孕婦生殖道B群鏈球菌培養篩查方法對比分析

黃思杰

摘要：目的：對孕婦B群鏈球菌（GBS）培養篩查方法進行對比分析。方法：選取2019年10月～2021年10月在營山縣中醫醫院進行產前GBS普篩的200名孕婦為研究對象，所有孕婦均應用四種GBS培養方法，包括血瓊脂培養、顯色瓊脂培養、普通增菌液培養以及顯色增菌液培養，對比四種GBS培養方法的陽性檢出率，陽性檢出時間。調查GBS陽性及陰性孕產婦的妊娠結局及新生兒結局。結果：顯色增菌液培養的陽性率最高（9.5 %），其次為普通增菌液培養（7.5 %）、顯色瓊脂培養（5.5 %），血瓊脂培養陽性率最低（2.5 %）。顯色增菌液培養陽性檢出時間最短，其次為顯色瓊脂培養。GBS陽性孕產婦的不良妊娠結局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產婦的9.94 %（P < 0.05）;GBS陽性孕產婦新生兒不良結局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %（P < 0.05）。結論：顯色增菌液培養GBS的陽性率最高，陽性檢出時間最短，可作為預測孕產婦及新生兒結局的重要依據。

關鍵詞：生殖道B群鏈球菌;培養篩查;陽性率;妊娠結局

B群鏈球菌（GBS）是一種寄居于女性生殖道的條件致病菌，也被稱為無乳鏈球菌，GBS感染是引起新生兒感染、死亡的重要原因。孕婦感染GBS后，可出現產褥感染、早產、胎膜早破等不良妊娠結局，同時也可能引起新生兒肺炎、腦膜炎、膿毒癥。研究認為，大部分新生兒GBS感染均為母嬰垂直傳播所致，因此，做好GBS感染預防及治療非常重要[1]。美國疾病控制預防中心（CDC）GBS防治指南指出，建議對孕35～37周孕婦進行普遍篩查，對存在潛在風險的孕婦應用抗生素預防[2]。在GBS培養篩查方法選擇方面，以往主要應用血平板分離鑒定法，但耗時較長，技術要求較高，操作繁瑣，且具有一定假陽性率。因此，為尋找更為準確、高效的GBS檢測方案，本文將對孕婦GBS培養篩查方法進行研究，現報道如下：

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2019年10月～2021年10月在營山縣中醫醫院進行產前GBS普篩的200名孕婦。年齡23～34歲，平均年齡（29.29±4.60）歲;孕周35～37周，平均孕周（36.78±0.82）周。所有孕婦取材前至少2周無性生活，未使用抗生素，單胎妊娠，可配合檢查及研究。

1.2 方法

所有孕婦均應用四種GBS培養方法。使用無菌拭子采集陰道分泌物，分別應用上海梅里埃公司的血瓊脂平皿、鄭州安圖生物的顯色瓊脂平皿、珠海迪爾生物的普通增菌液、選擇性顯色液體培養基接種。將標本置于5% CO2培養箱，于37℃環境下培養，時間18～24 h，隨后對血瓊脂、顯色瓊脂上的可疑菌落進行分純培養，例如革蘭陽性球菌菌落、紅色菌落。另外兩者轉種于血瓊脂，置于5% CO2培養箱，于37℃環境下培養，時間18～24 h，分純培養可疑菌落。

1.3 評價標準

（1）對比四種GBS培養方法的陽性檢出率。（2）對比四種GBS培養方法的陽性檢出時間。（3）調查GBS陽性及陰性孕產婦的妊娠結局及新生兒結局。

1.4 統計學處理

應用SPSS 22.0軟件對臨床資料進行統計分析，計數資料用（%）表示，行χ2檢驗;計量資料用（x±s）表示，行t檢驗;P < 0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陽性檢出率對比

200名孕婦，血瓊脂培養GBS陽性5例，陽性率2.5 %;顯色瓊脂培養GBS陽性11例，陽性率5.5 %;普通增菌液培養GBS陽性15例，陽性率7.5 %;顯色增菌液培養GBS陽性19例，陽性率9.5 %。可見顯色增菌液培養的陽性率最高，血瓊脂培養陽性率最低，差異明顯（P < 0.05）。

2.2 陽性檢出時間對比

血瓊脂培養陽性檢出時間為（72.92±3.89）h，顯色瓊脂培養為（52.53±5.66）h，普通增菌液培養為（71.67±3.90）h，顯色增菌液培養為（39.62±3.72）h。可見顯色增菌液培養陽性檢出時間最短，明顯低于顯色瓊脂培養、血瓊脂培養、普通增菌液培養（P < 0.05）;其次為顯色瓊脂培養，明顯低于血瓊脂培養、普通增菌液培養（P < 0.05）;血瓊脂培養、普通增菌液培養無明顯差異（P > 0.05）。

2.3 孕產婦妊娠結局對比

GBS陽性孕產婦的不良妊娠結局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產婦的9.94 %，差異明顯（P < 0.05），見表1。

