阿魏酸對炎性痛鎮痛作用探討

邱春玉，魏 爽，羅婉茹，卯潤敏，劉婷婷*

(1. 湖北科技學院基礎醫學院，湖北 咸寧 437100 2. 湖北科技學院藥學院，湖北 咸寧 437100)

疼痛是一種不愉快的感覺，一種情感體驗，在身體受傷的情況下，它通常是一個警告信號，是一種對周圍環境的保護性適應方式。周圍神經機制和中樞神經機制[1]是疼痛形成的兩種機制。周圍神經機制過程可以分為傷害性感受器，傷害性感受器的傳入，外周交感纖維活動與疼痛，外周敏感化。中樞神經機制的過程可以分為初級傳入纖維在脊髓背角的終止，傳遞痛覺信息的上行通路，痛覺中樞，中樞敏感化和疼痛的中樞調整機制[2]。根據流行病學研究， 11%到38%的兒童和青少年患有慢性疼痛，5.6%到18.1%的成年人患有慢性背痛[3]。在一個人的生活中，疼痛是必不可少的，如果沒有疼痛，就會對燒傷、攻擊等也沒有防御反應[4]。 但是治療疼痛已成為個體和社會的巨大經濟負擔，鎮痛藥主要通過抑制中樞神經系統和外周神經系統來發揮其鎮痛作用，傳統的非甾體類解熱鎮痛抗炎藥僅對輕中度疼痛有效且容易出現胃出血等副作用，嗎啡等阿片類鎮痛藥又具有成癮和耐受等許多嚴重不良反應[5]。因此，研究安全有效不良反應少的鎮痛藥物非常必要。

阿魏酸(3-甲氧基-4-羥基肉桂酸)是肉桂酸的衍生物，它是阿魏，當歸酸棗仁等中藥的有效成分之一，也是中藥的質量指標之一[6]。阿魏酸的生理功效主要有抗氧化，抑菌消炎，抗癌，抗輻射，抗血小板聚集和血栓的形成，改善心血管健康，防止骨質流失，提高女性更年期綜合征的療效，使老年人恢復和提高記憶力[7]。由于阿魏酸能抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細胞介素-1β(IL-1β)的升高，所以在炎癥反應中可以起到鎮痛作用[8]。

本研究將阿魏酸腹腔注射給藥作為實驗組，生理鹽水腹腔注射給藥為空白組，采用熱板實驗、醋酸扭體實驗、醋酸抬腿實驗觀察阿魏酸對炎性痛的鎮痛作用。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗動物

C-57小鼠，體重15～25g，性別不拘。由湖北省實驗動物研究中心提供。飼養條件：10只/籠，溫度(25±1)℃，濕度(50±10)%，自由攝食飲水。

1.2 實驗儀器與試劑

本研究所用的主要儀器有分析電子天平秤、微量進樣器、足趾容積測量儀和熱板儀；實驗所用試劑主要有阿魏酸(上海源葉，B20007)、生理鹽水(H51021158，科倫藥業)、乙醇(天力化學試劑，GB/T676-1990)、冰醋(GB/T678-2002，江北化學試劑)

1.3 小鼠抬腿法

取20只小鼠隨機分為2組，每組10只，分別為空白組和實驗組。兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸(給藥量為0.02mL/10g)。給藥0.5h后，用微型注射器給小鼠左足趾皮下注射2%醋酸溶液(給藥量為20μL/10g)，記錄小鼠5min內的抬腿次數。

1.4 小鼠扭體法

取20只小鼠隨機分為2組，分別為空白組和實驗組，每組10只。兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸(給藥量為0.02mL/10g)。二十分鐘后，各組小鼠腹腔注射2%醋酸溶液(給藥量為0.2mL/10g)，記錄小鼠15分鐘出現扭體反應的次數。

1.5 小鼠熱板法

室溫條件下，將熱板溫度調為為(55.0±0.5)℃，保持恒溫，并篩選出10～30秒內有舔后足反應的合格雌性小鼠20只，分為2組，每組10只，分別為空白組和實驗組。測定小鼠的基礎痛閾值后腹腔注射給藥，給藥1h、2h、3h后分別測定小鼠的熱痛閾值。

1.6 CFA法

Day1取20只小鼠隨機分為2組，測定小鼠的基礎足趾容積；然后用微量注射器給小鼠左后足注射CFA(給藥量為20μL/10g)；最后再進行腹腔注射給藥。

Day2 以同樣的方法測定小鼠的足趾容積后再進行給藥。

Day3兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸，給藥量為0.02mL/10g。

Day4 測定小鼠的足趾容積后給藥。

Day5兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸，給藥量為0.02mL/10g。

Day6 測定小鼠足趾容積后給藥。

Day7兩組小鼠分別腹腔注射生理鹽水和阿魏酸，給藥量為0.02mL/10g。

Day8測小鼠的足趾容積。

2 實驗結果

2.1 阿魏酸對小鼠扭體和抬腿次數的影響

由表1可知，與生理鹽水組相比較，阿魏酸組扭體次數減少(P<0.01)，抬腿次數也減少(P<0.05)，說明阿魏酸對小鼠的扭體反應和抬腿反應均具有鎮痛作用。鎮痛百分率 =[(生理鹽水組小鼠的平均次數 - 阿魏酸組小鼠的平次數) / 生理鹽水組小鼠的平均次數] × 100%。

