炮制對草烏中烏頭類生物堿經皮吸收的影響及其貼劑的設計與評價

王啟隆，劉 超，權 鵬，方 亮*，王延年*

1.沈陽藥科大學中藥學院，遼寧 沈陽 110000

2.沈陽藥科大學藥學院，遼寧 沈陽 110000

草烏是毛茛科植物北烏頭Aconitum kusnezoffiiReichb.的干燥塊根。《中國藥典》2020年版記載草烏具有祛風除濕、溫經止痛的功能，用于風寒濕痹、關節疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛及麻醉止痛等[1]。烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿、苯甲酰烏頭堿（BAC）、苯甲酰新烏頭堿（BMA）和苯甲酰次烏頭堿（BHA）被認為是草烏中具有主要藥理作用的烏頭類生物堿（aconitine alkaloids，AAs）[2]。因為草烏具有很高的毒性，所以臨床上經常將草烏炮制后使用，草烏炮制后毒性較高的雙酯型AAs（烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿）水解成毒性較低的單酯型AAs（BAC、BHA、BMA），毒性大大降低[3]。

經皮給藥系統（transdermal drug delivery system，TDDS）是最適合草烏的給藥方案之一。一方面，由于角質層對藥物透過皮膚有較高的屏障作用，使藥物的經皮滲透量有限，提高了草烏的用藥安全性。另一方面，6 種AAs 注射后半衰期均小于1 h[4]，因此能維持血藥濃度相對穩定的貼劑，滿足草烏的長效鎮痛、抗炎作用。而且經皮給藥也可減少給藥頻率，患者可自行給藥，提高患者依從性[5]。以往研究，炮制草烏只是用來減弱其毒性[6]。但是很少提及炮制對草烏中6 種AAs 經皮吸收的影響，以及比較分別含有生、制草烏提取物的貼片的療效。壓敏膠分散型貼劑是制備工藝簡單和生產成本較低的一種貼劑。壓敏膠層既發揮貼敷皮膚的作用，又具有形成藥物儲庫、控制藥物釋放的作用，適合中藥的特點[7]。本研究分別將生、制草烏提取物制成壓敏膠分散型貼劑。通過體外透皮實驗，探討生、制草烏提取物中6 種AAs 的透皮行為差異，并優化透皮貼片處方。最后，考察含生、制草烏提取物的最佳貼片抗炎、鎮痛效果的差異。

1 材料與儀器

1.1 試劑與藥材

生草烏（批號170528）購自安徽亳州中藥材市場，經沈陽藥科大學中藥學院中藥炮制與制藥研究室主任王延年副教授鑒定為毛茛科植物北烏頭A.kusnezoffiiReichb.的干燥塊根。對照品烏頭堿（批號17110910）、新烏頭堿（批號17111010）、次烏頭堿（批號17111310）、BAC（批號17102610）、BMA（批號18032406）、BHA（批號18032807）購自北京中科質檢生物技術有限公司，6 種對照品的質量分數均在 98%以上。DURO-TAK?87-2287、87-4098、87-2852，德國漢高公司；ScotchPak? 9744防黏層和CotranTM9707 背襯層，美國3M 公司；油酸，上海麥克林生化有限公司；氮酮，上海阿拉丁試劑有限公司；Transcutol?P（TP）、Labrafil?M 1944 CS（LM）、Plurol?Oleique CC497（POCC）和CapryolTM90（CP），法國Gattefossé公司；辛癸酸甘油酯（glycerol monocaprylocaprate，ODO），河南鄭州河食品科技有限公司；NKA-II 型號大孔吸附樹脂，天津市光復科技發展有限公司；弗氏完全佐劑（complete Freund’s adjuvant，CFA），美國Sigma- Aldrich 公司；雙氯芬酸二乙胺貼劑，韓國Samyang生物制藥有限公司，72 mg/30 cm2。

