低鹽養殖對白甲烏鱧生長、成活及肌肉營養的影響

胡燕冰 陳思敏 施蕾 臧蔓 林麗玲 楊俊帆 陳澤濱 錢高明 雷明強 黃偉卿

摘 要：采用低鹽度5‰和10‰養殖淡水魚白甲烏鱧（Opniocepnalus argus var Kimnra），探究鹽度脅迫對淡水魚類生長、成活和肌肉營養的影響，通過為期65 d的養殖，結果顯示：養殖成活率隨著鹽度的升高而顯著提高（P<0.05），但生長速度隨著鹽度的升高而顯著降低（P<0.05）;在鹽度10‰下養殖白甲烏鱧，肌肉中的氨基酸總量占（10.50±1.9）%，必需氨基酸（3.69±1.3）%和呈味氨基酸（4.48±0.7）%均高于對照組，肌肉中脂肪酸EPA+DHA含量（2.5±0.2）%，顯著高于對照組（P<0.05）。結果顯示將白甲烏鱧置于低鹽度（10‰）下養殖，有助于提高養殖成活率和改善肌肉營養。

關鍵詞：白甲烏鱧（Opniocepnalus argus var Kimnra）;低鹽養殖;成活率;生長;肌肉營養

白甲烏鱧（Opniocepnalus argus var Kimnra）俗稱白烏魚、白烏棒等，是鱧形目鱧科的一種。具有體色白，身體呈棒形，頭部扁平，頭部鱗片較大，尾部鱗片細的生物學特征。因其肉質鮮美[1]、細刺少、營養豐富[2]，特別是具有高蛋白質、微量元素、氨基酸和低脂肪的特性，及具有促進傷口愈合、活血生肌、祛濕利尿、催乳等藥用價值，常被用作廣大傷病患者、術后、產后的食療最佳補品，在四川當地具有非常好的口碑[3]。

目前已經有許多實驗表明鹽度對水生生物的生長發育、繁殖、免疫水平、能量代謝、成活率和肌肉營養等諸多方面都會產生一定程度的影響[4]，由此可見鹽度是影響水生生物養殖的重要因素之一。關于鹽度脅迫對水產動物肌肉營養的影響，目前常見于降低海水魚類的鹽度對其影響方面研究。黃偉卿等[5]研究結果表明，降低養殖鹽度，能夠提升大黃魚肌肉營養價值。在低鹽養殖黑鯛的實驗中賈超峰等[6]研究結果表明，低鹽組的風味雖不及海水組，但蛋白質組成對人體更好且口感更好。成永洲[7]對斜帶石斑魚幼魚的研究實驗表明，不同鹽度人工海水對斜帶石斑魚幼魚肌肉水分、粗蛋白和粗灰分均無顯著性影響，而能夠顯著影響肌肉粗脂肪、氨基酸組分及脂肪酸組分。康自強[8]的研究表明鹽度可改善星洲紅魚的肌肉品質以及風味。而關于鹽度脅迫對淡水魚類白甲烏鱧的生長情況及肌肉營養成分的影響，截至目前還沒有見到相關的研究，本試驗旨在探尋鹽度脅迫對白甲烏鱧的生長情況和肌肉營養的影響，為在沿海推廣白甲烏鱧養殖提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗魚 試驗用魚購自于四川內江鮑家莊農場，選擇體表健康、活力強，平均全長（8.0±0.5）cm、平均體長（7.5±0.5）cm、體重（4.3±0.3）g的白甲烏鱧，試驗前先進行消毒清洗再用試驗基地養殖用水適應半小時后，放入養殖桶（規格1.5 t）中養殖。

1.1.2 養殖用水 對照組養殖用水采用自來水經24 h以上曝氣后使用。試驗組養殖用水采用海區海水（鹽度23‰）與經24 h曝氣的自來水配置成相關鹽度養殖用水。

1.2 試驗設計與飼養管理

1.2.1 試驗設計 試驗組鹽度分別為5‰（S5）、10‰（S10），并設置對照組鹽度0（S0），每組設置3個平行組，各組養殖密度為15尾/m3。試驗組升鹽速率為0.5‰/d，直到達到試驗鹽度。試驗周期64 d。

1.2.2 飼養管理 飼喂餌料為淡水鯽魚肉，每天投喂飼料兩次，每次投喂量為魚體體重的10%。定期清理殘餌和糞便，每天換水一次，換水量為50%。同時撈出死魚，并做好養殖記錄。

