慢性丙型肝炎患者基因型分布及相關基因型血清學指標分析

陳玫君，郭飛波

天門市第一人民醫院檢驗科，湖北天門 431700

丙型病毒性肝炎簡稱為丙型肝炎、丙肝，其是由丙型肝炎病毒感染導致的疾病，傳播方式包括輸血、吸毒、針刺等，丙型肝炎病毒感染率高，全世界范圍內感染丙型感染病毒的患者數量為1.7億人左右，丙型肝炎病毒感染的發生不僅可能導致急慢性肝炎，甚至可能引發肝纖維化或肝癌，危及患者生命[1]。丙型肝炎病毒基因型差異的存在，使得患者的肝損害程度、抗病毒治療效果以及疾病預后均存在明顯差異[2]。慢性丙型肝炎疾病發展過程中脂類代謝產生的影響受到的重視度不斷提高，但不同基因型患者機體血清脂質代謝間的差異尚未明確[3]。該次研究方便選取2016年1月—2019年12月天門市第一人民醫院收治的慢性丙型肝炎患者185例，探討慢性丙型肝炎患者基因型分布及相關基因型血清學指標差異。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的慢性丙型肝炎患者185例，其中男101例，女84例；年齡16～85歲，平均（51.8±6.5）歲。采集患者的靜脈血進行血清分離，放置于-80℃冰箱保存，對存在其他類型肝炎病毒感染的患者進行排除。患者的疾病診斷符合中華醫學會肝病學分會制定的丙型肝炎診斷標準。該次研究所選病例經過倫理委員會批準，且取得患者及其家屬知情同意。

1.2 方法

采集患者的空腹靜脈血，依據Sanger測序法開展丙型肝炎病毒基因分型，應用ABI 3730xl測序儀開展測序操作，按照儀器使用說明書進行測序。

丙型肝炎病毒定量檢測應用試劑盒開展，檢測方法為熒光定量PCR法，在羅氏480熒光定量PCR儀上開展樣本丙型肝炎病毒RNA載量檢測。應用日立7600全自動生化分析儀對血清谷氨酰轉肽酶（GGT）、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、載脂蛋白-B（Apo-B）、載脂蛋白-AⅠ（Apo-AⅠ）、總膽固醇（TC）與三酰甘油（TG）水平進行檢測。

1.3 觀察指標

①該組患者的丙型肝炎病毒基因型分布；②不同基因型患者丙型肝炎病毒RNA定量檢測結果；③不同基因型患者的GGT、AST與ALT水平，包括1b型、3b型、2a型、1b/2a型與3a型；④不同基因型患者LDL-C、Apo-B、Apo-AⅠ、TC與TG水平。

1.4 統計方法

采用SPSS 22.0統計學軟件予以數據處理，計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；計數資料以頻數和百分比(%)表示，組間差異比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 該組患者的丙型肝炎病毒基因型分布

該組患者中包括142例（76.76%）1b型患者，20例（10.81%）2a型 患 者，12例 （6.49）3b型 患 者，6例（3.24%）1b/2a型患者，5例（2.70%）3a型患者。

2.2 不同基因型患者丙型肝炎病毒RNA定量檢測分析

丙型肝炎病毒RNA載量范圍為5.0 E+2 IU/mL～1.0 E+7 IU/mL，采用對數形式對丙型肝炎病毒RNA載量進行表示，對均值予以計算，1b型患者為（6.57±1.00），3b型患者為 （6.62±1.05），2a型患者為 （5.82±1.03），1b/2a型患者為（5.40±1.15），3a型患者為（6.95±0.88）。不同基因型患者間的丙型肝炎病毒RNA定量結果實施單因素方差分析，結果表明差異有統計學意義（F=5.628，P=0.001）。

2.3 不同基因型患者肝生化結果比較

不同基因型患者的GGT、AST與ALT水平差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同基因型患者肝生化結果比較（±s）

表1 不同基因型患者肝生化結果比較（±s）

基因型GGT（U/L）AST（IU/L） ALT（IU/L）1b型（n=142）2a型（n=20）3b型（n=12）1b/2a型（n=6）3a型（n=5）F值P值78.26±21.25 74.06±16.35 72.74±12.42 71.24±20.32 41.48±10.20 66.47±23.35 69.18±21.45 75.81±23.65 48.48±18.54 39.09±8.52 94.38±26.58 120.85±43.25 112.83±34.54 75.36±12.58 68.83±18.54 15.325 10.471 25.311 0.001 0.001 0.001

2.4 不同基因型患者LDL-C、Apo-B、Apo-AⅠ、TC與TG水平比較

相較于1b與2a型，3b型患者TC與Apo-B水平更低，差異有統計學意義（P＜0.05）；不同基因型患者的肝生化與其余脂代謝指標差異無統計學意義（P>0.05）。見表2。通過對不同基因型患者的Apo-B與TC水平相關性開展分析，結果顯示兩者存在明顯相關性（r=0.817，P＜0.05）。

