27 個郁金香栽培品種對種球腐爛病的抗性鑒定

王艷麗 賈文慶 朱小佩 穆金艷 丁 玲 龐彎彎 郭英姿

（河南科技學院園藝園林學院 新鄉(xiāng)453003）

郁金香（Tulipa gesnerianaL.），又名洋荷花、草麝香，屬百合科郁金香屬多年生鱗莖草本植物，常用于花卉展覽、盆栽觀賞和鮮切花種植。因其品種繁多、花型優(yōu)雅高貴、花色豐富等特點深受大眾喜愛。隨著郁金香種植面積不斷擴大，病害普遍發(fā)生，危害及其嚴重[1-3]。由尖孢鐮刀菌郁金香專化型（Fusarium oxysporumf. sp.tulipae）引起的種球腐爛病，也稱基腐病，是郁金香栽培中最主要的真菌病害之一，在種球貯藏期，發(fā)病癥狀主要表現(xiàn)為種球流膠，淀粉組織分解腐爛，后期呈黃褐色干腐，散發(fā)出刺鼻酒糟味，種球難以發(fā)根，進而不能發(fā)芽；在植株生長期間，發(fā)病癥狀則主要表現(xiàn)為地上部分植株矮小，葉片紫紅色至紫褐色，不開花，后期植株枯萎，土壤內(nèi)種球腐爛[4]。因此，種球腐爛病的發(fā)生嚴重影響郁金香的觀賞價值和經(jīng)濟效益。

郁金香種球腐爛病為土傳病害，病原菌可隨土壤、雨水、種球等傳播，防治困難。目前生產(chǎn)上普遍采用農(nóng)業(yè)防治和化學防治[5-6]，但是農(nóng)業(yè)防治效果不佳，而化學防治易使病原菌產(chǎn)生抗藥性同時造成環(huán)境污染，所以種植抗病品種是防治郁金香種球腐爛病最直接有效的方法。目前我國栽植的郁金香品種80%以上從荷蘭進口[7]，而我們對各栽培品種在我國的種球腐爛病的感染與發(fā)生情況并不清楚，因此急需了解當前郁金香品種在我國抗種球腐爛病情況。本研究采用改良土壤感病接種法對收集到的27 個郁金香栽培品種進行種球腐爛病抗性鑒定，篩選出對種球腐爛病有較高抗性的郁金香品種，以期為郁金香種球腐爛病防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

植物材料：27 個郁金香栽培品種的種球（荷蘭進口），分別于2017 年11 月和2018 年11 月購自北京碧溪花卉有限公司。

供試菌株：尖孢鐮刀菌郁金香專化型，由河南科技學院園藝園林學院新鄉(xiāng)市草花育種重點實驗室分離純化并提供，于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）上保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗方法

1.2.1 供試菌株活化 將保存的郁金香種球腐爛病菌轉(zhuǎn)接到新鮮配制的PAD 平板上，25℃條件下培養(yǎng)5～7 d，備用。

1.2.2 接種土壤的準備 將草炭土與燕麥 （質(zhì)量比5∶1）的混合基質(zhì)，加水攪拌，以手握成團、落地即散為宜，分裝到廣口玻璃瓶中，每瓶裝入3/4 的培養(yǎng)土，不宜過滿，用封口膜封好，高壓滅菌2 次，每次1 h，取出后冷卻備用。

1.2.3 接種與評價方法 接種方法采用改良土壤感病接種法，此方法在唐楠[6]對郁金香抗基腐病的鑒定方法基礎上進行了改良。用滅菌后的打孔器在已活化好的種球腐爛病菌培養(yǎng)基外圍打孔，打取直徑為8 mm 的菌餅，用消過毒的接種針取出菌餅，放入培養(yǎng)土中，每瓶放入10 個菌餅，攪拌菌餅和培養(yǎng)土使其混合均勻，用封口膜封好后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待培養(yǎng)土內(nèi)布滿菌絲后取出。挑取健康無病蟲的郁金香種球，剝?nèi)ネ鈱幽べ|(zhì)鱗片，用75%的酒精浸泡郁金香種球45 s，倒掉酒精后用無菌水沖洗4～5 次，取出種球放在濾紙上吸干多余水分。將種球放入長滿菌絲的培養(yǎng)土中，每瓶放入1 個種球，培養(yǎng)土以覆蓋住種球頂部為宜。每個栽培品種處理5 個種球，3 次重復。以接種PDA 培養(yǎng)基的培養(yǎng)土內(nèi)放入的種球作為對照。瓶身注明郁金香品種名稱，封口膜封好后放入25℃恒溫培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)6 周后觀察其感病情況。

1.2.4 病情調(diào)查 病情分級標準參考唐楠等[8]的郁金香基腐病的鑒定方法。采用1～5 級標準對各栽培品種處理種球進行分級：1 級——健康（種球干凈且堅硬），2 級——輕度感染（病斑≤10%），3 級——中度感染（10%＜病斑≤50%），4 級——重度感染（病斑＞50%，仍有少部分組織完好），5 級——完全腐爛。按下面的公式計算病情指數(shù)：病情指數(shù)（%）＝［Σ（病級種球數(shù)×病級）／（種球數(shù)總和×發(fā)病最重級）］×100。

1.2.5 抗性分級標準 按樣本的平均病情指數(shù)劃分郁金香栽培品種對病菌的抗性等級： 高抗 （HR）≤20.0，中抗（MR）20.1～50.0；中感（MS）50.1～80.0，高感（HS）≥80。

2 結(jié)果與分析

抗性鑒定結(jié)果表明（附表），27 個郁金香栽培品種中，‘阿爾瑪尼’‘王室女孩’和‘曼頓’的病情指數(shù)小于20，為高抗品種；‘黃普瑞斯瑪’‘紅色印象’‘維肯尼’‘粉色印記’‘金阿帕爾頓’‘紫衣王子’ 的病情指數(shù)在20.1～50 之間，為中抗品種；‘維多納’‘阿帕爾頓精華’‘班雅’‘圣誕頌歌’‘夜皇后’‘重現(xiàn)’‘慕斯卡蒂特’‘米蘭達’‘檢閱’‘飾邊優(yōu)雅’‘白百合’‘小黑人’‘卡羅拉’的病情指數(shù)在50.1～80.0 之間，為中感品種；‘卡奈奧德里’‘泰迪熊’‘黑鸚鵡’‘塔科馬山’‘純金’的病情指數(shù)高于80.0，為高感品種。

附表 郁金香不同栽培品種對種球腐爛病的抗性鑒定結(jié)果

3 結(jié)論與討論

本研究對27 個郁金香栽培品種的抗腐爛病能力進行了測定，結(jié)果表明，供試的品種沒有對腐爛病菌免疫的品種，但是不同郁金香栽培品種對尖孢鐮刀菌的抗性存在明顯差異，其中，高抗品種3 個，中抗品種6 個，中感品種13 個，高感品種5 個。選育和種植抗病品種是減輕病害損失的重要措施，目前國內(nèi)對于從荷蘭進口的郁金香栽培品種抗病性關注較少，因此了解郁金香栽培品種對種球腐爛病的抗性，可以指導品種合理布局，達到減少種球腐爛病發(fā)生的目的，在栽培生產(chǎn)過程中可多推廣對尖孢鐮刀菌抗性強的品種。同時本研究所鑒定的高抗品種，為郁金香雜交育種提供了較好的抗病材料。