PV患者外周血T細胞亞群、IL-17A和IL-23表達及臨床意義

張小靜 陳紹斐 李碩 張冰

尋常型銀屑病（psoriasis vulgaris，PV）又稱“牛皮蘚”，是一種以T 淋巴細胞異常活化和浸潤為主要特征的慢性炎癥性皮膚病。據(jù)統(tǒng)計，我國銀屑病發(fā)病率為0.1%～3%，尤以青壯年居多［1］。PV 具有發(fā)病率高、病程長、易復(fù)發(fā)等特點，嚴(yán)重者可致殘疾性銀屑病關(guān)節(jié)炎，嚴(yán)重影響患者身心健康。PV 產(chǎn)生機制復(fù)雜，目前認為其主要與遺傳、感染、免疫等因素有關(guān)［2］。研究表明T 淋巴細胞為主的細胞免疫功能異常為PV 產(chǎn)生的重要因素，炎癥因子在銀屑病的產(chǎn)生中發(fā)揮重要作用［3］。白細胞介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）、白細胞介素-23（interleukin-23，IL-23）炎性反應(yīng)軸在多種自身免疫性疾病和炎癥反應(yīng)疾病中起關(guān)鍵作用。本研究擬對PV 患者T 細胞亞群結(jié)構(gòu)及IL-17A、IL-23 水平進行測定，探究其對該病的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年4月至2020年3月入院接受治療的PV 患者114 例納入PV 組，其中男性66 例，女性48 例，平均年齡（44.82±5.34）歲；平均病程（6.42±1.21）月。根據(jù)《中國銀屑病診療指南》［4］，按照病癥嚴(yán)重程度分為輕度32 例，中度52 例，重度30 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《臨床皮膚病學(xué)》［5］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理學(xué)檢查為銀屑病進行期者；②近期未使用免疫治療者；③病史資料完整者；④近期未服用可能干擾試驗藥物者；⑤經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)并自愿簽署知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①嚴(yán)重精神疾病及血液系統(tǒng)疾病患者；②嚴(yán)重心肝腎等臟器功能障礙者；③妊娠期及哺乳期婦女；④入組前使用免疫抑制劑、激素類藥物治療者；⑤近1月內(nèi)發(fā)生真菌、細菌及病毒感染者。另選擇本院同期健康體檢者60 例作為對照組，其中男性37 例，女性23 例，平均年齡（44.62±5.23）歲，兩組性別年齡相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 治療方法

對PV 組患者采用常規(guī)方法，利用糖皮質(zhì)激素、維生素D、維生素A 等常規(guī)藥物治療。

1.3 觀察指標(biāo)

采集對照組健康體檢時以及PV 組患者入院時和治療后1 個月空腹外周靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min 后進行相關(guān)檢測。①炎癥因子：采用酶聯(lián)免疫吸附沉淀法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）對白細胞介素-17A（interleukin-17A，IL-17A）、白細胞介素-23（interleukin-23，IL-23）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）進行檢測，試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司。②T 細胞亞群：采用Attune N×T 流式細胞儀（美國ThermoFisher Scientific 公司）對白細胞表面分化抗原3（Cluster of Differentiation 3，CD3+）、白細胞表面分化抗原4（Cluster of Differentiation 4，CD4+）、白細胞表面分化抗原8（Cluster of Differentiation 8，CD8+）水平進行檢測，并計算CD4+/CD8+值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0 軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用（）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用F檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組T 細胞亞群水平比較

PV 組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明顯低于對照組，CD8+明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組T 細胞亞群水平比較（±s）Table 1 Comparison on the levels of T cell subsets between 2 groups（±s）

表1 兩組T 細胞亞群水平比較（±s）Table 1 Comparison on the levels of T cell subsets between 2 groups（±s）

組別PV 組對照組t 值P 值n 114 60 CD3+（%）43.18±4.23 64.25±5.28 28.612<0.001 CD4+（%）24.88±3.18 34.46±4.02 17.206<0.001 CD8+（%）35.40±4.19 28.25±3.08 11.66<0.001 CD4+/CD8+0.70±0.32 1.22±0.47 8.620<0.001

2.2 兩組炎癥因子水平比較

PV 組IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 水平明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 兩組炎癥因子水平比較（±s）Table 2 Comparison on the levels of inflammatory factors between 2 groups（±s）

表2 兩組炎癥因子水平比較（±s）Table 2 Comparison on the levels of inflammatory factors between 2 groups（±s）

組別PV 組對照組t 值P 值n 114 60 IL-17A（pg/mL）563.25±134.28 226.46±64.82 18.319<0.001 IL-23（pg/mL）226.10±34.18 144.89±28.54 15.736<0.001 IL-6（ng/mL）4.59±0.51 2.27±0.24 33.315<0.001 TNF-α（pg/mL）39.16±4.15 24.37±3.50 25.541<0.001

2.3 不同嚴(yán)重程度PV 患者T 細胞亞群、炎癥因子水平比較

PV 患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平：輕度組>中度組>重度組，CD8+、IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α水平：輕度組<中度組<重度組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 不同嚴(yán)重程度PV 患者T 細胞亞群、炎癥因子水平比較（±s）Table 3 Comparison on the levels of T cell subsets and inflammatory factors in PV patients with different severity（±s）

表3 不同嚴(yán)重程度PV 患者T 細胞亞群、炎癥因子水平比較（±s）Table 3 Comparison on the levels of T cell subsets and inflammatory factors in PV patients with different severity（±s）

