TGF-β1、GM-CSF及TNF-α對急性髓系白血病患者病情轉歸的評估

仲華 林志強 薄德映 王亞南 武艷偉 翟志佳 焦路陽

急性髓系白血病是一類源于造血干細胞的惡性克隆性疾病，其會抑制機體正常造血功能，影響機體組織器官的功能。近年來有學者發現，在急性髓系白血病的發生、發展的過程中，有較多的生化指標發揮著重要的調控作用［1］。Koichi 等［2］學者報道轉化生長因子（Transforming growth factor-β1，TGF-β1）廣泛參與機體病理生理的過程，可抑制白血病細胞的增殖。腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）在診斷惡性腫瘤、心血管疾病的臨床價值已得到肯定，近年來TNF-α 與急性髓系白血病的關系得到廣大學者的重視，認為急性髓系白血病患者體內高水平的TNF-α 會導致患者預后不良［3］。粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（ranulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）來源于適應性免疫系統的細胞、骨髓細胞等，較多研究發現其在類風濕性關節炎的關節中濃度較高［4］，但其與急性髓系白血病的相關研究較少。本研究旨在探討TGF-β1、GM-CSF 及TNF-α在急性髓系白血病患者血清中的表達情況及三者對其病情轉歸的影響。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年2月至2018年2月本院收治的136例急性髓系白血病患者設為觀察組。納入標準：①均臨床、血常規、骨髓象確診為急性髓系白血病；②病歷資料完整。排除標準：①納入研究前1 個月內，服用過影響本研究指標水平的藥物，或接受相關治療者；②合并心、肝、腎等器官和系統嚴重疾病或惡性腫瘤者；③妊娠期、哺乳期女性、精神障礙者。

經對癥予以VDP/VDCP/DA/MEA 方案治療后，根據相關分組標準［9］分為完全緩解組58 例，未緩解組45 例，難治復發組33 例。選取同期本院的140 例健康體檢者，設為對照組。觀察組男性72例，女性64 例；平均年齡（43.35±5.71）歲。對照組男性71 例，女性69 例；平均年齡（43.44±5.78）歲。2 組一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會批準通過，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法

觀察組患者在入院后第2日、對照組患者于體檢當日清晨空腹抽取靜脈血3 mL，離心10 min，分離血清及血漿，樣本置于-20℃下保存待檢。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平。相關試劑盒采購于北京中杉金橋生物技術有限公司。TGF-β1 參考范圍：20～55 μg/L，<20 μg/L 視為異常降低［6］；TNF-α 參考范圍：180～320 pg/mL，<180 pg/mL 視為異常降低［7］；GM-CSF 參考范圍：32～65 ng/L，>65 ng/L 視為異常升高［8］。

1.3 觀察指標

①收集患者的病歷資料，包括姓名、性別、年齡、是否合并髓外浸潤、白細胞水平、FAB 分型、危險度分型等資料，分析TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平與患者病理特征的關系。②對患者進行為期3年的隨訪（方式：電話隨訪、門診復查，隨訪截止時間：2021年2月），了解患者預后情況。③采用多元Logistic 回歸分析影響急性髓系白血病患者預后不良的相關危險因素。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行數據分析，計數資料用n（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料采用（）表示，兩組間比較行t檢驗，多組間比較行F檢驗；采用多元Logistic 回歸分析影響急性髓系白血病患者預后不良的相關危險因素；以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組與對照組TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平比較

觀察組GM-CSF水平高于對照組，TGF-β1、TNF-α水平低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比較（±s）Table 1 Comparison of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF levels between 2 groups（±s）

表1 兩組TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比較（±s）Table 1 Comparison of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF levels between 2 groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 136 140--TGF-β1（μg/L）7.32±2.14 32.65±7.54 38.199<0.001 TNF-α（pg/mL）105.52±17.55 227.25±25.14 46.519<0.001 GM-CSF（ng/L）90.25±8.65 43.77±5.19 54.309<0.001

2.2 完全緩解組、未緩解組及難治復發組的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比較

完全緩解組GM-CSF 水平明顯低于未緩解組、難治復發組，TGF-β1 及TNF-α 水平明顯高于未緩解組、難治復發組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 完全緩解組、未緩解組及難治復發組的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比較（±s）Table 2 Comparison of the levels of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF in patients with complete remission，unremission and relapsed acute leukemia（±s）

表2 完全緩解組、未緩解組及難治復發組的急性髓系白血病患者TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平比較（±s）Table 2 Comparison of the levels of TGF-β1，TNF-α and GM-CSF in patients with complete remission，unremission and relapsed acute leukemia（±s）