1.2.3 測量與檢測 各試驗組取30尾白甲烏鱧，采用直尺（最小量程0.01 cm）測量全長、體長，并用電子天平（最小量程：0.1 g）測量其體重，然后將每組試驗組取200 g肌肉委托福建省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所進行水分（GB 5009.3-2016）、粗蛋白（GB 5009.5-2016）、脂肪（GB 5009.6-2016）、灰分（GB 5009.4-2016）、氨基酸（GB 5009.124-2016）和脂肪酸（GB 5009.168-2016）成分檢測。

1.3 數據分析與營養價值評定方法

生長性能指標統計根據黃偉卿等[9]的統計方法進行，公式如下：

成活率=N/n×100%

體重絕對增加率（g/d）=（m2-m1）/（t2-t1）

絕對增長率（cm/d）=（L2-L1）/（t2-t1）

增積量=（m2-m1）×（L2-L1）/（t2-t1）2

肥滿度=m/L3×100

式中：N為終末幼魚數，尾;n為初始幼魚數，尾;m為體重，g;L為體長，cm;m1為時間t1時的體重，g;m2為時間t2時的體重，g;L1為時間t1時的體長，cm;L2為時間t2時的體長，cm。

根據氨基酸評分標準模式[10-11]和全雞蛋蛋白質的化學評分模式[12]進行肌肉營養價值評定。使用以下三個公式分別計算氨基酸評分（AAS）、化學評分（CS）和必需氨基酸指數（EAAI）：

AAS=待測樣本中氨基酸的含量（mg/g pro）÷FAO/WHO評分模式中同種氨基酸的含量（mg/g pro）

CS=待測樣本中氨基酸的含量（mg/g pro）÷全雞蛋蛋白質中同種氨基酸的含量（mg/g pro）

EAAI=nLys（t）×100…Val（t）×100Lys（s）×…×Val（s）

式中：n為比較必需氨基酸的總個數;t為待測樣品中蛋白質必需氨基酸的含量;s為全雞蛋蛋白質中的必需氨基酸含量;Lys為賴氨酸，Val為纈氨酸。

1.4 數據處理

試驗數據使用IBM SPSS Statistics 23軟件進行統計分析處理，使用單因素方差分析（ANOVA，Duncan's） 對試驗結果進行顯著性差異分析，試驗數據用（平均值±標準差）對數據進行表示。

2 結果

2.1 對成活率及生長的影響

隨著鹽度的升高，白甲烏醴養殖成活率顯著提高（P<0.05），試驗組S10成活率最高，達（49.6±6.7）%;對照組S0的生長性能體重絕對增長率[（0.13±0.09）g/d]、絕對增長率[（0.048±0.010）cm/d]和增積量（0.006 2±0.001 3）均顯著高于試驗組（P<0.05）。但鹽度的升高對肥滿度的影響不顯著（P>0.05），以試驗組S10最小，為1.33±0.42（表1）。

2.2 對肌肉基礎成分的影響

隨著鹽度的升高，白甲烏鱧肌肉脂肪酸和水分的含量降低，而灰分顯著升高（P<0.05），蛋白質的含量試驗組S10顯著高于對照組S0（P<0.05），試驗組S5的蛋白質的含量低于對照組，但沒有顯著性差異（P>0.05）（表2）。

2.3 對肌肉氨基酸組份及評價的影響

白甲烏鱧肌肉中的氨基酸總量在（9.13±1.8）%～（10.50±1.9）%之間，必需氨基酸的含量為（3.19±1.1）%～（3.69±1.3）%，呈味氨基酸的含量為（3.90±0.8）%～（4.48±0.7）%。試驗組S10肌肉中的氨基酸總量、必需氨基酸含量、呈味氨基酸含量均高于對照組，而試驗組S5肌肉中的氨基酸總量、必需氨基酸含量、呈味氨基酸含量均低于對照組（表3）。

白甲烏鱧肌肉EAAI指數對照組S0和試驗組S10最大，為55，試驗組S5最小。根據AAS評價模式，經過計算可得出在鹽度分別為0、5‰和10‰下養殖的白甲烏鱧肌肉中不存在限制蛋白質的生物學價值的氨基酸;根據CS評價模式，S0、S5、S10組的限制氨基酸為亮氨酸、甲硫氨酸+半胱氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸+酪氨酸（表4）。

