NCAM、CEA及caspase-3在甲狀腺髓樣癌中的表達及臨床價值

陳澎濤 鄒華偉 丁 華

甲狀腺癌發病率約占全身惡性腫瘤的1%左右，按照病理類型可分為甲狀腺乳頭狀癌、甲狀腺濾泡狀癌、甲狀腺髓樣癌和未分化癌四大類，其中甲狀腺髓樣癌是甲狀腺癌中較為少見的病理類型，發病率占甲狀腺惡性腫瘤的3%～5%，50歲以上人群為高發群體，病死率約占甲狀腺癌的13.4%[1-4]。NCAM、CEA和caspase-3都是臨床上較為常用的惡性腫瘤鑒別指標，在諸如胃癌、大腸癌等疾患的鑒別診斷中經臨床驗證具有較高的準確性[5-6]。本研究旨在分析NCAM、CEA和caspase-3的表達在甲狀腺髓樣癌中的臨床價值，現詳述如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2020年1月于我院接受治療的82例甲狀腺髓樣癌患者為實驗組，另選取同期于我院接受治療的41例良性甲狀腺病變組織為對照組。

納入標準：①入組對象有完整的病理學和免疫組織化學資料；②實驗組患者均經病理學檢測確診為甲狀腺髓樣癌；③意識清晰能夠配合進行調研；④調研報醫院倫理學會批準實施；⑤患者或其家屬簽署知情同意書。排除標準：①合并精神疾患者；②非原發甲狀腺疾病患者；③術前接受放化療或免疫治療者；④依從性較差者。

1.2 干預方法

分別采集實驗組和對照組甲狀腺病變組織，使用石蠟包埋后實施常規HE染色，而后切片并采用免疫組化檢測分析2組患者NCAM和caspase-3的染色情況；同時采集2組患者血清并使用羅氏Modular Analytics E170全自動化學免疫發光分析儀對2組患者血清CEA水平進行檢測(正常水平為<5 ng/ml)。

1.3 觀察指標及評測標準

觀察指標為實驗組與對照組患者甲狀腺病變組織中NCAM和caspase-3的表達情況，以及血清CEA水平，其中NCAM和caspase-3的表達由兩位資深病理醫師在雙盲條件下閱片，免疫組化結果參照相關文獻進行計算[7-8]，著色細胞百分比評分標準如下：著色細胞占總細胞數≤5%為0分，>5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%為3分；細胞著色強度評分標準如下：胞質或胞核不染色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；結果判定標準如下：著色細胞占比×著色強度得分0～1分為陰性(-)，得分2～3分代表弱陽性(+)，得分4～6分代表陽性(++)，得分6分以上代表強陽性(+++)。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 2組患者一般臨床資料差異性比較

經比較發現，2組患者一般臨床指標諸如性別、平均年齡、平均體重、受教育程度、婚姻狀態等比較差異不具有統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1所示。

2.2 2組患者組織NCAM表達差異性比較

實驗組患者甲狀腺髓樣癌組織中NCAM陽性表達率為4.88%(4/82)，對照組患者甲狀腺病變組織中NCAM陽性表達率87.80%(36/41)，組間比較差異明顯(χ2=85.655,P<0.001)，見表2。

表1 2組患者一般臨床指標比較例)

表2 2組患者NCAM表達差異性比較/例

2.3 2組患者CEA水平差異性比較

經檢測發現，實驗組患者血清CEA平均水平為(15.33±2.31)ng/ml，對照組患者血清CEA水平為(5.21±0.31)ng/ml，2組患者組間比較差異明顯(t=36.132，P<0.001)。

2.4 2組患者組織caspase-3表達差異性分析

經免疫組化分析發現，實驗組患者中caspase-3表達陽性率為24.39%(20/82)，對照組患者中caspase-3表達陽性率為78.05%(32/41)，2組比較差異明顯(χ2=32.249,P<0.001)，見表3。

表3 2組患者caspase-3表達差異性比較/例

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2.5 NCAM、caspase-3、CEA表達與甲狀腺髓樣癌臨床病理特征的關系分析

經分析發現，NCAM、caspase-3、CEA的表達與甲狀腺髓樣癌患者的性別、年齡、是否雙側均無明顯的相關性(P>0.05)，而與淋巴結轉移和TNM分期存在一定的關聯(P<0.05)，見表4。

