駱駝口蹄疫疫苗實(shí)驗(yàn)

李國中，何新梅，莫日根別力格，姜新基，烏林花

（內(nèi)蒙古阿拉善左旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古 阿拉善 750300）

駱駝是阿拉善的優(yōu)勢畜種，中國的駱駝主要分布在阿拉善，故阿拉善也被稱為駱駝之鄉(xiāng)。很少有學(xué)者研究駱駝疫病預(yù)防，因?yàn)闆]有駱駝做實(shí)驗(yàn)。各種獸藥極少有駱駝的用量，只是在內(nèi)蒙古生產(chǎn)的一些獸藥，有駱駝的用量。

1 材 料

1.1 口蹄疫O 型滅活疫苗：生產(chǎn)批號(hào)：1911002；生產(chǎn)日期：20191118；有效期至20201117；規(guī)格：100mL/ 瓶；免疫期為4～6 個(gè)月，生產(chǎn)廠家是中牧實(shí)業(yè)股份有限公司蘭州生物藥廠。

1.2 口蹄疫O 型、A 型二價(jià)滅活疫苗：批準(zhǔn)文號(hào)獸藥生字310017541；生產(chǎn)批號(hào)：2019016；生產(chǎn)日期：20191103；有效期至20201102；規(guī)格：100mL/瓶；免疫期6 個(gè)月，生產(chǎn)廠家是新疆天康生物股份有限公司。

1.3 口蹄疫O 型抗體檢測LB-ELISA 試劑盒：生產(chǎn)批號(hào)E190806，生產(chǎn)日期：20200520；有效期至20210519；規(guī)格：10×96T；生產(chǎn)廠家是洛陽萊普生信息科技有限公司。

1.4 鹽酸腎上腺素注射液：批準(zhǔn)文號(hào)，獸藥字（2014）070011221；生產(chǎn)批號(hào)：181103；生產(chǎn)日期：181103；有效期至20201001；規(guī)格：5mL；生產(chǎn)廠家：吉林市華牧動(dòng)物保健品有限公司。

2 試驗(yàn)方案

2.1 分組和疫苗注射

2.1.1 為了有利于保定，優(yōu)先在巴彥浩特鎮(zhèn)周邊選擇擠奶的2 群駱駝。1 群駱駝按照免疫規(guī)程選擇口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗，另1 群駱駝選擇說明書上有駱駝注射2mL 的口蹄疫O 型疫苗。

2.1.2 總結(jié)2019 年駱駝口蹄疫疫苗實(shí)驗(yàn)失敗的原因：（1）注射劑量不夠，2mL、3mL 劑量都不能使機(jī)體產(chǎn)生長時(shí)間的效價(jià)；（2）注射劑量不夠，1 月后加倍注射，2 月后效價(jià)都沒有達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)的；（3）駱駝都帶耳標(biāo)，同時(shí)帶兜巾（駱駝脖子上系根繩，繩上縫有不同顏色的布）確保每峰駱駝同所采集的血樣必須一一對應(yīng)；（4）及時(shí)總結(jié)存在的問題。

2.1.3 口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗分3 組，4mL、6mL 兩個(gè)劑量。選擇12 月齡左右的駱駝，第一組：注射4mL，帶藍(lán)色兜巾，共9峰駱駝，4 周后加強(qiáng)免疫4mL；第二組：注射4mL，帶紅色兜巾，共9 峰駱駝，4 周后不加強(qiáng)免疫；第三組：注射6mL，帶藍(lán)白色兜巾，共9 峰駱駝，4 周后加強(qiáng)免疫6mL。

2.1.4 口蹄疫O 型疫苗，選擇另一戶飼養(yǎng)的12 個(gè)月齡左右的9 峰駱駝，注射4mL，帶粉色兜巾，4 周后加強(qiáng)免疫4mL。

2.1.5 因?yàn)槎际邱橊劯幔⑸鋭┝扛哌_(dá)6mL，防止出現(xiàn)過敏反應(yīng)的藥物，常備腎上腺素，一旦出現(xiàn)過敏，馬上靜脈注射。