1.2 實驗動物

Wistar 雄性大鼠，體質量180～220 g；KM 雄性小鼠，體質量18～22 g；大鼠和小鼠均購自沈陽藥科大學實驗動物中心。本實驗經沈陽藥科大學實驗動物倫理委員會批準，批準號：No.SYPU- IACUC-C2019-12-14-207 和 No.SYPU-IACUC- C2019- 12-20-107。

1.3 儀器

Chromaster 型高效液相色譜儀，日本Hitachi公司；TSY-1 多功能擴散儀，沈陽藥科大學和延邊大學聯合研制；Xiang Yi H-2050R 高速臺式冷凍離心機，湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司；AL-104電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；FE20 型實驗室pH 計，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；CJJ-6 六聯磁力攪拌器，上海君竺儀器有限公司；TB-1 實驗用框式涂布器，上海鍇凱科技貿易有限公司；SZ-96 自動純水蒸餾器，上海亞榮生化儀器廠；科德士寵物用電推剪，深圳科德士電子廠；Braun3770 貼面剃須刀，博朗上海有限公司。

2 方法與結果

2.1 生草烏的炮制

根據《中國藥典》2020年版方法將生草烏進行炮制[1]。將生草烏用飲用水沖洗干凈，然后用飲用水浸泡72 h，直至內無白干心。將草烏放入沸水中煮5 h，切成2 mm 左右的薄片，放入40 ℃的烘箱中烘干。

2.2 6 種AAs 的提取

根據文獻方法[8]分別從生草烏和制草烏中提取6 種AAs，用75%乙醇分別溶解生草烏和制草烏粉末（10 mL 溶劑∶1 g 藥材粉末），超聲提取40 min。提取液經大孔吸附樹脂柱富集純化，得到的樣品真空干燥。獲得的淡黃色粉末經HPLC 分析。生草烏中烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿總量為0.23%，BMA、BAC 和BHA 的總量為0.021%。制草烏中BMA、BAC 和BHA 的總量為0.063%，烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿總量為0.018%，均符合《中國藥典》2020年版標準。AAs 在經過富集純化后得到的生草烏提取物粉末和制草烏提取物粉末中的質量分數分別為59.3%、59.1%。經過炮制，BAC、BMA和BHA 的質量分數分別由3.8%、9.2%、0.4%提高至22.7%、32.9%、2.1%，而烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿的質量分數分別由19.6%、24.3%、2.0%降低至0.5%、0.6%、0.3%。

2.3 壓敏膠分散型貼劑的制備工藝

采用溶劑蒸發法分別制備包含生草烏和制草烏提取物的貼片[9]。將生、制草烏提取物及“2.6.2”項中所選6 種化學滲透增強劑（油酸、LM、CP、POCC、TP、氮酮，用量均為10%）分別按質量加入適量乙醇中，室溫下與壓敏膠攪拌2 h，得到混合均勻的藥物-壓敏膠混合物。然后用實驗室涂層裝置將得到的混合物涂在ScotchpakTM9744 防黏層上。將涂好的防黏層在室溫下放置15 min，然后在50 ℃的烘箱中烘15 min 以除去溶劑。然后將背襯（ScotchpakTM9707）覆蓋在烘干后的防黏層上。最后將藥物-壓敏膠層裁剪成0.95 cm2進一步使用。

2.4 6 種AAs 分析方法的建立

2.4.1 色譜條件 色譜柱為Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。根據《中國藥典》2020年版稍加修改，流動相為乙腈-四氫呋喃（25∶15，A）和0.1 mol/L 醋酸銨（每升純化水中加入冰醋酸0.5 mL，B）；梯度洗脫條件：0～16 min，6%～20% A；16～50 min，20%～25% A；50～60 min，25%～6% A；體積流量1 mL/min；柱溫35 ℃；進樣體積20 μL；檢測波長235 nm。

