非小細胞肺癌260例DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變狀況及臨床意義

杜鎣淦，孫紹星，陸允平，周志有

肺癌的發病率及死亡率居于惡性腫瘤之首[1]，是嚴重危害人們生命健康的惡性腫瘤之一。肺癌根據病理類型分為非小細胞肺癌（NSCLC）和小細胞肺癌。其中NSCLC占絕大多數，約為85%，其病死率占據世界癌癥首位[2-3]。目前，因肺癌治療手段單一，導致晚期肺癌患者生存期短，生存質量難以得到保障。因此對其病理研究與治療顯得尤為重要[4-5]。本研究通過檢測NSCLC患者癌組織細胞中甲基轉移酶3A（DNMT3A）、基因關聯蛋白A（MGA）及磷脂酰肌醇-3-激酶催化亞基r基因（PIK3CG）突變狀況，以探究其檢測意義。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2015年2月至2019年10月浙江省金華市中心醫院收治的260例NSCLC患者，男119例，女141例；年齡20～80歲，平均（48.3±8.2）歲；腺癌（ADC）186例，鱗癌（SQC）74例；其中120例發生淋巴結轉移；102例有吸煙史，158例無吸煙史。本研究經過倫理委員會批準，且在征得患者本人及家屬的同意下進行。

1.2 方法采集所有患者術中切除的癌組織或活體組織，送至長沙健路醫學檢驗所檢測DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變情況。具體方法：（1）通過組織切片機（上海寰熙醫療器械有限公司，KD-3358）將組織切成4 m切片，置于EP試管中使其充分消化。（2）利用雙鏈DNA試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司）提取DNA，將所提取的DNA采用擴增阻滯突變系統進行DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變檢測；提取的DNA作為模板，使其進行聚合酶連反應擴增，反應結束后根據聚合酶連反應儀輸出的結果判斷其突變情況。若突變位點有擴增，且Ct值≤35，則表明該樣品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變陽性；若突變位點無擴增，且Ct值＞35，則表明該樣品DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變陰性。

1.3 觀察指標觀察肺癌患者癌組織細胞中DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變情況，并分析其與病理特征的關系。

1.4 統計方法采用SPSS 25.0統計軟件進行分析，計數資料采用2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變情況260例NSCLC患者中DNMT3A基因突變陽性50例（19.2%），MGA基因突變陽性31例（11.9%），PIK3CG基因突變陽性23例（8.8%）。

2.2 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與病理特征的關系NSCLC患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與性別、吸煙情況無關（均P＞0.05），與病理類型有關（P＜0.05），且發生淋巴結轉移的患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變率明顯高于未發生淋巴結轉移患者。見表1。

表1 DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變與病理特征的關系 例

3 討論

肺癌由多基因參與，且病變過程復雜，臨床研究發現越來越多的基因與腫瘤相關[6-8]。目前，肺癌治療主要通過對敏感基因突變患者實施靶向藥物治療，其有一定的療效。肺癌分子靶向治療所關注的是NSCLC患者基因突變的共存及耐藥機制，隨著醫療技術及檢測儀器的進步，多重基因檢測被應用于臨床[9-10]。患者DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變、基因間的雙突變及多突變的檢測對靶向藥物的選擇提供了理論依據[11-12]。

DNMT3A表達指標與肝細胞癌及黑色素瘤有關，DNMT3A突變發生于11號外顯子移碼突變，常發生在急性髓細胞白血病中，其突變率可高達30%[13-14]。MGA可調節靶基因Max和T-box表達的雙特異性轉錄因子，它與堿性螺旋異源二聚化參與細胞增殖來調節基因表達[15]。MGA可作為轉錄激活因子或阻遏蛋白，轉錄激活依賴于Max。因MGA基因內含子的剪接突變可導致MGA突變，該基因突變常在肺癌、白血病及淋巴瘤中表達。PIK3CG（p110-r）是類磷脂酰肌醇3激酶家族中唯一成員，它與IA類家族成員一起生成重要的第二信使PIP2。然而，PIK3CG與IA類酶不同，后者將信號傳導至受體酪氨酸激酶下游，而前者將信號傳導至GPCR下游[16]。p110-r作為催化亞基，其在磷酸化磷脂酰基醇的脂質和蛋白發揮激酶作用。其主要表達在白蛋白中，且通過與Ras和G-蛋白耦聯受體作用參與免疫細胞應答和炎性刺激中。PIK3CG作用于細胞外信號傳導使細胞表面受體與細胞內信號傳導網絡相連接，激活后下游信號可促進細胞的存活、增殖生長和運動。PIK3CG突變主要發生于4號外顯子的突變，該基因突變常表達于骨髓惡性腫瘤[17]。

本研究結果顯示，260例NSCLC患者中DNMT3A基因突變陽性50例（19.2%），MGA基因突變陽性31例（11.9%），PIK3CG基因突變陽性23例（8.8%）；NSCLC患者DNMT3A、MGA、PIK3CG基因突變與性別及吸煙情況無關，但與病理類型、淋巴結是否發生轉移有關，且淋巴結轉移會提高DNMT3A、MGA及PIK3CG基因突變率。