不同臨床特征乳腺癌患者血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平表達及臨床意義

施靜　周春龍　張海霞　歐雪峰　曾錦婷　張燕　孔秀平

【摘要】 目的：了解不同臨床特征乳腺癌患者血清中血管內皮細胞生長因子（VEGF）、VitD、鐵蛋白（SF）、趨化因子20（CCL20）及結締組織生長因子（CTGF）水平表達情況，并探討其臨床意義。方法：選擇2018年7月-2020年4月在深圳市寶安區福永人民醫院和龍華區人民醫院婦產科確診為乳腺癌的103例患者作為乳腺癌組，89例乳腺良性腫瘤患者作為乳腺良性腫瘤組，同時選取120名健康體檢者作為對照組。分別比較三組血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平;比較乳腺癌組中不同臨床特征者VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平，并分析各指標間的相關性。結果：乳腺癌組血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均高于乳腺良性腫瘤組和對照組，而VitD水平明顯低于乳腺良性腫瘤組和對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。乳腺良性腫瘤組SF和CTGF水平均高于對照組（P<0.05）;Ⅲ、Ⅳ期和癌瘤長徑>5 cm、有淋巴結轉移及中、低度組織分化的乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平明顯更高，而VitD水平更低（P<0.05）。乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平兩兩之間均呈正相關，而VitD水平與各指標均呈負相關（P<0.05）。結論：乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平明顯升高，而VitD水平明顯降低，且與乳腺癌的臨床分期、癌瘤長徑、是否有淋巴結轉移及組織分化嚴重程度有關。因此，加強VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平檢測對乳腺癌的早期診斷及不同臨床特征分析具有一定的參考價值。

【關鍵詞】 乳腺癌 血管內皮細胞生長因子 VitD 鐵蛋白 趨化因子20 結締組織生長因子

[Abstract] Objective： To investigate the expression levels of vascular endothelial cell growth factor （VEGF）， VitD， ferritin （SF）， chemokine 20 （CCL20） and connective tissue growth factor （CTGF） in serum of breast cancer patients with different clinical characteristics， and to explore their clinical significance. Method： A total of 103 patients diagnosed with breast cancer in the department of obstetrics and gynecology of Shenzhen Baoan District Fuyong Peoples Hospital and Longhua District Peoples Hospital from July 2018 to April 2020 were selected as the breast cancer group， and 89 patients with benign breast tumor were selected as the breast cancer group. Meanwhile， 120 healthy subjects were selected as the control group. The levels of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF in serum of the three groups were compared. The levels of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer group with different clinical characteristics were compared， and the correlation among the indicators was analyzed. Result： The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer group were higher than those in benign breast tumor group and control group， while the level of VitD was significantly lower than those in benign breast tumor group and control group， with statistical significance （P<0.05）. The levels of SF and CTGF in benign breast tumor group were higher than those in control group （P<0.05）. The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF were significantly higher and the level of VitD was lower in the breast cancer patients with Ⅲ and Ⅳ stage， >5 cm tumor length and diameter， lymph node metastasis and moderate and low tissue differentiation （P<0.05）. The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer patients were positively correlated with each other， while the level of VitD was negatively correlated with each index （P<0.05）. Conclusion： The levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in serum of breast cancer patients are significantly increased， while the level of VitD is significantly decreased， which are related to the clinical stage of breast cancer， tumor length and diameter， lymph node metastasis and the severity of tissue differentiation. Therefore， strengthening the detection of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF levels have certain reference value for the early diagnosis of breast cancer and the analysis of different clinical characteristics.

[Key words] Breast cancer VEGF VitD SF CCL20 CTGF

First-authors address： Shenzhen Baoan District Fuyong Peoples Hospital， Shenzhen 518103， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.002

