乳腺癌組織中Cath-D、c-erbB-2的表達及其與腫瘤標志物水平、淋巴結轉移的相關性

齊小芬 白 賓 薛會朝 王 瑜 王國英 秦 雙

乳腺癌患者的基礎發病率較高，其遠期多器官功能衰竭或者臨床預后惡化風險的比例持續維持在較高的水平[1]。乳腺癌患者容易早期發生淋巴結轉移，而淋巴結轉移的發生能夠顯著影響患者治療方案的選擇和臨床預后水平。不同的病理性因素均能夠促進淋巴結轉移的發生，分子生物學水平的改變，能夠在促進癌細胞轉移和淋巴結浸潤過程中發揮重要的作用[2]。組織蛋白酶D(Cath-D)的表達能夠通過促進癌細胞間質成分的分解，為癌細胞侵襲淋巴結提供基礎[3]；表皮生長因子受體2(epidermalgrowthfactorreceptor，c-erbB-2)的上升，能夠通過誘導其他生長因子家族成員的激活，最終提高腫瘤細胞的生長和復制風險[4]。為了揭示Cath-D、c-erbB-2的表達與乳腺癌的關系，從而為臨床上乳腺癌患者的淋巴結轉移高危評估提供參考，本次研究探討了Cath-D、c-erbB-2的表達及其與乳腺癌患者體內腫瘤標志物和淋巴結轉移的關系，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月至2018年2月在我院接受手術治療的乳腺癌患者為研究對象。納入標準：①成年者；②經術中病理檢查確診為乳腺癌者；③無其他原發腫瘤者。排除標準：①不愿參與本項研究者；②合并嚴重基礎疾病者。根據標準共納入乳腺癌患者100例，年齡30～56歲，平均(45.83±8.05)歲。乳腺纖維腺瘤納入標準：年齡≥18周歲，經術中病理確診為乳腺纖維腺瘤者，共納入100例，年齡28～52歲，平均(45.72±10.13)歲。2組的資料分布無明顯差別，具有可比性。

1.2 檢測方法

石蠟切片采用二甲苯進行脫臘至水，5%的雙氧水常溫在孵育10 min，采用磷酸鹽緩沖液孵育5 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，5%的山羊血清抗體封閉10 min，不沖洗，滴加一抗(購自abcum公司，濃度：1∶500)，4 ℃冰箱孵育過夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加生物素標記好的二抗(購自北京康泰生物，濃度：1∶1000)，37 ℃孵育30 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加第二代辣根酶標記的工作液體，37 ℃孵育10 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，顯色之后采用酒精脫水、二甲苯透明、樹膠封片，鏡下觀察。采集入院后靜脈血，離心后收集上清液，采用免疫發光法檢測CEA、CA15-3、CA125水平，檢測儀器為美國Bio-Bad全自動酶標儀，配套試劑盒購自羅氏檢測公司。

1.3 評價指標

觀察乳腺癌(有、無淋巴轉移組)、乳腺纖維腺瘤患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達情況，比較乳腺癌(有、無淋巴轉移組)、乳腺纖維腺瘤患者血清腫瘤標志物水平的差異，分析淋巴結轉移的乳腺癌患者Cath-D、c-erbB-2陽性表達與腫瘤標志物水平的相關性。

1.4 統計學處理

采用SPSS 11.5軟件分析。采用卡方檢驗、t檢驗進行統計學處理。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組和纖維腺瘤組患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達的比較

乳腺癌組患者的組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達率均高于乳腺纖維腺瘤組(χ2值=51.796、70.090，P<0.001)，見表1。

表1 乳腺癌組和纖維腺瘤組患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達的比較(例，%)

2.2 有、無淋巴結轉移乳腺癌患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達的比較

有淋巴結轉移的乳腺癌患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達率高于無淋巴結轉移組(P<0.05)。見表2。

表2 有、無淋巴結轉移乳腺癌患者組織切片Cath-D、c-erbB-2陽性表達的比較(例，%)

