電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定丙泊酚注射液中有害元素含量*

鄭 穎，白 靖，梁 平，高亞乾，杜文力，馮 銳

（河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院藥學(xué)部，河北 石家莊050011）

丙泊酚注射液為短效靜脈麻醉藥，起效快，廣泛用于臨床麻醉［1-3］，其中含有的有害元素是臨床主要風(fēng)險來源。重金屬在人體易與酶蛋白結(jié)合，使蛋白質(zhì)失去活性，損傷人體組織細(xì)胞，過量攝入某些重金屬會對人體產(chǎn)生危害［4-6］。因此，建立一種快速檢測丙泊酚注射液中銅(Cu)、砷(As)、鎘(Cd)、汞(Hg)、鉛(Pb)5種有害元素含量的方法十分重要。電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）法靈敏度高、線性范圍寬，可同時測定多元素，已成為痕量有害金屬離子檢測的首選方法［7-9］。本研究中采用ICP-MS技術(shù)檢測丙泊酚注射液中有害元素的含量，以保障臨床用藥安全。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫7700型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，配安捷倫SPS4 Autosampler型自動進(jìn)樣器（美國安捷倫公司）；Mars型高壓微波消解儀（美國CEM公司）；Millpore Milli-QIQ7000型超純水機(jī)（德國默克密理博公司）。

1.2 試藥

鉛（Pb）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB04-1742-2004），鎘（Cd）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1000μg/mL，批號為GSB 04-1721-2004），銅（Cu）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1725-2004），砷（As）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1714-2004），汞（Hg）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1729-2004），金（Au）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1715-2004），銦（In）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1731-2004），鉍（Bi）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1719-2004），鍺（Ge）標(biāo)準(zhǔn)溶液（純度為1 000μg/mL，批號為GSB 04-1728-2004），均購自國家有色金屬及電子材料分析測試中心；水為純化水，硝酸為優(yōu)級純，其他試劑均為化學(xué)純；丙泊酚注射液（西安力邦制藥有限公司，批號分別為1412262，1505141，1412253，1505112，1503142，規(guī)格為20 mL∶0.2 g）。

2 方法與結(jié)果

2.1 ICP-MS工作條件

儀器最佳工作參數(shù)見表1。

表1 儀器工作參數(shù)Tab.1 The working parameters of the instruments

2.2 溶液制備

內(nèi)標(biāo)溶液：精密量取Ge，In，Bi標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.1 mL，置100 mL容量瓶中，分別用水稀釋成質(zhì)量濃度為1μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

標(biāo)準(zhǔn)金溶液：精密量取Au標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 mL，置100 mL容量瓶中，用2%硝酸稀釋成質(zhì)量濃度為1μg/mL的溶液。

供試品溶液：精密量取樣品0.3 mL，加入硝酸7 mL，置微波消解儀中消解完全，冷卻后取出，精密加入Au標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2 mL，用2%硝酸稀釋至50 mL，搖勻，即得。如樣品中測定結(jié)果超出線性范圍，則用2%硝酸適當(dāng)稀釋后，進(jìn)行測定。同法配制空白溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：分別精密量取Pb標(biāo)準(zhǔn)溶液和As標(biāo)準(zhǔn)溶液各50μL，Cd標(biāo)準(zhǔn)溶液25μL，Cu標(biāo)準(zhǔn)溶液500μL，置50 mL容量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液A。精密量取Hg標(biāo)準(zhǔn)溶液50μL，置50 mL容量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液B。精密量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液A和B適量，用2%硝酸配制成每1 mL含Pb 1，5，10，20 ng，含Cd 0.5，2.5，5，10 ng，含As 1，5，10，20 ng，含Cu 10，50，100，200 ng，含Hg 0.2，1，2，5 ng的系列質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。按儀器最佳工作條件進(jìn)行測定，量取內(nèi)標(biāo)溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液同時進(jìn)樣（ICP是蠕動泵進(jìn)樣，無進(jìn)樣體積），依次測定，以測量值（Y）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（X，μg/mL）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見表2。

表2 5種有害元素線性關(guān)系、檢測限和定量限考察結(jié)果Tab.2 Linear relationship，limit of detection and limit of quantitation of five harmful elements

檢測限和定量限確定：照樣品前處理方法，依法測定，樣品空白溶液重復(fù)進(jìn)樣11次，以測定濃度標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）的3倍為檢測限，以測定濃度標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）的10倍為定量限。結(jié)果見表2。

精密度試驗：選取分別含Pb，As，Cd，Cu，Hg 10，10，5，100，2 ng的標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果Pb，Cd，Cu，As，Hg含 量 的RSD分 別 為1.40%，1.17%，1.09%，1.78%，1.46%(n=6)，表明儀器精密度良好。

回收率和重復(fù)性試驗：取樣品適量，精密量取0.3 mL，共18份，分別置50 mL消解管中，各6份，平行測定3組，分別精密加入標(biāo)準(zhǔn)貯備液A 250，500，750μL，標(biāo)準(zhǔn)貯備液B 50，100，150μL，按2.2項下方法制備低、中、高3個濃度水平的供試品溶液，各6份，分別進(jìn)樣測定，并計算回收率。結(jié)果見表3。

2.4 樣品含量測定

取樣品(批號分別為1411242，1505133，1412233，1409162，1505131)，按2.1項下工作條件進(jìn)行測定，按標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各元素濃度，得各元素對應(yīng)含量。結(jié)果見表4。

3 討論

有害元素如Pb，Cd，As，Cu，Hg等可通過土壤、水和環(huán)境的污染，對大豆、雞蛋等造成吸收污染，通過注射液危害人體健康。丙泊酚注射液由大豆油、蛋黃卵磷脂、甘油和注射用水組成［10］，故檢測有害元素十分必要。

相較于濕法、干法等傳統(tǒng)樣品消解方法［11］，微波消解法操作簡單、高效，酸用量少，不易污染，在元素分析中應(yīng)用廣泛［12］。重金屬限量檢查法除了有主觀的目測顏色比對相關(guān)的明顯誤差外，不能給出單個元素濃度，且也不能測定一些常用元素［13］。

本研究中采用ICP-MS法測定樣品中Pb，Cd，As，Cu，Hg 5種有害元素的含量，方法簡便，回收率在規(guī)定范圍內(nèi)，精密度高，重復(fù)性好，與標(biāo)準(zhǔn)方法測定結(jié)果基本一致［14］。丙泊酚注射液中Pb，Cd，As，Cu，Hg的含量較低，均在標(biāo)準(zhǔn)限度范圍內(nèi)［15］。本研究結(jié)果能為保障丙泊酚注射液的質(zhì)量和臨床用藥安全提供參考。

表3 回收率和重復(fù)性試驗結(jié)果（n=6）Tab.3 Results of recovery and repeatability tests（n=6）

表4 樣品含量測定結(jié)果（ng/mL）Tab.4 Results of content determination of sample（ng/mL）