性表達（×100）

圖4 Ki-67陽性表達（×100）

2.4 不同分型淋巴結轉移與脈管瘤栓發生情況 Luminal A型、三陰型的淋巴結轉移率與脈管瘤栓發生率均低于HER2過表達型，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表3。

3 討論

乳腺癌的發病人數逐年上升，且發病年齡趨于年輕化。乳腺癌在發病早期治愈率較高，因此對乳腺癌的早期診斷至關重要，可根據早期診斷結果制定針對性的治療方案，可有效提高患者的生存率，防止病情復發。對乳腺癌患者機體ER、PR表達水平的測定并了解這類免疫指標的功能狀態，在評估患者內分泌治療成效與預后方面具有重要意義[6]。研究指出，ER水平與總生存（OS）、無病生存（DFS）、無復發生存（RFS）、5年生存率、治療失敗時間（TTF）、內分泌治療反應與復發時間呈正相關；PR水平與OS、TTF、內分泌治療反應與復發時間呈正相關[7]。

乳腺癌的發病與患者體內雌激素、孕激素水平相關，乳腺組織中的ER、PR的表達情況，可反映患者機體內分泌狀態，ER、PR陽性患者給予適當的內分泌治療，可減少腫瘤細胞轉移和復發的可能性[8]。本研究結果顯示，ER、PR表達與臨床病理分期呈負相關，ER與PR均呈陽性的Luminal A型患者淋巴結轉移與脈管瘤栓發生率較低，提示PR、ER陽性率越高，患者預后越佳。Ki-67可作為評估腫瘤細胞活性的重要指標；一般Ki-67表達偏高者，其復發風險也較高，患者總生存期相對較短。當C-erbB-2水平呈現過表達時，腫瘤細胞具有旺盛的增殖力，且侵襲力變強，癌組織快速增殖，有利于對周圍組織進行侵襲并向遠端發生轉移[9-10]。本研究結果顯示，C-erbB-2、Ki-67表達與臨床病理分期呈正相關，Ki-67低表達多為病情較輕的Luminal A型患者，而Ki-67高表達、C-erbB-2陽性多為病情嚴重的Luminal B型與HER2過表達型患者，出現了更高的淋巴結轉移率和脈管瘤栓發生率，三陰型患者淋巴結轉移率合脈管瘤栓發生率較低，表明Ki-67與C-erbB-2陽性表達率越高，乳腺癌組織侵襲力越強，其與患者預后效果呈負相關。

表1 各免疫組化指標在乳腺癌組織中表達情況[例(%)]

表2 各免疫組化指標的病理特征[例(%)]

表3 不同分型淋巴結轉移與脈管瘤栓情況[例(%)]

綜上，乳腺癌患者ER、PR陽性率較高的Luminal A型和三陰型患者預后良好，Ki-67陽性率高、Luminal B型與HER2過表達型患者預后較差。