2.4.2 線性關系考察 分別精密稱取6 種AAs 對照品適量，加甲醇制成質量濃度均為400 μg/mL 的6種對照品的母液，分別精密移取6 種對照品母液各1 mL 置于同一10 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得混合對照品溶液。

分別精密移取混合對照品溶液0.10、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mL 至100 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得混合對照品系列溶液。照“2.4.1”項色譜條件進行HPLC 檢測，見圖1。

圖1 6 種AAs 混合對照品 (A)、生草烏樣品 (B) 和制草烏樣品 (C) 的HPLC 圖Fig.1 HPLC of six AAs mixed reference substances (A), AKR sample (B) and AKRC sample (C)

以進樣質量濃度值為橫坐標（X），峰面積值為縱坐標（Y），繪制標準曲線并進行線性回歸，得回歸方程分別為BMAY＝18 558X＋545.28，R2＝0.999 8，線性范圍0.42～39.91 μg/mL；BACY＝17 127X＋3 667.9，R2＝1.000 0，線性范圍0.41～41.20 μg/mL；BHAY＝14 691X＋2 074.4，R2＝ 0.999 9，線性范圍0.42～40.20 μg/mL；新烏頭堿Y＝18 914X－1 484.5，R2＝0.999 8，線性范圍0.39～39.10 μg/mL；次烏頭堿Y＝16 612X＋3170，R2＝ 0.999 8，線性范圍0.41～41.20 μg/mL；烏頭堿Y＝17 481X－639.5，R2＝0.999 6，線性范圍0.41～39.60 μg/mL；結果表明6 種AAs 在線性范圍均呈良好線性關系。本實驗所用HPLC 的檢測限為0.05 μg/mL。

2.4.3 精密度試驗 配制低、中、高質量濃度（1.00、5.00、25.00 μg/mL）的由6 種AAs 組成的混合對照品溶液。在同1 d 平行操作6 次測定3 種不同質量濃度混合對照品溶液峰面積，并代入“2.4.2”項中線性回歸方程，求得樣品質量濃度，計算出RSD，得到該方法的日內精密度。3 種不同質量濃度混合對照品溶液同法連續測定3 d，根據相同的方法計算，即得到該方法的日間精密度。低、中、高質量濃度樣品的日內精密度RSD 為烏頭堿1.21%、1.75%、1.13%，次烏頭堿1.25%、1.69%、1.81%，新烏頭堿1.32%、1.57%、0.89%，BAC 1.28%、1.87%、1.15%，BHA 1.31%、0.75%、1.93%，BMA 1.26%、1.73%、1.29%；日間精密度RSD 為烏頭堿1.57%、1.16%、1.36%，次烏頭堿1.65%、1.88%、1.21%，新烏頭堿1.42%、1.17%、1.89%，BAC 1.78%、0.67%、1.25%，BHA 1.61%、1.35%、1.83%，BMA 1.86%、1.53%、1.79%。結果表明本實驗分析方法日內精密度和日間精密度均達到分析要求（RSD＜2%）。

人文精神的最終表現為人文關懷，在悅納自己、理解自己、自尊自愛的基礎上，學會理解他人，尊重他人，產生利他心理。這是初中學生人格發展的高級階段，實際的習得還需要通過日常的學習生活慢慢體會。在這種情況下，教師就必須對自己的教學行為有較高的要求，通過建立良好的師生關系，為學生樹立一個“理解他人、尊重他人、關懷他人”的行為典范，以此凸顯人文精神。例如，教師在教學之后，可以就某一問題與學生進行討論，主動為學生提供幫助；在學生提出問題時應明確地、耐心地解答；在課下遇到有困難的學生應給予支持和關懷等。

