藏藥七味螃蟹甲丸的定性薄層色譜鑒別研究

土旦卓瑪，聶麗娟，劉艷霞，張勇倉

(西藏大學醫(yī)學院，西藏 拉薩 850000)

0 引言

藏藥七味螃蟹甲丸是藏醫(yī)治療高原地區(qū)肺臟疾病的常用藥，始載于《四部醫(yī)典》，具有清熱解毒，消炎止咳等功效，用于感冒咳嗽，氣管炎，喑啞。本品為棕黃色水丸；氣微；味甜、澀，其藥方組成包括叢菔、螃蟹甲、訶子(去核)、甘草、丁香、檀香、石灰華，其螃蟹甲、石灰華清胸熱、鎮(zhèn)咳、消炎癥；甘草、叢菔清肺止咳、祛痰；訶子、丁香調(diào)藥性及三因。目前藏藥七味螃蟹甲丸的處方中螃蟹甲(拉丁名PhlomisyounghusbandiiMukerj.)、叢菔(拉丁名Solms-Laubachiaeurycarpa (Mazim.) Botsch.)、訶子(拉丁名Terminalia chebula Retz.)沒有定性TLC 鑒別，為保證制劑臨床應用的安全性、有效性、穩(wěn)定性、均一性，因此本文建立了針對上述藥材的薄層色譜鑒別方法。在定性薄層色譜中均能檢測出螃蟹甲、叢菔、訶子三味藥材，薄層色譜斑點清晰，陰性對照溶液無干擾[1-2]。本文所建立的方法簡單、準確、專屬性強，可用于藏藥七味螃蟹甲丸的質(zhì)量控制[3-8]。本文的研究為該制劑質(zhì)量標準的建立提供了較為可靠的依據(jù)[9]。

1 儀器與材料

1.1 儀器

FA2004B 分析天平：上海精密科學儀器有限公司。DK-600D 電子數(shù)碼超聲波清洗機(得康超聲)，恒溫干燥箱DHG-9240：上海科析儀器成套公司。ZF-2 型三用紫外分析儀：上海市安亭電子儀器廠。

1.2 材料

沒食子酸對照品(中國食品藥品檢定研究院110831-201906)，精氨酸對照品(中國食品藥品檢定研究院140685-201707)，螃蟹甲對照藥材(中國食品藥品檢定研究院121407-200401)，硅膠板：規(guī)格50mm×100mm，厚度0.20-0.25mm，青島中科宏遠工貿(mào)有限公司，高效多功能粉碎機800Y：武義海納電器有限公司，化學試劑乙醇、甲醇等均購自成西藏寶信生物技術(shù)有限公司。藏藥七味螃蟹甲丸(批號：20213)購自西藏自治區(qū)藏醫(yī)院，配制陰性樣品的七種藥材均購自西藏亞郎藏藥材銷售有限公司。

2 薄層色譜法鑒別

2.1 螃蟹甲的薄層色譜

2.1.1 供試品溶液的制備

取本品3g，研碎，加乙醇10mL，加熱回流30 分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣以乙醇1mL 溶解后作為供試品溶液。

2.1.2 對照藥品溶液的制備

取批號為121407-200401 螃蟹甲對照藥材1g，加乙醇10mL，同法制成對照藥材溶液。

2.1.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺螃蟹甲的陰性藥材3g，采用相同的方法制成缺螃蟹甲的陰性樣品溶液。

2.1.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國藥典》2015 年版一部附錄VIB)試驗，分別吸取供試品、對照品溶液、缺螃蟹甲陰性樣品溶液各5-10μL 點于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(12 ∶8)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同的一藍色主斑點并且無陰性干擾。結(jié)果見圖1。

2.2 叢菔的薄層色譜

2.2.1 供試品溶液的制備

取本品粉末0.5g，加入20mL 稀乙醇，超聲處理30 min，過濾，蒸干濾液，殘渣用稀乙醇溶解并定容至1mL，即得供試品溶液。

2.2.2 對照藥品溶液的制備

另取批號為140685-201707 精氨酸對照品，加稀乙醇制成0.04mg·mL 對照品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺叢菔的陰性藥材0.5g，采用相同的方法制成缺叢菔的陰性樣品溶液。

2.2.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國藥典》2015 年版一部附錄ⅥB)試驗，分別吸取供試品、對照品溶液、缺叢菔陰性樣品溶液各5-10μL點于同一硅膠G 薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8 ∶8 ∶6)為展開劑，展開、晾干，噴以茚三酮試液，加熱至斑點顯色清晰。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位上，顯相同櫻紅色的斑點，缺叢菔的陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖2。

圖1 螃蟹甲TLC 鑒別

圖2 叢菔TLC 鑒別

2.3 訶子的薄層色譜

2.3.1 供試品溶液的制備

取本品粉末2g,加甲醇10mL,超聲處理30 分鐘，濾過處理后，水浴上蒸干，殘渣以乙醇1mL 溶解后作為供試品溶液。

2.3.2 對照藥品溶液的制備

另取批號為110831-201906 沒食子酸對照品，加乙醇制成0.5mg/mL 對照品溶液。

2.3.3 陰性樣品溶液的制備

再取缺訶子的陰性藥材2g，采用相同的方法制成缺訶子的陰性樣品溶液。

2.3.4 薄層條件及結(jié)果

照薄層色譜法(《中國藥典》2015 年版一部附錄ⅥB)試驗，分別吸取供試品、對照品缺訶子陰性樣品各5μL，點于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(12 ∶8 ∶2)為展開劑，展開、晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇試液。置于紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，而訶子的陰性樣品無干擾。結(jié)果見圖3。

圖3 訶子TLC 鑒別

3 結(jié)論

本文研究主要采用薄層色譜方法對藏藥七味螃蟹甲丸的處方中螃蟹甲、叢菔、訶子藥材進行定性薄層色譜鑒別。所建立的方法重現(xiàn)性好、可操作性強。實驗表明，在薄層層析之前薄層板應進行預飽和，以防止斑點的擴散及產(chǎn)生邊緣效應，從而達到更好的分離效果。通過TLC 實驗，制定了螃蟹甲、叢菔、訶子藥材的薄層色譜鑒別方法，特征斑點明顯，色譜分離清晰，可用作制劑中的螃蟹甲、叢菔、訶子專屬定性鑒別。本研究結(jié)果表明，該質(zhì)量標準與制劑相關(guān)規(guī)定相符[10]，為藏藥七味螃蟹甲丸提供了既簡便又有效的質(zhì)量控制方法。