2.4 對肌肉脂肪酸成分影響

白甲烏鱧肌肉中飽和脂肪酸主要成分為棕櫚酸甲酯（C16：0），不飽和脂肪酸的主要成分為油酸甲酯（C18：1n9c） 和亞油酸甲酯（C18：2n6c）。根據統計，試驗組S10和S5的飽和脂肪酸總含量 （∑ SFA） 以及單不飽和脂肪酸總含量（∑MUFA）均低于對照組S0，但差異不顯著（P>0.05）。隨著鹽度的升高，白甲烏鱧肌肉中的EPA+DHA含量增加，以試驗組S10達到最大，為（2.5±0.2）%，顯著高于其他組（P<0.05）。鹽度對n-3族脂肪酸基本沒有影響，但S10組的n-6族脂肪酸明顯高于對照組和S5，具有顯著性差異（P<0.05）（表5）。

3 討論

3.1 鹽度脅迫對水產動物成活和生長的影響分析

水產動物在不同鹽度環境中時，外界滲透壓與體內相差較大，就需要花費大量能量用以維持體內滲透壓平衡，不然極易造成動物體內滲透壓失衡[13]，影響活力、攝食率等，導致死亡率上升[14]。楊琳[15]研究發現灰海馬具有高滲透壓調節能力，在低鹽度下的生長表現和存活率都好于高鹽度，在養殖過程中適當降低鹽度對灰海馬的存活和生長有促進作用。林先智[16]等人發現遮目魚在鹽度為10‰、20‰、27‰、35‰中存活率都在90%以上，且鹽度35‰組存活率達到98.3%，鹽度0組存活率只有73.3%。在低鹽養殖羅氏沼蝦的實驗中，何竺柳[17]發現當鹽度在0～14‰的范圍內，鹽度越高，羅氏沼蝦的存活率也就越高，其中存活率最低的是鹽度為0的對照組，而鹽度為14‰的存活率最高。本試驗中的白甲烏鱧是一種淡水魚，每天將鹽度上調0.5個千分點，直到鹽度達到5‰和10‰，鹽度穩定初始階段因白甲烏鱧無法適應外界環境的變化，造成鹽度組5‰和10‰的白甲烏鱧部分死亡，待養殖一段時間后，鹽度組10‰中存活的幼魚逐漸穩定滲透壓平衡，適應了鹽度變化，存活率趨于穩定并且存活率最高達到（49.6±6.7）%，0對照組中的白甲烏鱧在試驗初期死亡率較低，待養殖一段時間后，魚體表面出現一些肉絨毛團，且活動緩慢，肌肉僵硬，魚體逐漸死亡[18]，這是由于水霉病的出現使得對照組中的魚死亡數量逐漸增加，造成死亡率升高，但在鹽度組5‰和10‰中并未出現水霉病的癥狀。這種現象同樣出現在鹽度對大黃魚的影響中，黃偉卿[9]等人在大黃魚的患病高發期進行了降鹽，而低鹽組沒有出現因為寄生蟲或細菌導致的死亡現象，這就導致海水組的成活率低于低鹽組。由此可見低鹽度可以通過抑制一些病原菌、寄生蟲的生長使得水產動物的成活率升高。

有研究顯示，當水生生物由于鹽度的改變，使生物體內滲透壓發生變化，生物會消耗大量能量使自身滲透壓達到平衡狀態，相應的如果生物處于等滲的環境條件下，用于調節滲透壓平衡的能量也就較少，從而用于生長發育的能量也就變多了。通過對比分析本試驗數據，白甲烏鱧對照組S0的生長性能體重絕對增長率、絕對增長率和增積量均顯著高于試驗組（P<0.05）。但鹽度的升高，對肥滿度的影響不顯著。說明白甲烏鱧在對于鹽度的適應過程中，需要提供大量能量維持正常的生命代謝，這與康自強[8]在鹽度馴化試驗中發現星洲紅魚在鹽度小于5‰的環境中餌料系數小，滲透壓耗能低，大部分能量用于生長，但隨著鹽度的升高絕對增長率逐漸降低的結論相同。大多數學者認為在低鹽度環境下動物可將用于滲透平衡調節的能量用于生長，但鹽度對于生長發育的影響可能還會通過攝食率、同化率[16]甚至還有蝦類生物的蛻殼次數等因素來綜合影響，例如，羅氏沼蝦隨著鹽度的升高，生長速度明顯變慢，這是因為蝦蟹類的蛻殼也需要消耗一定能量[16];豹紋鰓棘鱸幼魚相對于高鹽度條件下， 鹽度15‰條件下的攝食率較高[19]，雜交東方鲀在鹽度30‰條件下攝食量和攝食率最大[20]， 在本試驗中，對照組與其他鹽度組對比來看，攝食量明顯較大，較為活躍，生長較快，但在鹽度組中，白甲烏鱧為了達到自身的滲透壓平衡需要不斷地吸收水分，排出鹽分，所以食物在腸道中停留的時間較短，導致營養吸收率降低，生長緩慢[21]。因此在不同鹽度條件下水產動物的生長性能不僅會被滲透調節所影響，一些生理行為也會對生長造成一定影響。