2.4.4 穩定性試驗 將“2.2”項提取出的生、制草烏溶液分別在提取后的0、2、4、8、12、24、36、48 h 在“2.4.1”項色譜條件下進樣分析，記錄色譜峰面積。生草烏提取液中6 種AAs 峰面積RSD 分別為烏頭堿0.82%、次烏頭堿0.67%、新烏頭堿0.85%、BAC 1.04%、BHA 1.11%、BMA 0.76%。制草烏提取液中6 種AAs 峰面積RSD 分別為烏頭堿1.02%、次烏頭堿0.79%、新烏頭堿0.91%、BAC 1.11%、BHA 1.34%、BMA 1.20%。結果表明生、制草烏提取液中的6 種AAs 均在48 h 內穩定。

2.4.5 重復性試驗 分別取“2.2”項下同一時間提取出的生、制草烏溶液6 份，按“2.4.1”項色譜條件進行分析，生草烏提取液中6 種AAs 質量分數RSD 分別為烏頭堿1.01%、次烏頭堿1.15%、新烏頭堿1.22%、BAC 1.38%、BHA 1.21%、BMA 1.36%，制草烏提取液中6 種AAs 質量分數RSD 分別為烏頭堿0.91%、次烏頭堿1.19%、新烏頭堿0.98%、BAC 1.05%、BHA 0.84%、BMA 0.96%，RSD 均小于2%，表明該方法重復性良好。

2.4.6 加樣回收率試驗 取已知含5 mg 6 種AAs的草烏樣品2 g，共9 份，3 份為1 組，分別精密加入含不同質量（4、5、6 mg）的6 種AAs 混合對照品溶液。按“2.2”項下的超聲提取40 min 操作，得低、中、高質量濃度供試品溶液，在“2.4.1”項色譜條件分析測定，結果見表1。

2.5 體外經皮透過實驗

2.5.1 離體鼠皮的制備和體外透皮實驗 參考本課題組前期研究進行透皮實驗[10]。雄性Wistar 大鼠用0.20 mg/mL 烏拉坦iv 麻醉，用寵物修剪器剃除其腹部的粗毛，再用剃須刀剃除殘余的短毛。在麻醉狀態下將大鼠脫頸椎處死后，立刻用彎剪刀剪下腹部皮膚并去除皮下的脂肪組織。通過顯微鏡檢查皮膚的完整性，用生理鹽水清洗皮膚，-70 ℃冷凍保存，1 周內用完。使用多功能透皮擴散儀（體積3.5 mL，有效擴散面積1.77 cm2）做體外透皮實驗。制備的大鼠皮膚夾在供體室和接收室之間，將皮膚固定在擴散池上，角質層面向上，以pH 7.4 的磷酸鹽緩沖液（PBS）為接收液，池內置磁力攪拌子，轉速約600 r/min，保持透皮儀內溫度恒定為32 ℃。在2、4、6、8、10、12、24 h 取2.0 mL 接收液樣品后，立即將相同體積的新鮮接收液加入接收室中，以維持室內的漏槽條件。樣品在0 ℃、16 000 r/min 離心7 min，再用HPLC 法分析上清液。計算藥物單位面積累積滲透量（Qn）。

表1 生草烏和制草烏提取液中烏頭堿、次烏頭堿、新烏頭堿、BAC、BHA 和BMA 的回收率 (n = 3)Table 1 Recoveries of aconitine, hypaconitine, mesaconitine, BAC, BHA and BMA in AKR and AKRC extract (n = 3)

V為擴散池的體積（3.5 mL），Vi為每次取樣的體積，Ci和Ci－1分別為第i次和第i－1 次取樣時接收液中的藥物質量濃度，A為有效擴散面積（0.95 cm2）

2.5.2 生、制草烏中6 種AAs 的經皮滲透性差異比較 在本實驗中，選擇ODO 作為藥物溶劑，因為ODO 被證實對藥物沒有經皮滲透增強作用，且溶解度參數接近壓敏膠（pressure-sensitive adhesive）[11]。分別將提取的生、制草烏粉末過飽和溶解在ODO中，來探究炮制草烏對其6 種AAs 的經皮滲透的影響。結果發現只有BMA 被檢測到，表明BMA 是6種AAs 中最容易透過皮膚的。此外，BMA 是生草烏和制草烏中最重要的生物活性成分之一。因此，以BMA 24 h 的Qn（Q24）為指標來篩選最佳處方。制草烏供給液中BMA 的Q24（5.51±0.69）μg/cm2顯著高于生草烏供給液中BMA 的Q24（2.53±0.31）μg/cm2（P＜0.05）。

