血清GP-2、hs-CRP、HMGB1聯合檢測在重癥胰腺炎早期診斷中的價值

周瑩 朱傳衛 張良 孫小虎

急性胰腺炎是臨床上常見的一種高發急腹癥，約80%患者病情較輕，主要表現為胰腺水腫，預后良好，另10%～20%病情嚴重患者，常繼發腹膜炎、休克、感染等，病死率較高屬于重癥急性胰腺炎[1]。近年來，隨著醫療技術進步，重癥急性胰腺炎的病死率有所降低，但由于其早期診斷缺乏靈敏、準確方法，預后仍較差[2]。因此，提高重癥急性胰腺炎早期診斷效率具有非常重要的臨床意義。已證實急性胰腺炎患者血清糖蛋白2(glycoprotein，GP-2)、超敏C-反應蛋白(hypersensitive c-reactive protein，hs-CRP)和高遷移率族蛋白B1(high mobility family protein B1，HMGB1)水平異常，與病情嚴重程度有關，在重癥急性胰腺炎診斷中具有一定的價值[3,4]。但三者聯合檢測是否能夠提高重癥急性胰腺炎的早期診斷效率尚不清楚，本研究分析重癥急性胰腺炎患者血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平，探討其聯合檢測在重癥急性胰腺炎早期診斷中的價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年3月至2019年6月在本院診治的99例急性胰腺炎患者作為研究對象，其中重癥胰腺炎50例(重癥組)，輕癥胰腺炎49例(輕癥組)。重癥組男31例，女19例；年齡55～76歲，平均年齡(64.53±9.86)歲；輕癥組男29例，女20例；年齡53～80歲，平均年齡(63.91±8.89)歲。另選同時期體檢各項生命體征均正常的45例健康者作為對照組，其中男27例，女18例；年齡50～80歲，平均年齡(65.04±10.13)歲。3組性別比、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P<0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標準 納入標準：(1)患者均符合《急性胰腺炎診治指南(2014)》中診斷標準[5]；(2)重癥組急性生理與慢性健康評分(APACHE-Ⅱ)≥8分；(3)受試者及其家屬對本研究知情并簽署知情同意書。排除標準：(1)急性腸梗阻、急性闌尾炎、消化道潰瘍穿孔、急性膽囊炎和膽石癥等急腹癥；(2)合并有糖尿病、高血壓等；(3)合并心、肝、腎等系統疾病；(4)長期服用糖皮質激素、利尿劑等；(5)患有肝硬化、慢性胰腺炎和惡性腫瘤；(6)患有血液系統疾病或自身免疫性疾病。本研究經宣城市中心醫院倫理委員會批準。

1.3 方法 采集患者入院第2天空腹時肘靜脈血5 ml，健康者體檢當日采集肘靜脈血5 ml，采集血樣均在3 h內，離心，分離血清保存。

1.3.1 指標檢測:取上述血清，采用DNM-9602酶標儀(北京普朗有限公司)檢測血清糖蛋白2(glycoprotein 2，GP2)水平；酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測高遷移率族蛋白B1(high mobility family protein B1，HMGB1)，人HMGB1 ELISA試劑盒來自于日本Shino Test公司；采用FS-112飛測Ⅱ(免疫熒光檢測儀，廣州萬孚生物技術股份有限公司)檢測血清超敏C反應蛋白(hypersensitive c-reactive protein，hs-CRP)水平。

1.3.2 疾病嚴重程度評估:①APACHE-Ⅱ評分[6]：該評分包括急性生理評分、慢性健康評分和年齡評分3部分，理論最高值71分，分值越高說明病情越嚴重。②Balthazar CT評分(CTSI)[7]：該評分包括CT評分5級：A級胰腺正常記0分，B級胰腺實質改變(局部或彌漫的胰腺腺體增大)記1分，C級胰腺實質改變及周圍炎癥、滲出記2分，D級胰腺周圍滲出明顯、胰腺內外出現單個液體積聚記3分，E級胰腺內外大量積液、出現胰腺膿腫、壞死記4分；③壞死評分4項：胰腺無壞死記0分，30%以下胰腺壞死記2分，30%～50%胰腺壞死記4分，50%以上胰腺壞死記6分。評分范圍0～10分，評分越高說明病情越嚴重。

2 結果

2.1 3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平 重癥組和輕癥組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于對照組(P<0.05)，重癥組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥組(P<0.05)，3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平比較

2.2 急性胰腺炎患者APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分 重癥組APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分均高于輕癥組，2組APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 急性胰腺炎不同分組患者APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分比較 分,

2.3 急性胰腺炎患者血清指標與病情評分的關系 急性胰腺炎患者血清GP-2與APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分分別呈顯著正相關關系(r=0.709、0.758，P=0.001、0.000)，血清hs-CRP與APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分分別呈顯著正相關關系(r=0.654、0.692，P=0.009、0.005)，血清HMGB1與APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分分別呈顯著正相關關系(r=0.791、0.819，P=0.000、0.000)。見表3。