3.2 鹽度脅迫對水產動物肌肉中基礎成分的影響分析

鹽度會影響水生生物肌肉的營養成分，為了探究水生生物的肌肉品質，我們可以分析肌肉的基本營養成分。在本試驗中，各低鹽組與對照組養殖白甲烏鱧肌肉中的基礎成分含量都有一定程度的變化，但差異不明顯，這說明在一定的鹽度范圍內，其基礎成分含量并不會因為鹽度的改變而產生顯著性差異。這與黃偉卿等[5]對大黃魚低鹽養殖的研究基本一致，與賈超峰等[6]研究結果相同，其結果顯示，低鹽組和海水組黑鯛粗蛋白、水分、灰分含量無明顯差異;與徐永健等[22]的研究結果一致，其結果顯示，經過不同鹽度處理養殖后，大海馬幼體水分、粗蛋白、粗脂肪含量與對照組相比，均未出現顯著性差異。

低鹽組白甲烏鱧肌肉中的脂肪酸含量低于對照組，脂肪酸的變化與康自強[8]在研究鹽度脅迫對星洲紅魚肌肉品質的影響中結果一致，其結果顯示，脂肪酸含量隨鹽度的升高而降低。但又與其它一些魚類的研究結果有所不同，如：吳益星等[23]的研究發現，肌肉的粗蛋白質和粗灰分含量分別顯著高于和低于對照組（P<0.05），粗脂肪略低于對照組，但沒有顯著差異（P>0.05）;康自強[8]的研究發現隨著鹽度的升高，水分含量也會有所增加。本試驗中，在一定范圍內，升鹽養殖下白甲烏鱧的肌肉水分含量有差異，這可能與白甲烏鱧在低鹽養殖環境中的滲透壓調節機制有關。不同種類的水生生物的生理生化及肌肉營養成分會隨著鹽度的變化而改變，這種變化可能還與低鹽養殖的技術和環境條件有關，由本試驗可得，白甲烏鱧幼魚對鹽度的耐受性較好，鹽度對其肌肉的基本營養成分沒有明顯影響。

3.3 鹽度脅迫對水產動物肌肉氨基酸成分的影響分析

在生物體生長發育過程中，氨基酸通常用于蛋白、酶類以及激素的合成，并用來維持生物體的氮平衡和毛細血管的氮平衡[24]。研究表明，氨基酸的種類和必需氨基酸的含量兩大因素決定蛋白質的營養價值和優良程度[11]。根據FAO/WHO的理想模式，質量較好的蛋白質其組成的氨基酸的EAA/TAA為40%左右，本試驗中，各種鹽度條件下養殖的白甲烏鱧中氨基酸的組成都符合上述指標的要求，EAA/TAA和DAA/TAA各組都沒有明顯差異，其中，EAA/TAA在（35±2）%，接近40%，符合FAO/WHO的理想模式[25]，這說明，在一定鹽度范圍內，白甲烏醴肌肉中的必需氨基酸組成成分都很平均且含量較高。

研究結果顯示，低鹽組S10的白甲烏鱧，其肌肉中的各種氨基酸含量均高于對照組，這一結果與淡水魚異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）[26]和大黃魚[9]進行低鹽養殖時肌肉中的氨基酸含量均高于傳統養殖的結果一致。其中甘氨酸[25]、丙氨酸[26]和精氨酸[27]等氨基酸是參與滲透壓調節的重要因子，黃偉卿等[9]在低鹽養殖大黃魚的研究中發現低鹽組大黃魚肌肉中的Gly、Cys和Met含量均高于正常養殖的組別，說明這3種氨基酸有可能調節了大黃魚滲透壓平衡。本試驗的鹽度范圍內，不能看出具體有哪些氨基酸參與了白甲烏鱧的滲透壓調節。