乳腺癌是臨床上目前最為常見的一種女性惡性腫瘤之一，其發病率呈逐年上升趨勢，且不斷年輕化，嚴重影響女性身心健康和生活質量[1-3]。乳腺癌發病病因及機制目前尚未完全明確，有研究表明，乳腺癌發病可能與種族、年齡、遺傳、飲食結構及激素水平等多種因素[4-5]。乳腺癌患者致死的主要原因是癌細胞的浸潤和轉移，而癌細胞的浸潤和轉移與腫瘤細胞的惡性增生、組織新生血管的形成、黏附、遷移及分泌蛋白降解基質等多種因素的調控有關[6-8]。為此，本研究對與癌細胞的增殖、分化、新生血管生成、慢性炎癥及組織纖維化等有關的血管內皮細胞生長因子（VEGF）、VitD、鐵蛋白（SF）、趨化因子20（CCL20）及結締組織生長因子（CTGF）水平在乳腺癌患者中的表達情況及臨床意義進行了探討，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年7月-2020年4月在深圳市寶安區福永人民醫院和龍華區人民醫院婦產科確診為乳腺癌的103例患者作為乳腺癌組，89例確診為乳腺良性腫瘤患者作為乳腺良性腫瘤組，另選取120名健康體檢者為對照組。納入標準：女性;臨床資料完整;乳腺癌組與乳腺良性腫瘤組均經臨床體征、影像學檢查及術后組織學活檢確診[9]，均為初次確診;未進行放、化療及相關性治療;未服用VitD補充劑及鈣調節劑。排除標準：伴有心、腦、肝及腎等嚴重疾病者;出血性疾病者;伴有其他腫瘤者;精神疾病及不配合研究患者。所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 標本采集及處理 清晨空腹抽取2份靜脈血，每份3～5 mL，室溫靜置30 min后離心分離血清及時檢測，不能及時檢測者置-20 ℃保存。冰凍標本取出后須室溫放置30 min，待其完全復溶后才能再行檢測。

1.2.2 VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平檢

測 VEGF、CCL20及CTGF水平采用酶聯免疫吸附法（ELISA法）進行檢測，VitD和SF水平分別采用電化學發光免疫法和免疫比濁法對進行檢測。所有操作均嚴格按儀器及試劑說明書進行，確保檢測結果的準確性和一致性。

1.3 觀察指標 （1）比較三組VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平。（2）比較乳腺癌組中不同臨床分期、不同癌瘤長徑、是否有淋巴結轉移及不同組織分化程度者的VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平。（3）分析乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF各水平之間的相關性及VitD與各指標的相關性。

1.4 統計學處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用方差分析;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。相關性采用Pearson相關系數分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組一般資料比較 乳腺癌組年齡29～62歲，平均（43.85±12.54）歲。臨床分期：Ⅰ、Ⅱ期72例，Ⅲ、Ⅳ期31例;癌瘤長徑：>5 cm 27例，2～5 cm 37例，<2 cm 29例;有淋巴結轉移38例，無淋巴結轉移65例;高組織分化77例，中、低度組織分化26例。乳腺良性腫瘤組年齡28～60歲，平均（42.37±11.93）歲，對照組年齡27～63歲，平均（41.86±14.62）歲。三組年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 三組VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平比較 乳腺癌組VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均高于乳腺良性腫瘤組和對照組，而VitD水平明顯低于乳腺良性腫瘤組和對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。乳腺良性腫瘤組SF和CTGF水平均高于對照組，差異均有統計學意義（t=3.915 3、5.354 7，P<0.05），而VEGF、VitD、CCL20兩組間比較，差異均無統計學意義（t=1.884 4、1.206 4、0.526 1，P>0.05）。見表1。

2.3 乳腺癌組中不同臨床特征者VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平比較 Ⅲ、Ⅳ期和癌瘤長徑>5 cm、有淋巴結轉移及中、低度組織分化的乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均明顯更高，而VitD水平更低，差異均有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.4 乳腺癌患者VEGF、SF、CCL20、CTGF及VitD水平之間的相關性分析 乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF各水平之間均呈正相關，而VitD水平與各指標水平之間均呈負相關（P<0.05），見表3。

3 討論

乳腺癌是女性高發、高度異質的一種全身性惡性腫瘤，發病率高，居女性婦科惡性腫瘤的首位，嚴重威脅婦女身心健康甚至危及生命，是導致女性死亡的主要原因之一[10-11]。及早發現和早期確診乳腺癌患者，并及時采用有效的治療措施，是提高乳腺癌患者療效和術后生活質量的關鍵。因此，探索乳腺癌、乳腺良性腫瘤及健康人群中某些生化指標和/或免疫標記物水平表達情況，對乳腺癌患者早發現、早確診和及時治療具有重要的臨床意義。

