甘草苷調控PI3K/Akt/m-TOR信號通路對口腔鱗狀細胞癌細胞及裸鼠移植瘤小鼠的作用研究

鄧溪川 劉璐 王占利 姚睿

甘草苷(Liquiritin, LIQ)是甘草類黃酮的主要成分，具有顯著的抗癌作用，研究表明，LIQ通過誘導細胞凋亡和抑制細胞增殖來發揮其抗癌效果，然而，LIQ對口腔鱗狀細胞癌的效果和相關分子機制還沒有被揭示，本研究探討了LIQ對口腔鱗狀細胞癌細胞活力、凋亡的影響并通過構建裸鼠瘤模型進行了體內驗證，并分析了的PI3K/AKT/m-TOR信號通路在其中所扮演的角色。

1 材料與方法

1.1 細胞株和動物分組

人口腔鱗狀細胞癌Cal-27、Tca8113細胞系、人正常肝QSG-7701、人正常腎293T細胞系購自于中國科學院細胞研究所； 24 只6～7 周齡SPF級BALB/c nu/nu雄性裸鼠，體重18～20 g， 購自上海杰思捷實驗動物有限公司，實驗分為四組(對照組、低濃度LIQ處理組，中濃度LIQ處理組和高濃度LIQ處理組)；各組小鼠在恒溫恒濕的IVC小鼠房進行飼養，所有接觸的籠具，飲水，飼料等均進行滅菌處理，并已通過實驗動物倫理委員會的批準。

1.2 主要試劑與儀器

LIQ(CAS:551-15-5, HPLC≥98%)(上海純優生物科技有限公司)；高糖DMEM培養基、PRMI 1640細胞培養基(Hyclone公司， 美國)；胰蛋白酶-EDTA細胞消化液(TE)、FBS 胎牛血清和鏈霉素-青霉素(PS)雙抗(上海冰晴公司)；一抗、二抗(北京索萊寶生物科技公司)；CCK-8試劑盒、細胞凋亡試劑盒、蛋白濃度測定試劑盒、TUNEL檢測試劑盒、電化學發光(ECL)發光試劑盒(上海碧云天生物科技有限公司)。

ReadMax 1900Plus型光吸收全波長酶標儀(上海閃譜生物科技有限公司)；海爾HCB-900V潔凈工作臺(上海臣蓮生物科技發展有限公司)；二氧化碳恒溫培養箱(SANYO公司，日本)；流式細胞儀(貝克曼-庫爾特生有限公司， 美國)。

1.3 實驗方法

1.3.1 CCK-8實驗……