動物蛋白的口感在一定程度上取決于其呈味氨基酸的含量[28]。呈味氨基酸有Gly、Ala、Glu、Asp、Phe和Tyr，而其中鮮味最強的是谷氨酸。與對照組S0和低鹽組S5相比，低鹽組S10養殖的白甲烏鱧魚體谷氨酸含量較高，而谷氨酸可以調節神經衰弱，對肝臟有一定的保護作用，肝臟又是魚類脂肪酶的主要生產器官，可以通過消化脂肪為機體提供能量[8]。試驗結果表明，低鹽組S10呈味氨基酸和谷氨酸的質量分數分別為（4.48±0.7）%和（1.58±0.03）%，明顯高于其它兩組，說明低鹽組S10養殖的白甲烏鱧味道最為鮮美。低鹽組S5的呈特殊鮮味的氨基酸和谷氨酸的質量分數分別是（3.9±0.8）%和（1.35±0.02）%，都明顯低于其它組，說明在一定的鹽度范圍內，鹽度會造成白甲烏鱧的味道變差。

3.4 鹽度脅迫對水產動物肌肉脂肪酸的影響分析

脂肪酸是人體主要的能量來源之一。但飽和脂肪酸過多對人體不利。而不飽和脂肪酸對血糖血脂有調節作用，可以作為評定食品品質的重要標志。本試驗結果表明，不同鹽度下養殖的白甲烏鱧肌肉中單不飽和脂肪酸都沒有顯著性差異（P>0.05）。而多不飽和脂肪酸中低鹽組S10的C20：4n6c、C20：5n3c和C22：2n6c對比其他組具有顯著性差異（P<0.05）。但總多不飽和脂肪酸沒有明顯差異（P>0.05）。低鹽組S10的EPA+DHA對比其他組同樣具有顯著性差異（P<0.05）。這表明鹽度在一定的范圍內不會對白甲烏醴的脂肪酸造成明顯影響，但會對部分多不飽和脂肪酸造成影響，適當提高鹽度還能提高EPA+DHA含量。

多不飽和脂肪酸有利于水生生物對環境進行適應，可以維持水生生物的生物膜結構和功能，而魚蝦類細胞膜中的脂肪酸主要以DHA和EPA為主。其中何竺柳[17]的低鹽養殖羅氏沼蝦中EPA+DHA的含量具有明顯的差異（P<0.05），呈先升高后下降的變化趨勢。但在本試驗中只有低鹽組S10的EPA+DHA的含量顯著高于其他組。這可能是因為在鹽度10‰的情況下鹽度脅迫對白甲烏醴的生物膜和功能有明顯的影響，所以在體內儲存或者產生了大量的EPA及DHA，用來應對不利的環境條件，維持機體細胞膜的結構及功能。

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Effect of low-salt culture on growth， survival and muscle nutrition of Opniocepnalus argus var Kimnra

HU Yanbing1，CHEN Simin1，SHI Lei1， ZANG Man1，LIN Liling1，YANG Junfan1，CHEN ZeBin1，QIAN Gaoming1，LEI Mingqiang1，HUANG Weiqing1，2

（1.Department of Bioengineering，Ningde Normal University，Ningde 352100， China;2.Ningde Dingcheng Fishery Company Limited，Ningde 352100，China）

Abstract：The freshwater fish Opniocepnalus argus var Kimnra was cultured at low salinities of 5‰ and 10‰ to investigate the effects of salinity stress on growth，survival and muscle nutrition of freshwater fish for 65 d. The results showed that the survival rate increased significantly（P<0.05） with increasing salinity，but the growth rate decreased significantly（P<0.05） with increasing salinity.The total amino acids （10.50±1.9）%， essential amino acids （3.69±1.3）% and taste amino acids （4.48±0.7）% in the muscles of Opniocepnalus argus var Kimnra cultured in salinity 10‰ were higher than those of the control group， and the content of fatty acids EPA+DHA （2.5±0.2）% in the muscles was significantly higher than that of the control group （P<0.05）.The results showed that the culture of Opniocepnalus argus var Kimnra in low salinity（10‰） helped to improve the survival rate of culture and improve muscle nutrition.

Key words：Opniocepnalus argus var Kimnra; low salt culture; survival rate; growth; muscle nutrition

（收稿日期：2021-03-22）

基金項目：福建省大學生創新項目“鹽度脅迫對白甲烏鱧的影響分析”（項目編號：S202010398001）。

作者簡介：胡燕冰（2000-），女，本科生，主要從事水產增養殖工作。E-mail：1832591552@qq.com。

通信作者：黃偉卿（1988-），男，工程師，主要從事水產增養殖工作。E-mail：393634584@qq.com。