組別完全緩解組未緩解組難治復發組F 值P 值n 58 45 33--TGF-β1（μg/L）41.25±8.65 35.64±7.22 30.21±5.59 26.980<0.001 TNF-α（pg/mL）120.32±20.33 97.67±17.52 85.14±15.65 42.920<0.001 GM-CSF（ng/L）84.23±7.14 93.27±8.34 108.65±9.74 92.660<0.001

2.3 TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平與急性髓系白血病患者病理特征的關系

TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平與急性髓系白血病患者髓外浸潤、危險度分型顯著相關（P<0.05）。見表3。

表3 TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平與急性髓系白血病患者病理特征的關系［n（%）］Table 3 the relationship between the levels of TGF-β1，TNF-α，GM-CSF and the pathological characteristics of patients with acute leukemia［n（%）］

2.4 急性髓系白血病患者預后情況

TGF-β1 及TNF-α 異常降低、GM-CSF 異常增高的急性髓系白血病患者死亡率明顯高于TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 正常水平的患者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表4。

表4 急性髓系白血病患者預后情況［n（%）］Table 4 prognosis of patients with acute leukemia［n（%）］

2.5 影響急性髓系白血病患者預后死亡的相關危險因素

髓外浸潤、危險度分型、TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 為影響急性髓系白血病患者預后死亡的獨立危險因素（P<0.05）。見表5。

表5 影響急性髓系白血病患者預后死亡的相關危險因素Table 5 related risk factors of death in patients with acute leukemia

3 討論

急性髓系白血病是造血干細胞的惡性克隆性疾病，平均生存期僅3 個月左右，嚴重危害患者生命健康［10］。部分急性髓系白血病患者可以通過化療或骨髓移植延長生存期，但該病生存率仍不想理。積極尋找可在急性髓系白血病發病早期發現病情變化、評價療效并判斷預后的指標對延長患者生存時間臨床意義重大。

TGF-β1 是由Treg 細胞分泌產生的細胞因子，它通過參與多種免疫細胞的調控作用下調機體免疫應答反應，是目前已知的作用較強的負性造血細胞調控因子，在造血方面主要起負調控作用。Ramaswamy K 等［11］學者研究認為TGF-β1 可以顯著抑制血細胞增殖，并在正常造血細胞生長分化的各個階段均有表達。本研究結果，這一研究結果與既往文獻報道結果一致［12］。考慮為TGF-β1 水平降低，導致白血病細胞抑制作用減弱，促進了白細胞的增殖，從而加重了急性髓系白血病患者的病情。

GM-CSF 作用于造血干細胞、祖細胞等細胞中，可促進骨髓造血，是機體必需的造血生長因子之一［13］。本研究結果顯示急性髓系白血病患者血清GM-CSF 水平呈異常增高表達狀態，完全緩解組GM-CSF 水平明顯低于未緩解組、難治復發組。Otegbeye F 等［14］學者研究報道，急性髓系白血病患者GM-CSF 水平與其預后有著顯著相關性，這與本研究所得結果一致，提示GM-CSF 可作為評估急性髓系白血病患者預后的重要指標之一。

TNF-α是重要的炎癥和免疫反應調節物，主要由激活的單核-巨噬細胞產生，具有較強的抗腫瘤及促炎功能。Sterner等學者［15］研究指出，正常表達的TNF-α可提高白細胞對病原體吞噬能力。本研究中，TNF-α異常升高的急性髓系白血病患者預后死亡的風險大。分析導致TNF-α水平異常升高的原因：急性髓系白血病患者對病原菌具有易感性，易并發多種機會性感染，刺激單核-巨噬細胞的表達水平，使得患者發生持續的炎癥反應，引起TNF-α水平升高［16］。

本研究結果顯示，TGF-β1、TNF-α、GM-CSF水平與急性髓系白血病患者髓外浸潤、危險度分型有顯著相關性，TGF-β1 異常降低、TNF-α 異常升高、GM-CSF 異常降低的急性髓系白血病患者髓外浸潤發生的風險越高，危險度分型為高危型的幾率越大，同時TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 水平與急性髓系白血病患者疾病進展有著密切聯系。

綜上所述，TGF-β1、TNF-α、GM-CSF 與急性髓系白血病患者病情進展密切相關，TGF-β1（異常降低）、TNF-α（異常升高）、GM-CSF（異常降低）的患者預后死亡的風險更大，提示臨床可加強三者聯合檢測，以盡快掌握患者病情，評估患者預后。