3 討論

肝炎屬于常見肝部病變，有資料顯示[4]，全球范圍內病毒肝炎病毒的感染率為3.8%，我國丙型肝炎病毒的感染率為3.1%。由于丙型肝炎病毒基因存在著高度變異性，因此不同基因型丙型病毒肝炎的治療方法、療效、治療周期以及取得的效果存在著較大的爭議。丙型病毒肝炎1b亞型患者發展為肝硬化以及肝癌的風險較其他亞型的患者更高，同時1b亞型患者對干擾素的反應弱于2型與3型，容易演變為慢性疾病。在對肝炎進行治療時，需根據肝炎病毒的類型開展治療方案制定，同時治療中需考慮宿主自身的因素，病毒方面主要為丙型肝炎病毒的基因型以及病毒載量，丙型肝炎病毒RNA含量可對病毒復制的活躍度以及患者自身病程情況予以直接反映，是對抗病毒治療的療效進行反饋的有效病毒學應答指標。而通過開展基因分型檢測，可對療程確定提供參考，因此通過對丙型肝炎病毒基因型以及血清病毒載量進行監測，對于慢性丙型肝炎的治療具備重要的價值。

表2 不同基因型患者LDL-C、Apo-B、Apo-AⅠ、TC與TG水平比較（±s）

表2 不同基因型患者LDL-C、Apo-B、Apo-AⅠ、TC與TG水平比較（±s）

基因型LDL-C（mmol/L）Apo-B（g/L）Apo-AⅠ（g/L）TC（mmol/L）TG（mmol/L）1b型（n=142）2a型（n=20）3b型（n=12）1b/2a型（n=6）3a型（n=5）F值P值1.75±0.44 4.50±0.71 1.70±0.46 1.75±0.61 1.35±0.28 0.72±0.18 0.59±0.25 0.69±0.13 0.76±0.26 0.65±0.18 1.12±0.06 1.00±0.15 1.24±0.26 1.06±0.27 1.33±0.25 4.08±0.92 3.35±1.06 4.26±0.81 4.06±1.03 3.71±0.56 1.42±0.32 1.05±0.28 1.13±0.35 1.42±0.61 1.18±0.27 3.542 0.035 1.525 0.068 0.578 0.421 0.845 0.125 1.362 0.084

受到地域差異的影響，丙型肝炎病毒的基因型以及亞型分布和流行存在差異，丙型肝炎病毒1型、2型、3型以及6型為我國的主要丙型肝炎病毒基因型[5]。該次研究結果顯示，該組患者中包括142例（76.76%）1b型患者，20例（10.81%）2a型患者，12例（6.49）3b型患者，6例（3.24%）1b/2a型患者，5例（2.70%）3a型患者。其中主要的基因型為1b型，與前人研究報道中[6]：1b型占比為75.00%，2a型占比為12.00%，3b型占比為5.00%，1b/2a型占比為4.00%，3a型占比為4.00%基本相符。2a型與3b型率均較高，表明2a型與3b型發病率呈現出升高趨勢。3型以及6型屬于我國西南、華南以及港澳地區的主要丙型肝炎病毒基因型，也是靜脈吸毒人員的主要流行基因型，提示靜脈吸毒群體中存在的丙型肝炎病毒基因型正在擴散至普通人群[7]。

肝功能是對肝臟損害進行反映的最為靈敏的指標之一，GGT、AST與ALT水平是最為常用的肝臟代謝酶，當機體內的GGT、AST與ALT水平逐漸升高，則提示患者機體肝臟組織受到的損傷不斷加重[8]。該次研究結果顯示，不同基因型患者的GGT、AST與ALT水平無明顯差異。有研究報道[9]丙型病毒肝炎患者非單基因型的ALT水平較單基因型水平更高，但單基因型與非單基因型患者的AST與GGT水平無明顯差異，可能是由于ALT位于細胞胞質內，當肝細胞被破壞，則其會被大量釋放入血，在血液內的水平會明顯升高，因此可被有效檢測。AST的位置在細胞線粒體內，需要受到嚴重的損傷才會進入到機體血液內，而GGT在機體肝細胞受到損傷后，細胞膜具備的通透性會提高，從而使GGT被有效釋放，但GGT具備的敏感性仍舊低于ALT。肝臟是機體多種凝血因子的生成場所，當肝臟功能受到損傷，則會導致多種凝血因子水平降低，并且丙型肝炎病毒對機體免疫應答作用產生刺激，形成免疫復合物，會對造血干細胞產生直接或間接損害，會導致患者機體血小板水平降低，進而使患者機體凝血功能受到損傷[10]。

該次研究結果顯示，不同基因型患者間的丙型肝炎病毒RNA定量結果實施單因素方差分析，結果表明存在明顯差異，由于1b型與3b型的病毒載量較為相似。目前臨床上在對慢性丙型肝炎進行治療時，聚乙二醇化干擾素-α與利巴韋林聯合用藥為標準方案，通過對我國流行的1b與2a基因型進行分析，1b基因型為難治型，其難以對干擾素產生持續性應答，同時容易出現復發，具備較長的治療周期，而2a型對于干擾素具備較好的應答，復發率低，可取得較好的抗病毒治療效果[11]。當機體受到丙型病毒肝炎感染后，若抗病毒治療不及時或治療不合理，則有超過80%的患者會轉變為慢性感染。該次研究結果顯示，相較于2a與1b/2a型，1b與3b型患者病毒載量更高；相較于1b與2a型，3b型患者TC與Apo-B水平更低；不同基因型患者的肝生化與其余脂代謝指標無明顯差異，由此可知，慢性丙型肝炎病毒感染容易導致脂代謝紊亂，不同基因型患者機體肝功能無明顯差異，但1b型患者的病毒載量更高，3型患者容易發生脂代謝指標異常[12]。

綜上所述，慢性丙型肝炎1b基因型為常見的感染類型，其次為2a型，不同丙型肝炎病毒基因型患者肝生化無明顯差異。