2.3 乳腺癌組和纖維腺瘤組患者血清腫瘤標志物水平的比較

乳腺癌組患者血清CEA、CA15-3、CA125水平均高于乳腺纖維腺瘤組(P<0.001)。見表3。

2.4 有、無淋巴結轉移乳腺癌患者血清腫瘤標志物水平的比較

有淋巴結轉移組患者血清CEA、CA15-3、CA125水平高于無淋巴結轉移組(t=16.681、27.880、23.216，P<0.001)。見表4。

表3 乳腺癌組和纖維腺瘤組患者血清腫瘤標志物水平的比較

表4 有、無淋巴結轉移乳腺癌患者血清腫瘤標志物水平的比較

2.5 淋巴結轉移的乳腺癌患者Cath-D、c-erbB-2陽性表達與腫瘤標志物的相關性

有淋巴結轉移的乳腺癌患者Cath-D、c-erbB-2陽性表達率與血清CEA、CA15-3、CA125水平呈正相關。見表5。

表5 乳腺癌患者Cath-D、c-erbB-2與腫瘤標志物的相關性

3 討論

在具有BRCA基因突變的患者中，乳腺癌的發病率可顯著的上升[5]。現階段臨床上通過手術及放化療措施綜合性治療乳腺癌，但治療后的患者病情進展風險仍然較高。長期的臨床隨訪研究認為，淋巴結轉移的發生是影響乳腺癌治療預后的重要因素[6]，淋巴結轉移能夠導致乳腺癌患者遠期復發風險的上升，縮短乳腺癌患者的生存時間[7]。一項囊括了172例樣本量的乳腺癌患者病情隨訪觀察分析可見，發生淋巴結轉移的乳腺癌可占到所有病例的35%以上，特別是在中晚期患者中，淋巴結轉移的風險更高[8]。而本次研究對于乳腺癌患者體內Cath-D、c-erbB-2的表達與患者淋巴結轉移關系的研究，能夠揭示乳腺癌的臨床病理特征的進展機制，從而為改善患者的生存預后提供參考。

Cath-D是組織蛋白酶家族成員，主要表達于平滑肌上皮組織和脂肪組織成分中。Cath-D結構上包含了多個可水解的蛋白酶區域，能夠通過對于組織蛋白的水解作用，提高癌細胞的侵襲能力[9-10]；c-erbB-2是表皮生長因子家族成員，能夠提高癌細胞的增殖速度，促進癌細胞DNA的持續性擴增。越來越多的研究還認為，c-erbB-2的表達能夠提高癌細胞的變形能力，提高淋巴結前哨轉移的風險[11]。

在本次研究中可以發現，Cath-D、c-erbB-2蛋白在乳腺癌患者中的表達濃度明顯的上升，提示了Cath-D、c-erbB-2可能參與了乳腺癌的發生發展過程，這主要考慮與Cath-D的表達上升，能夠影響到上皮細胞間質轉換的風險，促進了腫瘤細胞的浸潤，而c-erbB-2的表達上升能夠影響癌細胞的增殖特性，進而促進癌細胞的持續性擴增過程。黃少江等[12]研究者也發現了c-erbB-2蛋白在乳腺癌患者中的異常表達情況，其發現在乳腺癌臨床分期進展較為迅速的患者中，c-erbB-2蛋白的表達陽性率可明顯上升。在探討Cath-D、c-erbB-2的表達與淋巴結轉移關系的過程中發現，在發生了淋巴結轉移的患者中，Cath-D、c-erbB-2的表達陽性率明顯的上升，高于未發生轉移的乳腺組織，差異較為明顯，提示Cath-D、c-erbB-2的表達能夠顯著促進淋巴結的轉移。分析其原理，考慮與Cath-D、c-erbB-2的下列作用機制有關[13-15]：①Cath-D的表達上升能夠提高腫瘤細胞偽足形成的風險，促進了腫瘤細胞的浸潤和粘附；②c-erbB-2的表達上升能夠促進癌細胞的轉錄和增殖活性的增強，維持癌細胞在淋巴結組織區域的生長能力。CEA、CA15-3、CA125是非特異性的腫瘤標志物，在乳腺癌患者中，相關腫瘤標志物的表達濃度明顯的上升，特別是在合并有淋巴結轉移的患者中，CEA、CA15-3、CA125的表達濃度可進一步的上升，這主要由于CEA、CA15-3、CA125能夠提高癌細胞粘附淋巴結內皮組織的能力。最后相關關系分析可見，Cath-D、c-erbB-2陽性表達率與血清CEA、CA15-3、CA125水平正相關，進一步提示了Cath-D、c-erbB-2的表達與乳腺癌患者的病情關系。

本次研究的創新性在于探討了Cath-D、c-erbB-2的表達與乳腺癌淋巴結轉移的關系。綜上所述，乳腺癌患者病理組織中Cath-D、c-erbB-2陽性表達率較高，且與淋巴結轉移和腫瘤標志物水平相關。