表3 急性胰腺炎患者血清指標與病情評分的相關性分析

2.4 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨及聯合診斷重癥胰腺炎的效能 血清GP-2單獨診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.739，敏感性為64.81%，特異性為76.17%；血清hs-CRP單獨診斷重癥胰腺炎的ROCAUC為0.699，敏感性為56.92%，特異性為79.59%；血清HMGB1單獨診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.796，敏感性為66.67%，特異性為79.76%；血清GP-2、hs-CRP和HMGB1聯合診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.866，敏感性為76.47%，特異性為85.71%。聯合診斷的效能最高。見圖1，表4。

圖1 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨及聯合診斷重癥胰腺炎的ROC曲線

表4 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨及聯合診斷重癥胰腺炎的效能

3 討論

GP-2是胰腺酶原顆粒膜的主要成分之一，通過糖基-磷脂酰肌醇(GPI)在膜上固定，人類GP-2存在兩種亞型：GP-2a和GP-2t，胰腺正常分泌時，GP-2釋放進入胰導管，當胰腺發生急性炎癥時，局部結構被破壞，GP-2釋放進入血液導致血清GP-2水平升高[8]。Roggenbuck等[9]研究表明，急性胰腺炎患者血清GP2a和GP-2t水平均顯著升高，重癥患者顯著高于輕癥患者，提示GP2a對急性胰腺炎具有較高的診斷準確性。本研究結果，重癥組和輕癥組患者血清GP-2水平顯著高于對照組，重癥組血清GP-2水平顯著高于輕癥組，說明急性胰腺炎患者血清GP-2水平明顯升高，且在重癥患者中升高更加明顯。APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分是目前常見的用于急性胰腺炎病情嚴重程度評估的評分系統，對早期評估患者病情嚴重程度具有較高的準確性[10]。本研究對患者進行APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分，結果重癥組APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分均顯著高于輕癥組，相關性分析顯示，血清GP-2與APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分分別呈顯著正相關關系，說明血清GP-2與胰腺炎患者病情嚴重程度密切相關，病情越嚴重血清GP-2水平越高，與以往研究結果一致。進一度ROC曲線分析顯示，血清GP-2a單獨診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.739，敏感性為64.81%，特異性為76.17%，其診斷特異性較好但敏感性較差。

HMGB1是HMG家族中含量最多的一種核結合蛋白，遍布機體脾臟、肺、淋巴、胸腺等組織，由215個氨基酸組成，含有A-box和B-box 2個結合域，是多種疾病的生物標志物和藥物靶點[11]。正常生理條件下，HMGB1主要存在于細胞核和細胞膜，發揮促進核小體互動，基因轉錄、促進細胞遷移、軸突生長等作用[12]。而病理狀態下，機體受刺激后HMGB1由免疫細胞分泌到細胞外，另外受損或壞死細胞細胞核中HMGB1也被釋放到細胞外，參與免疫、炎癥、浸潤等病理過程[13]。研究表明，急性胰腺炎中炎性反應是通過胰腺酶原和核因子kB的細胞內活化引起的，其炎性反應可擴大至全身炎癥高反應綜合征(SIRS)和器官功能障礙[14]。近年來越來越多的研究表明，HMGB1參與并促進急性胰腺炎從局部炎癥到發生SIRS的過程，并對患者預后產生不良影響[15]。本研究結果，重癥組和輕癥組血清hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于對照組，重癥組血清hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥組，說明重癥急性胰腺炎患者血清hs-CRP和HMGB1水平明顯升高更加明顯，相關性分析顯示，血清hs-CRP、HMGB1與APACHE-Ⅱ評分和CTSI評分分別呈顯著正相關關系，說明血清血清hs-CRP、HMGB1與急性胰腺炎患者病情嚴重程度密切相關。

韓曉禹等[16]研究報道，血清CRP診斷急性胰腺炎的靈敏度為64.2%，特異度為86.5%。張亭等[17]研究報道，血清hs-CRP診斷重癥急性胰腺炎后期感染性胰腺壞死的敏感度為85.2%，特異度為82.6%，提示早期檢測血清hs-CRP對重癥急性胰腺炎后期感染性胰腺壞死具有較好的診斷價值，周小娜等[18]也有類似報道。本研究ROC曲線分析顯示，血清hs-CRP診斷重癥胰腺炎的敏感性為56.92%，特異性為79.59%，略低于前人研究，可能是因為檢測技術水平差異及病例較少。重癥急性胰腺炎血清HMGB1水平與患者腸黏膜屏障損害、腎功能損害、內皮細胞活化等并發癥密切相關[19]。嚴蘋等[20]研究報道，HMGB1診斷重癥急性胰腺炎的特異性達93.1%。本研究ROC曲線分析顯示，血清HMGB1診斷重癥胰腺炎的66.67%，特異性為79.76%，均高于GP-2和hs-CRP單獨檢測。本研究為進一步分析發現，三者聯合診斷重癥急性胰腺炎的敏感性為76.47%，特異性為85.71%，其診斷敏感性和特異性均升高。

綜上所述，重癥急性胰腺炎患者血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥患者，聯合檢測血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平能夠彌補單項檢測敏感性低的缺陷，提高診斷準確性，對病情作為準確判斷，有助于早期干預治療，降低患者病死率，改善預后。本研究不足之處在于樣本量較少，結果可能存在一定偏倚和局限，下一步將繼續擴大樣本深入探究。