ELISA法和RIA法在檢測系統性紅斑狼瘡抗雙鏈DNA抗體中的效果對比

河南省范縣人民醫院（457500）孫文順

系統性紅斑狼瘡（SLE）是常見的一類自身免疫疾病，會導致機體多器官受累，目前尚無根治方案。SLE患者會產生針對組織蛋白及核酸的特殊抗體，目前抗雙鏈DNA（抗dsDNA）抗體已經成為了診斷SLE及判別SLE病情活動的重要指標[1]。目前抗dsDNA抗體的檢測方案包括酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、間接免疫熒光法（CLIFT）等，有研究證實RIA法在檢測抗dsDNA抗體水平上有著較高的陽性率，但該方案具有一定的污染性，臨床應用受限[2]，也有研究認為RIA法與疾病活動情況有關。ELISA法多作為SLE的一個篩選方案，在抗dsDNA抗體檢測上開展有限[3]。本文就ELISA法和RIA法在檢測SLE患者抗dsDNA抗體上的診斷效能進行了研究對比，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象選取為2016年3月～2019年12月之間我院186例SLE患者、183例其他自身免疫疾病患者（非SLE）、78例非自身免疫疾病者和50例健康體檢者，分別設為SLE組、其他自身免疫疾病組、非自身免疫疾病組、對照組。研究通過倫理委員會審批。SLE組患者包括男性5例，女性181例，年齡19～57歲，平均（35.7±9.6）歲；其他自身免疫疾病組患者包括干燥綜合征98例，類風濕性關節炎51例，混合性結締組織病11例，皮肌炎7例，多發性肌炎3例，其他13例，該組有男性13例，女性170例，年齡18～59歲，平均（39.4±7.6）歲；非自身免疫疾病組包括支氣管哮喘34例，肺炎12例，冠心病23例，肝硬化5例，消化道炎癥4例，該組有男性7例，女性71例，年齡18～69歲，平均（44.1±7.8）歲；對照組包括男性5例，女性45例，年齡20～53歲，平均（38.1±7.8）歲。各組受檢者基本資料（性別、年齡）可比（P＞0.05）。

附表1 兩種檢驗方案對各組患者抗dsDNA抗體陽性率的檢測結果對比[n(%)]

附表2 兩種檢驗方案在抗dsDNA抗體檢測上的診斷效能對比（%）

1.2 納入及排除標準 納入標準：①年齡≥18歲；②符合1997年SLE分類標準及相關疾病診斷；③受檢者知情同意。排除標準：①診斷未明者；②資料不全者；③中途退出研究者。

1.3 方法 所有對象均分別采用ELISA法和RIA法進行血清抗dsDNA抗體的檢測。抽取受檢者清晨空腹靜脈血5ml，3000r/min條件下離心15min，取血清保存于-80℃環境下待檢。ELISA法試劑盒由愛爾蘭Trinity Biotech公司提供，RIA法試劑盒由上海萬方金科生物科技有限公司提供。所有受試者血清樣本收集完成后，同時進行樣本抗dsDNA抗體水平的測定，實驗開始前將標本與試劑盒提前取出，待恢復室溫后開始試驗，過程嚴格按照試劑說明書進行，確保實驗環境、設備均符合檢驗要求。對比兩種檢驗方案在不同組別中的陽性率，對比兩種檢驗方案的診斷效能，并對兩種檢驗結果進行一致性分析。

1.4 統計學方法 所有數據均錄入SPSS23.0軟件進行處理，計數資料用%表示，組間、組內技術資料對比均用χ2，兩種檢驗方法的一致性分析采用Kappa檢驗，檢驗水平α=0.05。

2 結果

2.1 陽性率對比抗dsDNA抗體陽性率檢測結果顯示，RIA法檢測SLE組、其他自身免疫疾病組、非自身免疫疾病組、對照組的陽性率分別為47.3%、23.5%、1.3%、0，ELISA法檢測結果分別為62.9%、31.1%、0、0，兩種檢驗方案SLE組的陽性率均顯著高于其他組（P＜0.05），且ELISA檢出陽性率顯著高于RIA（P＜0.05）。見附表1。

2.2 診斷效能對比 診斷效能對比結果顯示，兩種檢驗方案在特異性、陽性預測值、陰性預測值對比上無顯著差異（P＞0.05），但ELISA法的敏感性為62.9%，顯著高于RIA法的47.3%，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見附表2。

2.3 一致性檢驗 RIA法檢測陽性例數132例，陰性例數365例，ELISA法檢測陽性例數174例，陰性例數323例，一致性檢驗結果顯示，兩種檢驗方案中度一致（Kappa系數=0.629）。

3 討論

上世紀60年代Ceppelini等人的研究首次發現SLE患者血清中的抗dsDNA抗體，在之后不斷的研究中，對抗dsDNA抗體的認識不斷加深，目前已經成為了SLE診斷的主要依據[4]。抗dsDNA抗體會隨著SLE患者疾病活動度進行浮動，因此不但能作為診斷依據，同時還可作為疾病評估、療效評估的重要依據。因此，選擇合適的方案進行抗dsDNA抗體的準確檢測，是十分必要的。RIA法和ELISA法都是臨床常用的抗dsDNA抗體檢測方案，從本次研究數據來看，兩種檢測方案對SLE患者的抗dsDNA抗體檢出率均顯著高于其他組別，這說明兩種方案對于自身免疫疾病的診斷均有一定的應用價值，尤其在SLE診斷上預警價值較高。在進一步的診斷效能對比上來看，兩種檢驗方案均有較高的特異性，但ELISA法的敏感性要明顯高于RIA法，這說明前者對SLE患者的抗dsDNA抗體檢測親和力較高，在篩查上有著更高的診斷價值。從一致性分析結果來看，兩種檢驗方案中度一致。本次的檢驗結果與Mahler等人的研究一致[5]，但也有學者研究結果顯示，RIA法在SLE患者抗dsDNA抗體檢測上敏感性要略高于ELISA法[6]，考慮原因可能受到樣本量及不同廠商試劑等因素的影響，還需要進一步深入研究。

綜上所述，兩種檢驗方案在SLE患者的抗dsDNA抗體檢測上均有較好效果，可幫助進行SLE病情活動情況的監測，ELISA法檢驗敏感性更好，更具有應用價值。