貴陽(yáng)市奶牛結(jié)核病感染情況調(diào)查與分析

徐春志 ，張 海 ，藺俐仲 ，楊齊心 ，楊 源 ，劉 艷 ，鄧珊珊 ，袁翠霞 ，景書(shū)灝 ，李照偉

（1.貴陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550081；2.貴陽(yáng)市草地站，貴州 貴陽(yáng) 550081；3.貴州省畜禽遺傳資源管理站，貴州 貴陽(yáng) 550081；4.貴陽(yáng)市清鎮(zhèn)市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 貴陽(yáng) 551400；5.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽(yáng) 550081）

牛結(jié)核病（Bovine tuberculosis）是由牛結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患慢性消耗性傳染病，牛、羊、豬等多種動(dòng)物易感，其中以奶牛最為易感。該病廣泛分布于世界各地[1-2]。奶牛感染后可引起乳房炎、結(jié)核性胸膜炎等疾病，還可造成產(chǎn)乳率和乳品質(zhì)下降[3]。該病的特征是在多種組織和器官內(nèi)形成結(jié)節(jié)性肉芽腫，使機(jī)體呈現(xiàn)慢性消耗性病變[4]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將牛結(jié)核病列為B類(lèi)動(dòng)物疫病，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將其列為二類(lèi)動(dòng)物傳染病[5-6]。牛結(jié)核病還是威脅人類(lèi)健康的傳染病，每年都有一定數(shù)量的人受到感染。1979年、1985年和1990年3次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，由牛型分枝桿菌導(dǎo)致的結(jié)核菌病所占比例分別為3.8%、4.2%和6.4%[7]。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）估算，全球結(jié)核病潛伏感染人群約有17億，占總?cè)巳旱?/4左右。2018年，全球新發(fā)結(jié)核病患者約為1000萬(wàn)。

近年來(lái)，按照“奶瓶子”市長(zhǎng)負(fù)責(zé)制的具體要求，貴陽(yáng)市大力發(fā)展生態(tài)畜牧養(yǎng)殖業(yè)，從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)大量奶牛，貴陽(yáng)市奶牛養(yǎng)殖量占到貴州省總體養(yǎng)殖量的90%以上。為了解貴州省貴陽(yáng)市2018～2020年奶牛結(jié)核病流行情況，本研究對(duì)全市7個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)的28781頭奶牛進(jìn)行了檢測(cè)，以期為貴陽(yáng)市奶牛場(chǎng)結(jié)核病的綜合防控提供流行病學(xué)調(diào)查依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本來(lái)源。2018～2020年，在貴陽(yáng)市息烽縣、觀山湖區(qū)、清鎮(zhèn)市、修文縣和開(kāi)陽(yáng)縣的7個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)，共計(jì)檢測(cè)奶牛28781頭。

1.1.2 檢測(cè)試劑。提純牛結(jié)核菌素購(gòu)自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法。按照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《動(dòng)物結(jié)核病診斷技術(shù)》（GB/T 18645-2002）中牛分枝結(jié)核桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)要求進(jìn)行檢測(cè)，分別于注射前、注射后12 h、24 h和72 h測(cè)量皮膚厚度，并計(jì)算皮膚厚度差。

1.2.2 數(shù)據(jù)分析。根據(jù)不同年份和不同養(yǎng)殖場(chǎng)的檢測(cè)結(jié)果，采用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 不同年份奶牛結(jié)核病檢測(cè)結(jié)果

對(duì)貴陽(yáng)市2018～2020年牛結(jié)核病感染情況采用牛分枝結(jié)核桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表1。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，牛結(jié)核病個(gè)體陽(yáng)性率為0.066%（19/28781），奶牛場(chǎng)群體陽(yáng)性率為19.05%（4/21）；2018年的陽(yáng)性率最低，為0.01%（1/10983），2019 年的陽(yáng)性率為 0.02%（2/9817），2020年的陽(yáng)性率最高，為0.20%（16/7981）。2020年的陽(yáng)性率是2018年的20倍，是2019年的10倍。說(shuō)明近3年來(lái)貴陽(yáng)市奶牛牛結(jié)核病陽(yáng)性率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。

表1 不同年份奶牛結(jié)核病檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2 不同奶牛場(chǎng)結(jié)核病檢測(cè)結(jié)果