VEGF是由腫瘤細胞所分泌的一種分泌性二聚體糖蛋白，常高表達于各種腫瘤細胞中，與其受體結合后可刺激血管內皮增生，從而導致新生血管不斷形成，為腫瘤細胞提供足夠的營養，促進腫瘤細胞增殖和轉移。有研究表明，乳腺癌患者VEGF水平升高，且臨床分期越差，VEGF升高越明顯[11-13]。本研究結果顯示，乳腺癌患者VEGF水平明顯升高，且臨床分期越差、癌瘤長徑>5 cm、有淋巴結轉移及組織中、低度分化的乳腺癌患者VEGF水平更高（P<0.05），與有關研究報道基本一致[11，13]，這表明VEGF可能與乳腺癌發生、發展、侵襲及轉移有密切相關。

VitD是一種脂溶性的類固醇衍生物，其除了具有調節血清鈣、磷水平相對穩定和骨代謝生物活性外，還具有維持免疫、神經及肌肉的正常功能。另外，VitD還可誘導細胞凋亡、刺激細胞分化、抑制腫瘤增殖、調節免疫系統、抑制炎癥、侵襲、轉移及抗血管生成[14-15]。近年研究發現，25-（OH）D3與VitD受體（VDR）結合相互作用具有抗癌功能[16-17]。本研究結果顯示，乳腺癌患者血清中VitD水平明顯降低，且Ⅲ、Ⅳ期、癌瘤長徑>5 cm、有淋巴結轉移及中、低度組織分化的乳腺癌患者VitD水平更低（P<0.05），這說明乳腺癌的發生、發展可能與體內VitD水平降低有關，可能與VitD的缺乏導致T淋巴細胞細胞亞群數目及功能紊亂，使得機體的免疫功能下降，促進乳腺癌的發生和發展有關，具體作用機制有待進一步深入研究[17-18]。

SF是人體內貯存鐵的一種可溶組織蛋白，主要參與機體的鐵代謝。有研究表明，惡性腫瘤能促進SF異構體的合成和分泌，從而導致血清SF水平顯著升高[6，10，19]。本研究結果顯示，乳腺癌患者血清中SF水平明顯升高（P<0.05），且升高幅度與乳腺癌患者臨床分期、淋巴結轉移情況、癌瘤長徑及組織分化程度等密切相關，乳腺良性腫瘤組SF高于對照組（P<0.05），與文獻[6，10，19]報道一致，這表明高水平的SF可能與乳腺癌有關，輕度升高時要注意排除乳腺良性腫瘤。

趨化因子是一種分泌性小分子蛋白，可通過聚集內皮細胞、促進血管發生及促進腫瘤細胞侵襲性等方式促進腫瘤細胞的增殖及轉移，與炎癥和腫瘤疾病的發生、發展有著密切聯系。其中CCL20是趨化因子大家族中的一員，可趨化淋巴和中性粒細胞，與多種惡性腫瘤的侵襲和轉移有密切相關[20-21]。本研究結果顯示，乳腺癌組血清中CCL20水平明顯高于乳腺良性腫瘤和對照組（P<0.05），且與乳腺癌患者高風險的臨床特征有關，臨床特征越差，CCL20水平升高越明顯，表明乳腺癌患者可能容易造成炎癥反應，促進腫瘤細胞增殖及遷移，加速乳腺癌的發展進程。

CTGF是一種細胞間基質蛋白，具有刺激成纖維細胞增殖與分化、介導多種腫瘤細胞黏附、遷移及凋亡，促進新生血管的生成及組織纖維化，有研究結果表明，CTGF與多種惡性腫瘤的發生和發展有密切關系[22-23]。本研究結果顯示，乳腺癌患者血清中CTGF水平明顯高于乳腺良性腫瘤組和對照組，且乳腺良性腫瘤組高于對照組（P<0.05），這表明CTGF可能與乳腺癌的發生、發展及組織纖維化有關，但輕度升高時要結合其他指標進行綜合性判斷，注意與乳腺良性腫瘤進行鑒別。

綜上所述，乳腺癌患者容易新生成腫瘤血管，引發炎癥，出現纖維化，為腫瘤細胞的增殖及遷移創造條件。因此，加強乳腺癌患者血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平檢測，對及時篩查、早期診斷、判斷病情和組織分化程度及有無淋巴結轉移具有一定的臨床意義，值得臨床推廣應用。

參考文獻

[1]李佳圓.中國乳腺癌危險因素研究現況及其風險預測模型研究展望[J].中國循證醫學雜志，2020，20（7）：745-748.

[2]朱云峰，沈永洲，王樂，等.浙江省海寧市1977-2016年女性乳腺癌發病分析[J].中國腫瘤，2020，29（8）：592-595.