指標(biāo)CD3+（%）CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+IL-17A（pg/mL）IL-23（pg/mL）IL-6（ng/mL）TNF-α（pg/mL）輕度組（n=32）45.73±2.24 26.63±1.51 32.01±3.54 0.83±0.08 520.33±31.58 198.63±18.02 3.84±0.30 36.01±2.78中度組（n=52）43.04±2.16 24.66±1.02 35.34±2.69 0.70±0.09 572.00±34.09 229.16±24.62 4.59±0.42 39.43±2.15重度組（n=30）40.70±2.61 23.40±1.17 39.11±2.76 0.62±0.07 594.75±26.21 251.58±26.40 5.39±0.51 42.06±3.05 F 值36.961 56.446 44.293 51.967 46.721 39.992 106.812 42.726 P 值<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

2.4 PV 患者治療前后T 細胞亞群與炎癥因子水平比較

與治療前相比，PV 組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、水平明顯上升，CD8+、IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 水平明顯下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

表4 PV 患者治療前后T 細胞亞群與炎癥因子水平比較（±s）Table 4 Comparison on the levels of T cell subsets and inflammatory factors in PV patients before and after treatment（±s）

表4 PV 患者治療前后T 細胞亞群與炎癥因子水平比較（±s）Table 4 Comparison on the levels of T cell subsets and inflammatory factors in PV patients before and after treatment（±s）

指標(biāo)CD3+（%）CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+IL-17A（pg/mL）IL-23（pg/mL）IL-6（ng/mL）TNF-α（pg/mL）治療前（n=114）43.18±4.23 24.88±3.18 35.40±4.19 0.70±0.32 563.25±134.28 226.10±34.18 4.59±0.51 39.16±4.15治療后（n=114）57.31±6.11 31.49±3.01 28.42±3.23 1.21±0.15 284.89±45.08 183.51±24.15 3.28±0.36 31.49±3.27 t 值20.30 16.118 14.087 15.408 20.983 10.866 22.406 15.450 P 值<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001 0.000 0.000 0.000

2.5 PV患者T細胞亞群與炎癥因子水平相關(guān)性分析

PV 患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 呈負相關(guān)（P<0.05），CD8+水平與IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 水平呈正相關(guān)（P<0.05）。見表5。

表5 PV 患者T 細胞亞群與炎癥因子水平相關(guān)性分析Table 5 Correlation between T cell subsets and inflammatory factors in PV patients

3 討論

T 細胞在調(diào)節(jié)機體免疫功能中發(fā)揮重要作用，CD3+細胞代表T 淋巴細胞總數(shù)白細胞分化抗原3型T 細胞，為銀屑病發(fā)病的關(guān)鍵性細胞；CD4+細胞參與細胞免疫、體液免疫及炎癥反應(yīng)［6-8］。研究發(fā)現(xiàn)，Th17 細胞異常為銀屑病主要發(fā)病機制之一，其作用機制為通過分泌多種炎性因子如IL-17、IL-6等參與調(diào)控機體炎癥反應(yīng)及自身免疫反應(yīng)引起相關(guān)疾病的產(chǎn)生［9］。PV 患者CD4+細胞在機體真皮中含量較高，其與皮膚病患者角質(zhì)細胞過度增殖密切相關(guān)，CD8+細胞在表皮中含量較高［10］。本研究結(jié)果提示PV 的產(chǎn)生與機體免疫功能異常有關(guān)，結(jié)論與以往研究［11］相符。分析原因可能為PV 患者免疫功能低下，患者機體產(chǎn)生的應(yīng)激狀態(tài)對免疫功能造成一定影響，抑制遲發(fā)性超敏反應(yīng)、T 淋巴細胞殺傷等免疫應(yīng)答反應(yīng)，導(dǎo)致相關(guān)免疫因子異常情況產(chǎn)生。

IL-17A 作為IL-17 細胞因子家族成員之一，在皮膚感染類疾病中發(fā)揮重要作用［12］。研究發(fā)現(xiàn)，IL-17A 可誘導(dǎo)角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生急性淀粉樣蛋白，導(dǎo)致局部炎癥反應(yīng)的發(fā)生，引起T 淋巴細胞功能異常，導(dǎo)致銀屑病產(chǎn)生［13］。研究表明，機體IL-17水平增高可刺激內(nèi)皮細胞及上皮細胞等分泌大量炎癥因子［14-15］。IL-23 為機體常見炎癥因子，對免疫細胞的增殖分化起著重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，IL-23/Th17 通路為銀屑病發(fā)病的核心機制，而IL-23 為Th17 分化和表型維持的關(guān)鍵因子，因此IL-23 水平與銀屑病的發(fā)病密切相關(guān)［16］。TNF-α、IL-6 是機體重要細胞因子，在機體一系列生理病理過程中發(fā)揮重要作用。TNF-α 可激活與機體免疫功能密切相關(guān)的T 細胞及巨噬細胞［17］。IL-6 對B 淋巴細胞增殖分化具有良好的調(diào)控作用，其可促進T 淋巴細胞增殖分化。本研究結(jié)果表明利用上述炎癥因子對PV 嚴(yán)重程度進行評估具有一定價值。

本研究對PV 患者外血T 細胞亞群與相關(guān)炎癥因子水平相關(guān)性進行比較，結(jié)果顯示CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 呈負相關(guān)，CD8+水平與IL-17A、IL-23、IL-6、TNF-α 水平呈正相關(guān)，提示PV 患者外周血T 淋巴細胞亞群結(jié)構(gòu)與炎癥因子水平存在顯著相關(guān)性，二者水平的監(jiān)測對PV 患者的診斷可能具有良好的價值。

綜上所述，PV 的產(chǎn)生與患者炎癥因子水平上升及免疫功能降低密切相關(guān)，PV 患者外周血T 細胞亞群結(jié)構(gòu)及炎癥因子的檢測對于病情程度評估診斷具有一定的意義。