2.4? 新生兒結局對比

GBS陽性孕產婦新生兒不良結局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %，差異明顯（P < 0.05）。見表2。

3 討論

女性在妊娠期機體及生殖道內環境均會出現明顯改變，陰道上皮細胞糖原水平可出現明顯升高，乳酸濃度也處于較高水平，因此為耐酸微生物的生長創造了良好的條件，導致其大量繁殖，并造成陰道內微環境破壞，陰道黏膜受損，機體免疫下降，更容易受到病原菌入侵，增加細菌感染風險。GBS是一種常見的條件致病菌，屬于革蘭陽性菌-無乳鏈球菌，主要存在于厭氧環境。研究發現，鏈球菌感染是導致圍生期母嬰感染、嬰幼兒敗血癥、腦膜炎等并發癥的重要危險因素[3]。主要是由于GBS對絨毛膜組織的吸附力、穿透力較強，因此更容易引起孕產婦不良結局，引起孕婦生殖道感染。同時若不能及時有效地控制GBS感染，還可能引起胎兒宮內生長受限、新生兒感染、智力發育遲緩、視聽覺喪失等不良妊娠結局及遠期后遺癥[4]。由此可見，應對GBS感染提高重視程度，做好早期篩查，并采取恰當的干預措施。

在GBS培養方面，分子生物學方法雖然能夠在短時間內完成檢測，但操作復雜，成本較高，技術及設備要求較高，且無法針對菌種進行藥敏試驗，因此在一定程度上限制了其臨床應用。傳統微生物檢驗檢出率不高，耗時較長，不適合高通量的GBS檢測。因此，本文應用了四種GBS培養方法，結果顯示，顯色增菌液培養的陽性率最高（9.5 %），其次為普通增菌液培養（7.5 %）、顯色瓊脂培養（5.5 %），血瓊脂培養陽性率最低（2.5 %）。顯色增菌液培養陽性檢出時間最短，其次為顯色瓊脂培養，與血瓊脂培養、普通增菌液培養差異明顯（P < 0.05），可見顯色增菌液培養在檢出陽性率及檢出時間方面均更具優勢。從整體上看，單純平皿培養具有較高的漏檢率，分析其原因，主要是由于陰道內雜菌較多，其生長會被其他雜菌抑制，導致漏檢發生，而液體增菌能夠使原始標本菌量擴大，從而達到提高陽性檢出率的目的。同時，與普通增菌液相比，顯色液體培養基的陽性檢出率更高，主要是由于其中含有萘啶酮酸、慶大霉素，能夠對陰道寄生的其他細菌產生抑制作用，因此GBS能夠更好地生長，通過大量擴增提高培養陽性率[5]。此外從檢出時間上看，可見顯色培養的檢出時間均短于普通培養，而顯色培養方法中，顯色增菌液培養的檢出時間更短。主要是由于顯色瓊脂及增菌液均有能夠促使GBS特異性顯色的底物，培養物能夠表現出不同的顏色，不需過多的操作和實驗技能，可直接根據顏色判斷結果，因此檢測時間明顯縮短。以往有研究顯示，顯色培養法的靈敏度、特異度均高于普通培養，但培養6 h靈敏度偏低，反應顏色較淺，培養12 h后可達到更高的靈敏度及特異度[6]。分析其對孕婦妊娠結局預測價值，在本次研究中，GBS陽性孕產婦的不良妊娠結局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產婦的9.94 %（P < 0.05）;GBS陽性孕產婦新生兒不良結局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %（P < 0.05），可見GBS陽性孕產婦及新生兒不良結局的風險更高。顯色增菌液培養能夠更好地檢出GBS感染情況，從而預測其不良結局風險，指導臨床治療。

綜上所述，顯色增菌液培養GBS的陽性率最高，陽性檢出時間最短，可作為預測孕產婦及新生兒結局的重要依據。

參考文獻

[1]張昭勇，楊宏偉，張吉才.圍產期孕婦B群鏈球菌三種篩查方法的評估[J].臨床誤診誤治，2020，33（7）：54-57.

[2]徐少勇，鐘群英.免疫層析法快速檢測臨產急診入院孕婦生殖道B族鏈球菌（GBS）的價值分析[J].現代診斷與治療，2019，30（15）：2633-2635.

[3]胡矩鋒.孕晚期B群鏈球菌對母嬰圍產結局的影響[J].中國社區醫師，2020，36（11）：15-16，18.

[4]馬文靜.孕期細菌性感染宮頸分泌物菌群分布特點及耐藥性分析[J].醫學理論與實踐，2019，32（13）：2103-2104.

[5]孫雷，孫繼文，邵坤.B族鏈球菌顯色培養在產前篩查中的應用及孕婦妊娠結局預測價值[J].國際檢驗醫學雜志，2021，42（20）：2515-2518.

[6]符葉，沈婕，管翠，等.三種培養法在妊娠晚期孕婦B族鏈球菌感染篩查中的應用[J].中華醫院感染學雜志，2021，31（5）：753-757.