樊玉萍 程雪絨 雷懷玉 鄭 蕾 楊淑惠 趙朝陽
(咸陽市農業科學研究院,陜西咸陽 712034)
平菇(Pleurotus ostreatus)又稱側耳、北風菌,分類學上屬真菌門、擔子菌綱、傘菌目、側耳科、側耳屬[1],是栽培較廣泛的一種食用菌。平菇營養豐富、味道鮮美,含有多種人體需要的多糖[2]、維生素、氨基酸,是一種低油脂、高蛋白的健康菌類,具有提高機體免疫力、抗疲勞、抗腫瘤、調節血糖等功效,深受消費者青睞,市場需求量也不斷增加。
栽培平菇一般采用固體菌種接種栽培袋。固體菌種制種時間較長,從母種到栽培種的培養時間需要50~60 d,而液體菌種具有生產周期短、菌種純度高、菌齡一致、萌發快、生產成本低等優點,在食用菌生產中具有廣闊的應用前景[3-5]。隨著食用菌工廠化生產的不斷發展,固體菌種很難滿足高效率生產對菌種的要求,液體菌種應用已成為必然的趨勢。因此,篩選優良的平菇液體菌種培養基配方具有一定的現實意義。
筆者進行了平菇液體菌種培養基配方比較試驗及液體菌種接種栽培袋出菇試驗,以期為平菇液體菌種規模化應用提供理論依據。
(1)供試菌株:平菇615,引自天達食用菌研究所。
(2)培養材料:瓊脂粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖、紅糖、馬鈴薯、麩皮、玉米粉、棉籽殼、木屑。
(3)試劑、儀器及培養容器:上海博訊實業有限公司醫療設備廠YXQ-LS-50SII 立式壓力蒸汽滅菌器、西安博奧儀器有限公司電子天平、上海博訊實業有限公司醫療設備廠SPX-150B-Z 生化培養箱、常州市瑞華儀器制造有限公司HY-5 A 調速振蕩器、上海博訊實業有限公司醫療設備廠SW-CJ-1CU超凈工作臺。
培養容器:1 000 mL 三角瓶、聚乙烯袋(規格為15 cm×30 cm×0.004 cm)。
配方1:玉米粉5 g,麩皮25 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方2:玉米粉10 g,麩皮20 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方3:玉米粉15 g,麩皮15 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方4:玉米粉20 g,麩皮10 g,紅 糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL;配方5:玉米粉25 g,麩皮5 g,紅糖7.5 g,葡萄糖5 g,蛋白胨0.75 g,磷酸二氫鉀0.75 g,硫酸鎂0.375 g,水+濾液500 mL。
1.3.1 液體菌種培養及測定方法
鍋中加入600 mL 水,水開后加麩皮,煮20 min,過濾,再加玉米粉煮5 min,4 層紗布過濾,濾液加其他輔料,再過濾,倒入量筒中添加水至500 mL。每個配方重復2 次,每個重復3 瓶,并于121 ℃高壓滅菌30 min。
滅菌結束后,待培養液溫度降至25 ℃以下時,于超凈工作臺上接種。每瓶接種1 cm2斜面菌種1塊,在25 ℃,150 r/min條件下培養7 d。
每瓶培養液取樣3次,分別測定菌球數量、菌球直徑及菌絲體干重,取平均值。
菌球平均數量測定:培養7 d 后取菌液5 mL,并倒入培養皿內,統計菌球數。計算出1 mL菌液中菌球個數,并計算平均值。
菌球平均直徑測定:隨機取10 個菌球,排成一行,測定其直徑,計算出單個菌球平均直徑。
菌絲體干重測定:取100 mL 菌液離心,倒去上清液,菌絲體于60 ℃烘干至恒重,稱重。
1.3.2 出菇試驗及考察方法
栽培袋裝料折干0.364 kg(配方:棉籽殼72%,木屑15%,麩皮10%,石灰3%,料含水量63.6%),于121 ℃高壓滅菌2 h,冷卻后接種。每袋接種量為25 mL,3 次重復,每個重復15 袋。接種后25 ℃恒溫箱培養,觀察記錄菌絲生長狀況和菌絲滿袋時間。
當菌絲長滿袋5~7 d 后,給予晝夜溫差催蕾出菇。出菇溫度18~24 ℃、空氣相對濕度85%~95%。每袋出菇4潮。
菌絲滿袋時間:從接種到菌絲滿袋所用時間的平均值;
袋平均產量:稱量4潮菇鮮重,計算平均值;

由表1 可以看出,配方3 和配方4 菌球大小均勻,菌球直徑中等,菌球形狀規則,配方3 菌球平均個數和菌絲體干重最高,菌球平均直徑適中;配方1菌球平均直徑最小,形狀不規則,菌球表面有長刺,菌絲體干重最小;配方2菌球形狀不規則,表面有長刺,菌球平均數量最少;配方5 菌球大小均勻,形狀規則,菌球平均直徑較小。

表1 供試液體菌種培養基中菌絲生長狀況

圖1 配方3培養的液體菌種
配方3 每毫升菌球平均個數為73.2,與其他配方差異顯著;配方2、配方3 的菌球平均直徑為2.19 mm、2.12 mm,與配方1、配方4、配方5 差異顯著;配方3 菌絲體干重為1.57 g/100 mL,與其他配方差異顯著。由此可見,從菌球平均個數及菌絲體干重考察,配方3 最佳,其次為配方4、配方5。因此,用配方3、配方4、配方5 培養的液體菌種接種栽培袋。
由表2 可知,配方3 液體菌種接種栽培袋的平均袋產量和生物轉化率最高;配方5 液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時間最短,平均袋產量及生物轉化率最低。

表2 3個配方培養的液體菌種接種栽培袋試驗結果
配方3、配方4液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時間與配方5 差異顯著;配方3 液體菌種接種栽培袋的平均產量最高,為0.512 g/袋、生物轉化率也最高,為140.7%,與配方4、配方5差異顯著。
配方3 培養的平菇液體菌種接種栽培袋效果最佳。
試驗結果表明:平菇615 菌株液體菌種最佳培養基配方為配方3,菌球數量多,菌絲體干重高,菌球大小均勻、形狀規則。配方3 培養的液體菌種接入栽培袋,平菇產量及生物轉化率最高。