2.2 采 樣

分別在注苗前15d、1 個(gè)月、2 個(gè)月、4 個(gè)月、5 個(gè)月采血檢測抗體效價(jià)。

3 檢測結(jié)果

表1 駱駝口蹄疫OA 型疫苗4mL 加強(qiáng)4mL 免疫試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

表2 駱駝口蹄疫OA 型疫苗4mL 免疫試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

3.1 由表1 可知，加強(qiáng)免疫后15d，效價(jià)全部達(dá)到合格（以1:90 為合格標(biāo)準(zhǔn)）以上標(biāo)準(zhǔn)，而且1 個(gè)月后還合格。通過表1和表2 可知，口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗同樣注射4mL 的劑量，4周后不加強(qiáng)免疫的只有1 例合格。加強(qiáng)免疫和不加強(qiáng)免疫的抗體效價(jià)差異明顯。

3.2 通過表1 和表3 可知，口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗注射4mL和注射6mL 的劑量，4 周后都加強(qiáng)免疫，但是注射劑量多，效價(jià)不高反低。同時(shí)驗(yàn)證，12 個(gè)月齡左右的駱駝，注射6mL，4周后加強(qiáng)6mL，都不會(huì)引起過敏反應(yīng)。

3.3 通過表1 和表4 可知，同樣注射4mL 的劑量，4 周后加強(qiáng)免疫，口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗產(chǎn)生的效價(jià)比口蹄疫O 型疫苗產(chǎn)生的效價(jià)高。

表3 駱駝口蹄疫OA 型疫苗6mL 加強(qiáng)免疫試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

表4 駱駝口蹄疫O 型疫苗4mL 加強(qiáng)4mL 免疫試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

3.4 由表4 可知，4mL 效價(jià)都達(dá)不到合格，2mL 能達(dá)到合格的可能性很小。

3.5 口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗的注射劑量是4mL，15d 可以檢測到抗體。結(jié)合2019 年的實(shí)驗(yàn)，注射2mL 或3mL 口蹄疫疫苗，15d 后檢測不到抗體效價(jià)。注射4mL15d 后，能檢測到抗體效價(jià)。

4 結(jié) 論

4.1 駱駝口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗的注射劑量以4mL 為宜，注射后15d 就可產(chǎn)生抗體。

4.2 駱駝注射4mL 口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗，5 個(gè)月后仍能檢測到效價(jià)。證明該疫苗的免疫保護(hù)期6 個(gè)月是可行的。

4.3 駱駝以注射口蹄疫OA 雙價(jià)疫苗為宜。

4.4 駱駝初次免疫4 周后應(yīng)加強(qiáng)免疫。

5 小 結(jié)

5.1 查閱阿拉善盟口蹄疫免疫技術(shù)方案中，免疫要求：對所有牛、駱駝?dòng)每谔阋逴A 型二價(jià)疫苗強(qiáng)制免疫.....，其它如劑量、一年免疫幾次等數(shù)據(jù)都空白。今年蘭州生產(chǎn)的O 型口蹄疫疫苗說明書上有駱駝免疫每峰2mL，后來向廠家咨詢，也未曾實(shí)驗(yàn)，只是參照牛。

5.2 開展駱駝口蹄疫疫苗免疫注射實(shí)驗(yàn)非常有必要，爭取為阿拉善駱駝疫病防控作出貢獻(xiàn)。

5.3 因?yàn)轳橊動(dòng)巫咝暂^強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)的駱駝到采血的時(shí)間后很難都找回來，導(dǎo)致數(shù)據(jù)不全，應(yīng)進(jìn)一步完善。

5.4 已經(jīng)免疫的駱駝，今年秋季再注射4mL，不加強(qiáng)免疫，檢測效價(jià)是否能達(dá)到合格。