對(duì)貴陽(yáng)市7個(gè)規(guī)模化奶牛場(chǎng)采用牛分枝結(jié)核桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。表2顯示，3年內(nèi)共計(jì)檢測(cè)28781頭奶牛，其中奶牛場(chǎng)A的陽(yáng)性率最高，為0.20%（6/2974），奶牛場(chǎng)B的陽(yáng)性率為0.14%（13/9109），其余奶牛場(chǎng)均未檢測(cè)出陽(yáng)性牛。

表2 不同奶牛場(chǎng)奶牛結(jié)核病檢測(cè)結(jié)果

3 討論

奶牛結(jié)核病多侵害肺、乳房、腸和淋巴結(jié)等器官和組織，以出現(xiàn)組織和器官的結(jié)核結(jié)節(jié)性肉芽腫和干酪樣、鈣化壞死病灶為特征，病程呈慢性經(jīng)過(guò)，表現(xiàn)為進(jìn)行性消瘦，咳嗽、呼吸困難等癥狀。調(diào)查結(jié)果顯示，貴陽(yáng)市存在奶牛結(jié)核病感染情況，但感染率較低，仍保持在國(guó)家控制標(biāo)準(zhǔn)以?xún)?nèi)。針對(duì)這一情況，今后宜實(shí)行檢疫和撲殺相結(jié)合的防控策略。

從全國(guó)來(lái)看，羅鵬飛等[9]2015～2019年對(duì)新疆阿勒泰地區(qū)8個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的64442頭牛進(jìn)行了結(jié)核病監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)平均陽(yáng)性率為0.18%。趙燕娟等[10]2016～2017年分別從甘肅、青海、西藏、四川4省區(qū)隨機(jī)采集牛血清1252頭份，采用ELISA方法對(duì)其進(jìn)行抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核病總抗體陽(yáng)性率達(dá)0.8%。張喜悅等[11]2018年對(duì)北方某地區(qū)33個(gè)奶牛場(chǎng)的990份全血進(jìn)行牛結(jié)核病調(diào)查，采用γ-干擾素ELISA診斷試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示個(gè)體陽(yáng)性率為13.99%，群體陽(yáng)性率為51.51%。李智勇[12]對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)15個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)的2112份血清進(jìn)行了奶牛結(jié)核病調(diào)查，結(jié)果顯示平均陽(yáng)性率為5.6%（0%～22.9%）。邴睿[13]在2011年10月至2012年6月間，對(duì)新疆、河北、寧夏等12個(gè)省區(qū)的29個(gè)縣共97個(gè)場(chǎng)村的1187頭奶牛進(jìn)行了牛結(jié)核病檢測(cè)，經(jīng)采用γ-干擾素酶聯(lián)免疫試驗(yàn)檢測(cè)篩選，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性率為24.1%。以上數(shù)據(jù)表明，牛結(jié)核病在大部分省區(qū)都有存在，因此在調(diào)運(yùn)和引種時(shí)必須嚴(yán)把奶牛檢疫關(guān)。

目前，常用的牛結(jié)核病診斷方法有牛結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)、γ-干擾素 ELISA試驗(yàn)和 PCR （熒光PCR）方法。牛結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)是對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)水平要求比較低，經(jīng)簡(jiǎn)單培訓(xùn)后就能上手，所需的結(jié)核菌素抗原也比較便宜。該方法的缺點(diǎn)是操作步驟繁瑣，耗時(shí)耗力，容易出現(xiàn)非特異性反應(yīng)，重復(fù)性不好。γ-干擾素ELISA試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是可以檢測(cè)早期感染牛只，特異性較好，易于標(biāo)準(zhǔn)化。缺點(diǎn)是需要在采血后2 h內(nèi)檢測(cè)且試劑盒成本較高。PCR（熒光PCR）方法的優(yōu)點(diǎn)是具有高敏感性和強(qiáng)特異性，可以檢測(cè)臨床癥狀不明顯的隱性感染和初期感染，且重復(fù)性較好。缺點(diǎn)是對(duì)檢測(cè)人員的專(zhuān)業(yè)素質(zhì)要求高、檢測(cè)儀器和檢測(cè)試劑昂貴、對(duì)試驗(yàn)環(huán)境要求高，因此很難在基層推廣。