2.2 阿魏酸對小鼠痛閾值的影響

實驗組的基礎熱痛閾值為14.44，空白組的基礎熱痛閾值為11.54。在給藥1h時，實驗組的熱痛閾值為18.39，空白組的熱痛閾值為13.65，由圖1可知，與空白組相比，實驗組熱痛閾增加。在給藥2h時，實驗組的熱痛閾值為15.35，空白組的熱痛閾值為11.26，與空白組相比，實驗組熱痛閾顯著增加(P<0.05)。在給藥3h時，實驗組熱痛閾為19.13，空白組的熱痛閾為15.03，與空白組相比，實驗組熱痛閾無顯著性差異(P>0.05)。

圖1 小鼠熱痛閾值變化率

2.3 阿魏酸對小鼠足趾容積的影響

由圖2可知：第二天時，實驗組小鼠足趾容積變化量為0.07，空白組小鼠足趾容積變化量為0.146，與空白組相比，實驗組明顯降低了小鼠足趾腫脹度；第四天時，實驗組小鼠足趾容積變化量為0.064，空白組小鼠足趾容積變化量為0.0325，實驗組明顯降低了小鼠的足趾腫脹度；第六天時，實驗組小鼠足趾容積變化量為0.0325，空白組小鼠足趾容積為0.042，與空白組相比，實驗組小鼠足趾容積無明顯差異；第八天時，實驗組小鼠足趾容積變化量為0.0375，空白組小鼠足趾容積變化量為0.024，實驗組小鼠足趾容無明顯差異。

圖2 小鼠足趾容積變化量

3 討論

疼痛是一種不愉快的感覺，它警告身體受到威脅并引起一系列防御反應，但它也有局限性，一些急性和長期的疼痛已經成為對身體無法忍受的折磨，并已成為當今影響健康的嚴重問題之一。慢性疼痛是由身體和內臟的慢性病引起的，慢性疼痛發病機制很復雜且備受爭議，例如“周邊機械理論”、“中央機械理論”和“心理學理論”[9]。慢性疼痛除了疼痛的癥狀外，還給患者造成精神、情緒和多種生理功能的紊亂。本實驗采用熱板法、醋酸扭體法、醋酸抬腿法和CFA4種疼痛模型，觀察小鼠急性和急慢性炎性痛反應。

阿魏酸鈉是從川芎中分離提純得到的一種藥物，在醫藥領域中，已知阿魏酸及其衍生物有降低血糖、清除自由基、止痛抗氧化等作用。有研究表明，氟桂利嗪和阿魏酸鈉治療偏頭痛的療效優于氟桂利嗪，說明阿魏酸具有鎮痛作用[10]。在我國，由于阿魏酸抗氧化性和對酪氨酸酶活性的抑制作用，使其在化妝品工業中應用也比較廣泛。

本實驗采用實驗動物疼痛模型觀察阿魏酸對炎性痛的鎮痛作用。扭體法是將一定量和濃度的化學刺激劑注入小鼠的腹腔，沉積在腹腔和腹腔壁中，在腹腔底部造成普遍的炎癥疼痛，并作出胸部和后腿延伸反應，這是一個典型的外周鎮痛模型。 在小鼠扭體實驗和抬腿實驗中，與空白組相比，小鼠扭體次數和抬腿次數均減少，且均顯示阿魏酸的鎮痛率在30%左右；熱板法是以一定的熱強度刺激動物身體一部分的疼痛，刺激開始與反應之間的潛伏時間被視為疼痛指標，是高位中樞參與的反應。 在小鼠熱板實驗中，實驗組小鼠熱痛閾增加且實驗組小鼠熱痛閾在給藥第二個小時時鎮痛效果達到最佳；在小鼠足趾容積實驗中，實驗組小鼠足趾容積腫脹度在第二天和第四天顯著減少，鎮痛效果最好，而第六天和第八天與空白組相差不大。綜上結果表明，阿魏酸對炎癥性疼痛具有一定鎮痛作用，而有研究表明其鎮痛機制可能與阿魏酸使海馬、前額皮膚和杏仁核的 5-HT 和 NE 水平劑量依賴性增加及抑制腦內MOA活性有關[11]。

4 結論

阿魏酸對炎性疼痛有一定的鎮痛作用，但是鎮痛作用不是特別強效，建議在患者有冠心病，糖尿病腎病伴有慢性疼痛時，可以聯合用藥使用阿魏酸進行鎮痛。