2.6 生、制草烏貼劑的處方篩選

2.6.1 壓敏膠的篩選 由于壓敏膠是透皮貼劑的最主要成分之一，在本研究中選擇3 種市售聚丙烯酸酯壓敏膠（DURO-TAK?87-2852、87-4098、87- 2287）進行考察。生、制草烏提取物均與壓敏膠以1∶10 的比例混合，分別得到含有10%生、制備草烏提取物的混合物。再將得到的混合物制成透皮貼劑。透皮貼片的Q24見表2。結果顯示，壓敏膠為DURO-TAK?87-4098 的生、制草烏提取物透皮貼片中BMA 累積滲透量均顯著高于DURO-TAK?87-2287、87-2852。

表2 壓敏膠種類篩選結果 (± s, n = 4)Table 2 Screening results of pressure-sensitive adhesive type (± s, n= 4)

表2 壓敏膠種類篩選結果 (± s, n = 4)Table 2 Screening results of pressure-sensitive adhesive type (± s, n= 4)

與處方DURO-TAK? 87-4098 比較：*P＜0.05*P < 0.05 vs DURO-TAK? 87-4098

壓敏膠 生草烏Q2 4 /(μg·cm-制2) 草烏 DURO-TAK? 87-4098 1.36±0.15 3.20±0.15 DURO-TAK? 87-2287 0.91±0.11* 2.11±0.24* DURO-TAK? 87-2852 0.73±0.10* 1.62±0.18*

2.6.2 貼劑中促透劑的篩選 本實驗考察了6 種滲透促進劑（10%）對生、制草烏中BMA 的促透作用。發現油酸對生、制草烏中的BMA 滲透促進作用均最大，滲透增強比（ER）分別為4.57、9.93。進一步探索油酸用量對生、制草烏提取物中BMA皮膚滲透性的影響，結果見表3。10%、15%的油酸用量的Q24均明顯高于5%油酸且10%、15%油酸用量的Q24無顯著性差異。為了減少壓敏膠與化學促進劑潛在副作用，選擇使用10%油酸。

表3 滲透促進劑篩選結果 (± s, n = 4)Table 3 Screening results of permeation enhancers (± s, n = 4)

表3 滲透促進劑篩選結果 (± s, n = 4)Table 3 Screening results of permeation enhancers (± s, n = 4)

處方 生草Q烏24 / (μg·cm制-2草) 烏 生草烏E R制 草烏 10%油酸 6.21±0.88 31.79±4.38 4.57 9.93 10% LM 3.13±0.46 21.54±1.04 2.30 6.73 10% CP 3.28±0.42 13.23±1.83 2.41 4.13 10% POCC 2.56±0.35 5.34±0.78 1.88 1.67 10% TP 2.33±0.36 4.21±0.57 1.71 1.32 10%氮酮 1.92±0.26 3.75±0.43 1.41 1.16 空白組 1.36±0.15 3.21±0.16 1.00 1.00 5%油酸 3.12±0.38 16.86±2.13 2.29 5.27 15%油酸 6.87±0.79 33.57±4.45 5.05 10.49

