程序性壞死在髁突軟骨退變中的作用

何峰 葉濤 馬原軍 楊祖閣 李天樂 仝昕 于世賓

顳下頜關節紊亂病(temporomandibular disorders, TMD)的人群發病率高達20%～40%，顳下頜關節骨關節炎(temporomandibular joint osteoarthritis, TMJ OA)是其重癥形式[1]。關節軟骨退變是OA最典型的病理特征之一[2]。 軟骨細胞死亡是關節軟骨退變中的核心事件，但其確切發病機制尚未完全闡明。目前公認的細胞死亡類型主要有“凋亡”、“自噬”和“壞死”三種[3]，在細胞凋亡、自噬進程中不存在細胞內外大規模的物質交流，一般不引起或僅有輕微的周圍組織反應；而壞死發生時，細胞器腫脹、細胞膜完整性嚴重破壞、細胞及其內容物崩解進入周圍組織[4-5]。目前程序性壞死(Necroptosis)是研究最多的壞死途徑，其發生機制是由腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)作用于細胞膜上的腫瘤壞死因子受體啟動，在細胞內由受體相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1, RIPK1)和RIPK3傳遞死亡信號，募集并磷酸化混合系激酶區域樣蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL)形成壞死小體，最終導致細胞死亡、細胞膜破裂[6-7]。細胞膜破裂所釋放的內容物將作為損傷相關的分子模式(damage associated molecular patterns, DAMPs)，如高遷移率族蛋白1(high mobility group protein B1, HMGB1)等。DAMPs可以在軟骨或關節腔內以自分泌或旁分泌的方式誘導周圍細胞分泌TNF-α、基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)等促炎/降解因子[8-9]，進一步加重軟骨細胞死亡及軟骨基質降解。但截至目前Necroptosis在TMJ OA中的作用未見報道，本研究應用本實驗室建立的髁突軟骨退變動物模型，探究軟骨細胞Necroptosis在TMJ髁突軟骨退變中的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組及模型建立

6 周齡雌性SD大鼠48 只(第四軍醫大學動物中心提供)，隨機分為Con、E2、UAC和U+E2組，每組12 只。按照報道的方法[10]，UAC、U+E2組通過在左側上、下前牙分別粘接套筒冠，形成不良修復體，從而造成單側前牙反；……