表4 NCAM caspase-3、CEA表達與甲狀腺髓樣癌臨床病理特征關系分析/例

3 討論

甲狀腺髓樣癌是一種起源于產降鈣素的甲狀腺濾泡旁(C細胞)的神經內分泌腫瘤，最早于1959年被學者Hazard和Crile描述，臨床調研顯示，甲狀腺髓樣癌雖然不具有濾泡組織，但具有高度淋巴結轉移特性，是實體甲狀腺惡性腫瘤之一，占全部甲狀腺癌的3%～5%[9-10]。甲狀腺髓樣癌的惡性程度介于分化型和未分化型，男女發病率相當，該病雖然發病率較低，但惡性程度較高，且容易出現腺外侵犯、區域淋巴結和遠隔臟器(如肺、肝臟等)轉移，故而預后往往較差，恰當的早期干預對改善甲狀腺髓樣癌患者預后具有重要意義[11-12]。傳統甲狀腺髓樣癌的鑒別診斷方式主要依賴組織病理學、影像學等，臨床實踐發現，組織病理學檢測雖然屬金標準，但存在檢測周期長、檢測費用高、有創操作、可重復性低等不足，部分患者難以耐受，影像學檢測雖然較為快速，但受個體因素影響較大，易出現較大的誤差，從而影響后續治療方案的確定[13-14]。隨著近些年分子生物學的發展，越來越多的實驗室標志物被應用于惡性腫瘤的鑒別診斷以及預后判斷中。

本研究通過設立不同分組的方式，就NCAM、CEA以及caspase-3的表達在甲狀腺髓樣癌中的臨床價值進行了分析，結果顯示，相比于良性病變甲狀腺組織，甲狀腺髓樣癌組織的NCAM和caspase-3表達陽性率明顯更低，CEA水平明顯更高，組間差異明顯。本文作者分析認為，NCAM屬于免疫球蛋白超家族的一種，廣泛存在于神經外胚層的細胞以及組織中，臨床研究發現NCAM對于腫瘤細胞的遷移以及腫瘤相關淋巴管的形成會產生明顯影響，有研究結果顯示甲狀腺乳頭癌組織中NCAM表達呈陰性，而在除癌變組織外的良性病變及正常組織中表達呈陽性，特異度接近100%[15]。另有研究指出，NCAM在甲狀腺正常組織以及良性病變組織中高表達，但在甲狀腺癌組織中低表達，這與本文結果類似[16]。CEA已經被多項研究證實同惡性腫瘤的發生發展存在密切相關性，同時還有研究指出CEA的水平與惡性腫瘤的病理分期、淋巴結轉移等密切相關[17]，與本文研究結果一致。caspase-3屬于caspase家族的一種，caspase家族在細胞的凋亡進程中能夠發揮截斷凋亡細胞與周圍細胞聯系的作用，具有阻止凋亡細胞DNA修復、徹底破壞核結構、誘導細胞凋亡的效果，caspase-3又被稱為半胱氨酸蛋白酶32，在細胞凋亡過程中占據核心地位，又被稱為“死亡執行蛋白酶”，具有促凋亡的作用[18-20]。本文中研究組患者caspase-3表達陽性率為24.39%，遠低于對照組的78.05%，分析其原因為惡性腫瘤細胞具有高度增殖特性，其特點就是細胞失去或減弱凋亡能力，無限制的增生浸潤，凋亡率顯著低于正常細胞，因而caspase-3的表達會出現顯著降低。

本研究還就NCAM、CEA以及caspase-3的表達與甲狀腺髓樣癌的臨床病理特征進行了相關性分析，結果顯示淋巴結轉移和TNM分期與NCAM、CEA以及caspase-3的表達呈現明顯的相關性，淋巴結出現轉移、TNM分期升高的甲狀腺髓樣癌患者NCAM以及caspase-3的表達水平更低，CEA水平更高，分析其原因也與上文結果類似，NCAM的低表達促進了腫瘤細胞的遷移增殖，而caspase-3的低表達降低了腫瘤細胞的凋亡率，因而甲狀腺髓樣癌患者出現了更高的淋巴結轉移率，以及更高的臨床TNM分期。

綜上所述，NCAM和caspase-3在甲狀腺髓樣癌組織中呈現明顯低表達態，CEA水平明顯增高，同時臨床病理特征分析顯示NCAM、caspase-3的低表達和CEA的異常高水平與淋巴結轉移與TNM分期相關。