支氣管哮喘兒童血清1，25－(OH)2D3與MMP－9的相關性研究

支氣管哮喘兒童血清1，25－(OH)2D3與MMP－9的相關性研究

兒童支氣管哮喘是兒童最常見的慢性呼吸道疾病，是一種高氣道反應性的炎癥性疾病，涉及到多種炎癥介質和炎癥細胞對氣道的作用［1］。血清1，25－(OH)2D3是人體內非常重要的維生素D活性代謝產物，也有文獻稱之為一種前體激素，其活性型為1，25－(OH)2D3。其作用原理與經典的類固醇激素一樣，主要是通過維生素受體(Vitamin D receptor，VDR)結合而產生的生物學效應。最近的流行病學研究表明補充1，25－二羥維生素D3不僅可以有效改善激素的治療反應，而且還可以提高CD4+細胞在地塞米松作用下分泌IL－10的能力［2］。MMP－9是一類結構中含有鋅和鈣等金屬離子的蛋白酶，可以降級細胞外基質(ECM)蛋白，在炎癥的發病過程中起著重要作用。雖然慢性哮喘已經證實多是由嗜酸性粒細胞等炎癥因子的脫顆粒造成，但是近幾年大量研究表明氣道重塑所造成的不可逆性的氣流阻塞和肺功能損害也是慢性哮喘的重要因素之一。張玉彩等在研究中發現在慢性哮喘大鼠模型中1，25－(OH)2D3不但可以提高地塞米松的抗炎能力，而且還有一定的免疫調節的作用［3］。本研究通過比較三個程度哮喘兒童與正常兒童血清中1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量來探討1，25－(OH)2D3與氣道重塑的關系，并有效地針對性地為治療兒童支氣管哮喘提供一個新的理論依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:收集2014年1月至10月住院并確診為哮喘的患兒90例，年齡為1～6歲，符合支氣管哮喘的診斷標準［4］，并且根據以上標準選取哮喘兒童輕度持續級、中度持續級和重度持續級三個級別，每組30例。隨機選取健康體檢兒童30例。所有兒童均無慢性肝腎疾病，均無其他代謝性疾病。各組間性別和年齡的構成比均無統計學意義。

1.2 方法:入托體檢的健康兒童，清晨空腹，肘正中靜脈抽血5mL;哮喘兒童在治療前，清晨空腹，肘正中靜脈抽血5mL。所有標本3000轉/分離心10min，分離出血清，－20℃冰箱保存等待統一測量。提前30min從冰箱取出1，25－(OH)2D3和MMP－9檢測試劑盒(大連寶晶技術有限公司)，室溫放置。嚴格按照試劑盒說明，使用酶聯免疫吸附法對標本進行檢測。為了保證實驗結果的準確性和可靠性，實驗過程由同一人完成，減少主觀誤差。

1.3統計學處理:采用SPSS軟件17.0對檢驗結果進行統計學分析。P＜0.05和P＜0.01表明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 從輕、中、重三個程度的哮喘患兒的血清1，25－(OH)2D3的含量來分析:輕度持續期哮喘患兒的血清1，25－(OH)2D3與對照組比較，無明顯變化，無統計學意義;中度持續期哮喘患兒的血清1，25－(OH)2D3含量低于對照組(P＜0.05);重度持續期哮喘患兒的血清1，25－(OH)2D3含量明顯低于對照組(P＜0.01)(見表1)。

表1 各組兒童1，25－(OH)2D3含量(±s)

表1 各組兒童1，25－(OH)2D3含量(±s)

注:*表示與健康體檢組比較;#表示與輕度持續組比較;Δ表示與中度持續組比較

組別例數1，25－(OH)2D3(ng/mL健康體檢組3036.17±12.87輕度持續組3028.51±6.01*中度持續組3022.21±8.41*#重度持續組3015.11±4.71*#Δ

2.2 從輕、中、重三個程度的哮喘患兒血清中的MMP －9的含量來分析:輕度持續期哮喘患兒的血清MMP－9與對照組比較，無明顯變化，無統計學意義;中度持續期哮喘患兒的血清MMP－9含量高于對照組(P＜0.05);重度持續期哮喘患兒的血清MMP－9含量明顯高于對照組(P＜0.01)(見表2)。

表2 各組兒童MMP－9含量(±s)

表2 各組兒童MMP－9含量(±s)

注:*表示與健康體檢組比較;#表示與輕度持續組比較;Δ表示與中度持續組比較

組別例數MMP－9(pg/mL)健康體檢組300.53±0.25輕度持續組300.99±0.02*中度持續組303.29±1.21*#重度持續組305.87±1.43*#Δ

3 討論

兒童支氣管哮喘是一種氣道的變態反應疾病，它由多個因子誘發，容易反復的發作。兒童的哮喘常在夜間或者清晨發作，是兒童期的常見病和多發病。哮喘的發病機制尚不清楚，大量的研究資料表明嗜酸性粒細胞和肥大細胞的脫顆粒，釋放炎癥介質造成的氣道炎癥損傷已經成為確證的結論。近幾年對哮喘的研究則把重點放在了氣道重塑這個方面。氣道重塑的病理結構改變主要表現為上皮細胞的脫落和再生、杯狀細胞和腺體的增生，上皮下膠原和細胞外基質(ECM)的沉積平滑肌細胞聚集增多，血管形成及血管軟骨減少［5］。這種氣道的重塑最終導致氣流不可逆阻塞，肺功能損害。Araujo［6］研究發現MMP－9是ECM降解的關鍵酶，不僅是其代謝的限速酶，而且是導致氣道重塑的關鍵原因。除此之外，在重癥哮喘患者的支氣管平滑肌細胞中發現了MMP－9的高表達，以上這些報道都表明了MMP－9參與哮喘的病理過程。