表4 生、制草烏貼劑的最佳處方Table 4 Optimal formulation of patches of AKR and AKRC extract

2.7 含生、制草烏提取物的透皮貼劑的藥效學比較研究

2.7.1 抗炎活性評估 采用CFA 誘導的大鼠佐劑性關節炎模型來評價本實驗透皮貼片的抗炎活性。取雄性Wistar 大鼠30 只，隨機分為5 組，每組6只。按如下方式處理：（1）空白對照組：不給予貼劑；（2）陰性對照組：給予不含藥物的空白貼片（30 cm2）；（3）陽性對照組：給予雙氯芬酸二乙胺貼劑（6 cm2，含雙氯芬酸二乙胺14.70 mg）；（4）生草烏貼劑：給予生草烏透皮貼劑（30 cm2，含AAs 17.30 mg）；（5）制草烏貼劑：給予制草烏透皮貼劑（30 cm2，含AAs 17.30 mg）。注射CFA 前測量大鼠雙側后爪的體積作為基線值。空白對照組大鼠的雙側后爪注射生理鹽水0.1 mL，其他組分別注射CFA 0.1 mL。注射CFA 后，在0.5、3、5、7、9、11 d 測量足爪體積。在第5 天，除空白對照組外，其余組均在大鼠腹部皮膚上貼上對應的透皮貼片，貼敷7 d。各組大鼠足腫脹度（S）按下式計算。

其中Vn和Vt分別是大鼠注射CFA 前后的足趾體積

貼片的抗炎作用如圖2 所示。雖然這些貼片是應用于非炎癥區域的，但是與陰性對照組相比，陽性對照組和實驗組在9 d 和11 d 仍表現出明顯抑制爪腫脹效應（P＜0.05）。此外，制草烏組的抗炎作用明顯優于生草烏組（P＜0.05）。各組間兩側后足抑腫程度比較均無統計學差異（P＞0.05）。因此，炮制增強了草烏貼劑的抗炎作用，本研究進一步驗證局部應用生、制草烏透皮貼劑后，AAs 主要通過血液循環傳遞藥物至關節組織，從而達到治療類風濕性關節炎的作用[12]。

圖2 造模后左、右后足足趾腫脹度變化曲線 (n = 6)Fig.2 Profiles of swelling degree of left and right feet after CFA injection (n = 6)

2.7.2 鎮痛作用評估 采用小鼠醋酸扭體實驗探究生、制草烏貼片的鎮痛作用差異。選用體質量在18～22 g 雄性KM 小鼠50 只。在小鼠腹部相同位置剃毛，給藥前不麻醉。將小鼠隨機分為5 組，每組10 只，按如下處理：（1）空白對照組：不給藥；（2）陰性對照組：給予不含藥物的空白貼片（4.5 cm2）；（3）陽性對照組：給予雙氯芬酸二乙胺貼劑（4.5 cm2，雙氯芬酸二乙胺11.05 mg）；（4）生草烏貼劑組：給予生草烏透皮貼劑（4.5 cm2，AAs 2.6 mg）；（5）制草烏貼劑組：給予制草烏透皮貼劑（4.5 cm2，AAs 2.6 mg）。給藥3 h 后，去除貼劑，將每只小鼠ip 0.2 mL 醋酸溶液（1%）以引起扭體反應，并記錄20 min 內的扭體次數（W），計算疼痛抑制率來評估止痛效果。一般認為，疼痛抑制率高于50%，表明鎮痛制劑是有效的[13]。如表5 所示，生、制草烏組與空白對照組相比均顯著減少了扭體次數（P＜0.05）。而且發現制草烏貼劑的鎮痛效果比生草烏貼劑更顯著（P＜0.05）。結果表明，炮制增強了草烏貼劑的鎮痛作用。

Wc和Wt分別是空白對照組和實驗組的平均扭體次數

表5 生、制草烏貼劑對醋酸所致疼痛的鎮痛作用 (± s,n = 10)Table 5 Analgesic effect of AKR patch and AKRC patch on pain induced by acetic acid (± s, n = 10)

表5 生、制草烏貼劑對醋酸所致疼痛的鎮痛作用 (± s,n = 10)Table 5 Analgesic effect of AKR patch and AKRC patch on pain induced by acetic acid (± s, n = 10)

