Axin2在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義分析

文/黃深巧，凌夢(mèng)，舒玲，張少華

對(duì)于胰腺癌而言，其是十分普遍的消化系統(tǒng)性腫瘤，對(duì)患者的生命帶來(lái)了極大的威脅[1]。因?yàn)樵谠缙谌鄙傧鄳?yīng)的診斷方式，所以，許多胰腺癌患者在明確診斷后，已經(jīng)至晚期，喪失了進(jìn)行手術(shù)的機(jī)會(huì)，所以，臨床中對(duì)胰腺癌發(fā)生、進(jìn)展有關(guān)的分子機(jī)制進(jìn)行分析與研究，并找出在早期能夠評(píng)判診斷、預(yù)后的指標(biāo)均是十分關(guān)鍵的。本研究分析并研究了Axin2在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)。

1 對(duì)象及方法

1.1 對(duì)象

對(duì)具有較低表達(dá)Axin2中的人胰腺癌（PANC-1）細(xì)胞進(jìn)行分組，即為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、過(guò)表達(dá)組，對(duì)空白對(duì)照組沒(méi)有進(jìn)行轉(zhuǎn)染，對(duì)陰性對(duì)照組、過(guò)表達(dá)組就空質(zhì)粒、過(guò)表達(dá)Axin2質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染（具體圖1）。

1.2 方式

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染

借助具有10%的胎牛血清的DMEM對(duì)BxPC-3、PANC-1、Mia PaCa-2進(jìn)行培養(yǎng)；借助具有各類細(xì)胞因子的KSFM型培養(yǎng)基對(duì)H6C7進(jìn)行培養(yǎng)。間隔2d進(jìn)行一次換液，在得到70%-80%的融合后，借助胰蛋白酶消化傳代進(jìn)行之后的各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 QPCR

對(duì)細(xì)胞的總核糖核酸（RNA）進(jìn)行提取，借助紫外分光光度計(jì)對(duì)吸光值進(jìn)行檢測(cè)，以分析并研究RNA的總純度。借助1.5%的瓊脂糖電泳對(duì)RNA本身的完整性進(jìn)行檢測(cè)。反應(yīng)條件設(shè)定好在95℃，共10min，接著，95℃，共10s，60℃，共50s，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。處于酶鏈聚合反應(yīng)（PCR）儀中進(jìn)行相應(yīng)的反應(yīng)，在完成后，借助相配的軟件對(duì)其進(jìn)行研究與分析，得到產(chǎn)物的電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）值。借助2-△△ct值以對(duì)Axin2進(jìn)行表示。

1.3 觀察指標(biāo)

比較各個(gè)細(xì)胞株中Axin2表達(dá)、過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后QPCR檢測(cè)到Axin2表達(dá)、Axin2過(guò)表達(dá)對(duì)于PANC-1細(xì)胞增殖、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲影響。

1.4 數(shù)據(jù)分析處理

將本文數(shù)據(jù)一律輸入SPSS22.0這個(gè)軟件中統(tǒng)計(jì)處理，各類計(jì)量資料一律用（±s）來(lái)表示，組間差異性選擇t檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)說(shuō)明組間對(duì)比有意義。

2 結(jié)果

2.1 各個(gè)細(xì)胞株中Axin2表達(dá)

經(jīng)分析表一中的數(shù)據(jù)可知：發(fā)現(xiàn)H6C7中的Axin2較之于BxPC-3、Mia PaCa-2、PANC-1高，P＜0.05。見表1。

表1 各個(gè)細(xì)胞株中Axin2表達(dá)（±s）

表1 各個(gè)細(xì)胞株中Axin2表達(dá)（±s）

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2.2 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后QPCR檢測(cè)到Axin2表達(dá)

表2 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后QPCR檢測(cè)到Axin2表達(dá)（±s）

表2 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后QPCR檢測(cè)到Axin2表達(dá)（±s）

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表3 Axin2過(guò)表達(dá)對(duì)于PANC-1細(xì)胞增殖影響（±s）

表3 Axin2過(guò)表達(dá)對(duì)于PANC-1細(xì)胞增殖影響（±s）

?

經(jīng)分析表二中的數(shù)據(jù)可知：發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)組的Axin2較之于空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組高，P＜0.05。見表2。

2.3 Axin2過(guò)表達(dá)對(duì)于PANC-1細(xì)胞增殖影響

經(jīng)分析表三中的數(shù)據(jù)可知：發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)組的總增殖率較之于空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組低，P＜0.05。見表3。

2.4 Axin2過(guò)表達(dá)對(duì)于PANC-1細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲影響

發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)組的細(xì)胞侵襲能力、遷移能力較之于空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組低，P＜0.05。

3 討論

近幾年，胰腺癌總的發(fā)生率逐步升高。在本次研究中，借助QPCR進(jìn)行檢測(cè)，Axin2處于不同侵襲能力的細(xì)胞中，其表達(dá)較之于正常胰腺細(xì)胞低，這就證明了Axin2處于胰腺癌細(xì)胞中是一種抑癌基因。Axin2表達(dá)是伴隨了Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路所處的激活狀態(tài)而發(fā)生改變的，其在胰腺癌細(xì)胞中具有較低的表達(dá)，使得β-catenin表達(dá)的穩(wěn)定性有所降低，最終，腫瘤細(xì)胞發(fā)生了增殖、分化。

綜上所述，Axin2在胰腺癌細(xì)胞株中較之于正常胰腺細(xì)胞低，在具有更高侵襲能力的癌細(xì)胞株中具有更低的表達(dá)，其本身具有抑癌基因的作用。