[3] de La Puente-Yagüe M，Cuadrado-Cenzual M A，Ciudad-Caba?as M J，et al.Vitamin D：and its role in Breast cancer[J].Kaohsiung J Med Sci，2018，34（8）：423-427.

[4]鄒華偉，王玉強.IRS-1與IRS-2在乳腺癌組織中的表達及與其臨床病理特征和預后的關系[J].實用癌癥雜志，2020，35（1）：53-56，65.

[5]趙若晗，史嘉翊，劉馨璥，等.CDK1、CENPT和P53在乳腺癌中的表達及意義[J].中國醫學創新，2020，17（9）：28-31.

[6]楊文蔚，王志恒，岳朝艷.乳腺癌患者血清CA153、CEA、鐵蛋白和降鈣素水平的變化及臨床意義[J].檢驗醫學，2017，32（4）：308-310.

[7]葉紹兵，王家瑞，劉高，等.乳腺癌患者有關輔助診療、血管生成、炎癥趨化及纖維化作用的表達水平分析[J].湖南師范大學學報（醫學版），2019，16（5）：25-28.

[8]韓赫林，李義強，崔格格，等.乳腺癌中Ulk1過表達與患者TNM分期和癌癥復發的關系研究[J].中國醫學創新，2019，16（14）：149-152.

[9]江澤飛，李健斌.乳腺癌診療指南和臨床實踐歷程[J].中華外科雜志，2020，58（2）：85-90.

[10]梁奮莉，曹培龍，曹偉，等.腫瘤浸潤淋巴細胞對不同分子亞型乳腺癌預后效應的研究進展[J].現代腫瘤醫學，2020，28（16）：2894-2897.

[11]和麗麗.血清VEGF、FGF聯合乳腺超聲診斷乳腺癌的價值[J].河南醫學研究，2019，28（21）：3975-3977.

[12]李曉鋒，劉希，汪園園，等.血管內皮細胞生長因子在不同BMI乳腺癌患者中的表達及其對預后的影響[J].河北醫學，2019，25（9）：1493-1496.

[13]王陽，賈國叢，常慶龍，等.VEGF在乳腺癌中的表達及其與病理指標的相關性[J].實用癌癥雜志，2020，35（2）：192-195.

[14] Yao S，Kwan M L，Ergas I J，et al.Association of serum level of vitamin D at diagnosis with breast cancer survival：a case-cohort analysis in the pathways study[J].JAMA Oncol，2017，3（3）：351-357.

[15]梁歡，征宗梅，楊學攀，等.維生素D對乳腺癌細胞及乳腺癌干細胞凋亡的影響[J].現代腫瘤醫學，2020，28（6）：877-882.

[16] de Sousa Almeida-Filho B，De Luca Vespoli H，Pessoa E C，et al.Vitamin D deficiency is associated with poor breast cancer prognostic features in postmenopausal women[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2017，174：284-289.

[17]殷雋逸，王雅靈，胡海燕.VitD/VDR與乳腺癌患者免疫狀態、臨床特征及預后的相關性研究[J].中國癌癥雜志，2019，29（5）：372-378.

[18] Sassi F，Tamone C，DAmelio P.Vitamin D：nutrient，hormone，and immunomodulator[J/OL].Nutrients，2018，10（11）：E1656.

[19]徐書星，霍慶赟，張明遠，等.血清CA153、CEA、SF、CT及Hcy聯合檢測對乳腺癌的臨床診斷價值[J].分子診斷與治療雜志，2020，12（2）：190-194.

[20] Lee S K，Park K K，Kim H J，et al.Human antigen R-regulated CCL20 contributes to osteolytic breast cancer bone metastasis[J].Sci Rep，2017，7（1）：9610.

[21]程先碩，楊芳，董堅，等.CCL20通過AKT/MMP3軸而非EMT途徑誘導結腸癌SW480細胞的侵襲和轉移[J].中國腫瘤生物治療雜志，2019，26（6）：650-655.

[22]彭浩，宋立偉，周正，等.乳腺癌患者血清CTGF、Six1水平觀察[J].山東醫藥，2016，56（23）：27-30.

[23]李海燕，李玉娟，曹淑琴，等.乳腺癌患者血清炎性因子、CTGF、Six1水平及臨床意義分析[J/OL].中國醫學前沿雜志（電子版），2017，9（9）：101-104.

（收稿日期：2020-08-27） （本文編輯：田婧）