與空白對照組比較：*P＜0.05；與生草烏組比較：#P＜0.05*P < 0.05 vs blank control group; #P < 0.05 vs AKR group

組別 劑量/mg W 疼痛抑制率/% 空白對照 - 45±10 - 陰性對照 - 40±8 11.8 陽性對照 11.05 8±4* 83.4 生草烏 2.60 18±4* 61.8 制草烏 2.60 6±3*# 87.3

3 討論

多年來，草烏因其顯著的藥效和不良反應受到人們的關注。更是許多中藥處方的主要成分[14]。烏頭堿、HAC 和MAC 是草烏的主要有毒成分。在之前的研究中僅證明炮制草烏可以降低其毒性[15]。然而，炮制草烏是否也能改善其中6 種主要AAs 的經皮吸收，并提高其療效仍不清楚。在本研究中，將草烏制成貼劑，使其緩慢和少量地進入體內，這增加了藥物的安全性和藥效持續時間。

然而，以往的文獻很少提及AAs 在草烏中的透皮滲透性差異。因為藥物在皮膚中的擴散是被動擴散，依賴于濃度梯度，而且藥物的相對分子質量越小，越容易滲透到皮膚中[16]。而BMA 在生、制草烏中是最豐富的成分之一，在AAs 中相對分子質量僅大于BHA。因此，推測BMA 在AAs 具有最強的透皮滲透性。通過藥物溶液的體外透皮實驗證實了此猜想。

本實驗考察了貼劑中壓敏膠種類、化學促透劑種類及其濃度、藥物含量對生、制草烏提取物經皮滲透量的影響。其中 DURO-TAK?87-2287 和DURO-TAK?87-2852 2 個壓敏膠均顯著低于DURO-TAK?87-4098 的Q24。這可能因為這2 種壓敏膠中的羥基和羧基與BMA 中的羥基存在氫鍵相互作用，使BMA 從壓敏膠中的釋放能力降低[9]。油酸是考察的6 種化學促透劑中效果最好的，原因可能是油酸中的羧基與BMA 的羥基形成氫鍵，破壞了DURO-TAK?87-4098 壓敏膠中的酯基與BMA的羥基之間的氫鍵相互作用，從而促進貼劑中的藥物釋放[17]。

由于BMA 呈堿性，可與油酸形成離子對，形成了中性分子，從而增強其經皮滲透性。此外，油酸可與角質層的細胞間脂質相互作用，破壞脂質排列，從而增加細胞間脂質的流動性，增強藥物的經皮滲透能力[9]。雖然通過溶液系統實驗只能檢測到BMA，但仍需要對最佳貼劑中其他5 種AAs 的累積透皮量進行測定。

在本實驗中，發現含制草烏提取物最佳貼片中AAs 的Q24約為含生草烏提取物最佳貼片的2 倍。因為在草烏炮制后，在本實驗所用的擴散池模型中幾乎不吸收的毒性AAs 含量降低，而在AAs 中具有最強透皮性BMA 含量增加，從而增強了草烏中AAs 的經皮透過量。因此，炮制草烏不僅降低了毒性AAs 的含量，而且促進了AAs 的經皮吸收。對于透皮貼劑，藥物經皮吸收的結果通常與體內治療效果密切相關，活性藥物成分累積滲透量越多，通常治療效果好[18]。因此，AAs 經皮滲透量較高的制草烏貼劑的鎮痛和抗炎效果應優于生草烏貼劑，該推論在藥效學實驗中得到驗證。因此，炮制草烏不僅可以提高其用藥安全性，而且可以提高在皮膚外部使用草烏時的有效性。

本實驗制備了分別含有生、制草烏提取物的壓敏膠分散型透皮貼片，顯示出良好的鎮痛抗炎作用。而且，發現BMA 在AAs 中具有最強的經皮滲透性。因此，炮制草烏提高了草烏貼片的有效性和安全性。制備的含制草烏提取物的透皮貼片可作為治療類風濕性關節炎的候選藥物。

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