載他克莫司可注射溫敏水凝膠促牙髓干細胞成骨向分化作用研究

王芃 何華春 李道偉 孫宏晨 吳立鵬

人牙髓干細胞(human pulp stem cells，hDPSCs)是組織再生醫學領域研究的熱點之一[1]。hDPSCs的獲取方便，可以由患者自身牙齒的自體細胞提供。hDPSCs是干細胞，能夠多向分化為成牙本質細胞，神經源性細胞，脂肪細胞細胞等[2]。由于它們有向成骨分化的能力[3]，可作為骨組織工程中細胞的選擇。

他克莫司FK506是一種強效的免疫抑制劑，廣泛用于實驗和臨床中的預防移植后的器官排斥和治療自身免疫性疾病[4]。有研究報道，FK506的治療可能會增加骨量，并可能對骨缺損是一種潛在的治療方式[5]。

本研究提出一種由可注射溫敏水凝膠與FK506復合材料(FK506-TH)制備的生物相容性骨修復材料。單純應用FK506存在半衰期短、價格昂貴、易降解等問題，因此，常需與合適的藥物控釋系統復合，以保證其在損傷處持續高效釋放，更好的發揮促進組織再生的作用。而載有促進組織修復藥物的水凝膠材料在達到適宜溫度時凝結成膠狀固體，更具有藥物緩釋性能。在保證FK506藥物正常發揮功能的同時，增加了可溶性溫敏水凝膠的協同促進作用，以期獲得具有較大性能空間的材料。長期、持續、少量的給藥形式，有望在個性化醫療中得到應用。本文旨在探討載FK506可注射溫敏水凝膠(FK506-TH)作為一種有效的骨修復材料是一種有前景的治療策略。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與設備

FK506、ALP試劑盒、茜素紅S(Sigma公司，美國)；胎牛血清(FBS)(Gibco公司，美國)；青霉素鏈霉素雙抗溶液(PAA公司，美國)；Cell Counting Kit-8(DOJINDO Laboratories公司，日本)；引物(Takara公司，日本)；酶標檢測儀(Bio-TEK公司，美國)；……