目前，對于哮喘兒童的治療主要是使用布地奈德等激素藥物的霧化治療。激素的治療效果雖然明顯，但是長期使用的不良反應更為明顯，尤其是對兒童的影響更是不容樂觀。本文旨在研究支氣管哮喘兒童血清中的1，25－(OH)2D3是否與氣道重塑有所關聯，這樣就可為臨床提供一種降低哮喘反應的新方法。宋穎芳［7］等人僅在大鼠哮喘模型中研究過大鼠血清中1，25－(OH)2D3可以降低MMP－9的含量，降低了氣道重塑，并沒有在兒童支氣管哮喘的血清中研究過兩者的關系，沒有在兒科治療的理論上對其加以詮釋。朱永潔等［8］在研究中得出了1，25－(OH)2D3可以輔助治療兒童支氣管哮喘的結論，只是從降低氣道炎癥反應的方面證實了其治療作用。本文研究發現哮喘患兒血清中的MMP－9含量高于對照組，并且與哮喘的嚴重程度相關，哮喘越嚴重，表現出血清中MMP－9的含量越高。這表明1，25－(OH)2D3對哮喘有一定的抑制作用，并且降低了MMP－9在支氣管平滑肌細胞的高表達，這與宋穎芳等人在大鼠模型的研究中得出的結論相一致。最近的流行病學研究表明補充1，25－二羥維生素D3不僅可以有效改善激素的治療反應，而且還可以提高CD4+細胞在地塞米松作用下分泌IL－10的能力。此次實驗從患兒血清的1，25－二羥維生素D3和MMP－9的相關性來分析，得出了1，25－二羥維生素D3可以降低患兒血清MMP－9的表達，改善氣道重塑，治療兒童支氣管哮喘的結論。以上結論提示臨床可以使用1，25－二羥維生素D3輔助治療兒童哮喘，此方法較為安全，具有一定的前景，值得進一步的深入研究。

［1］Sun B，Karin M.NF－κB signaling liver disease and hepatoprotective agents［J］.Oncogene，2008，27(48):6224～6228.

［2］Xysrrakis E，Kusumakar S，Boswell S，et al.Reversing the defective induction of IL－10 secreting regulatory T cells in glucocorticoid－resistant asthma patients［J］.Clin Invest，2006，116:146～155.

［3］張玉彩，費艷，張林.哮喘兒童血清1，25－(OH)2D3與IL－10水平及肺功能的相關性研究［J］.成都醫學院學報，2013，8(3):333～335.

［4］中華醫學會兒科分會呼吸學組.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南［J］.中華兒科雜志，2008，42(10):100～106.

［5］Bergeon C，Boulet LP.Strucctural changes in airway diseases characteristics，mechanisms，consequences and pharmacologic modulation［J］.Chest，2006，129(4):1068～1087.

［6］Araujo BB，Dolhnikoff M，Silva LF.Extracellular matrix components and regulators in the airway smooth muscle in asthma［J］.Eur Respir，2008，32(1):61～69.

［7］宋穎芳，洪景芳.1，25－(OH)2D3對慢性哮喘小鼠氣道重塑中MMP－9及NF－κB表達的影響［J］.中國呼吸與重癥監護雜志，2013，1(12):36～40.

［8］朱永潔，周曉英.支氣管哮喘兒童血清1，25－(OH)2D3和CRP測定的臨床意義［J］.上海預防醫學，2012，24(12): 702～703.

熊慧華1，溫艷1，李玉華1，劉艷芳1，張中敏2，馮毅雯1
(1.河北省承德市婦幼保健院，河北承德067000 2.承德附屬醫院承鋼分院，河北承德067102)

目的:探討支氣管哮喘患兒血清1，25－(OH)2D3與基質金屬蛋白酶9(MMP－9)的關系，為治療患兒哮喘提供一個新的方法和理論依據。方法:收集本院住院的支氣管患兒90例，分為輕度持續級、中度持續級和重度持續級三個級別，每組30例。隨機選取30例健康體檢兒童為對照組。用酶聯免疫吸附法測定各組血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量。結果:輕度哮喘組血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量與對照組相比無統計學意義;中度哮喘組和重度哮喘組血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量與對照組相比均有統計學意義。結論:哮喘患兒可以通過補充1，25－(OH)2D3來降低MMP－9在氣道的高表達，減輕氣道重塑，改善肺部功能，從而達到治療支氣管哮喘的目的。

哮喘;1，25－二羥維生素D3;基質金屬蛋白酶9

The Correlation of Content of Serum 1，25－(OH)2D3and Level of MMP－9 of Children with Asthma

XIONG Huihua，WEN Yan，LI Yuhua，et al
(Children and Women Health Care Hospital of Chengde，Hebei Chengde067000，China)

Objective:To explore the correlation between the level of serum 1，25－(OH)2D3and MMP －9 in children with asthma.Method:90 children with asthma were considered as asthma group，30 healthy children were considered as control group.30 cases of mild persistent group，30 cases of moderate persistent group and 30 cases of severe persistent group were chosen in the asthma children.The level of 1，25－(OH)2D3and MMP－9 were measured by enzyme－linked immunosorbent assay(ELISA).Result:The level of 1，25 －(OH)2D3and MMP－9 in the persistent group was not correlated with the control group.The level of 1，25 －(OH)2D3and MMP－9 in the moderate persistent group and severe persistent group were correlated with the control group.Conclusion:1，25－(OH)2D3can down－regulate the level of the MMP－9 and alleviate the established chronic asthma－induced airway remodeling，thus 1，25－(OH)2D3can improve the lung function and treat the asthma.

Asthma;1，25－(OH)2D3;MMP－9

B

10.3969/j.issn.1006－6233.2015.07.024

1006－6233(2015)07－1131－04