β-CTX、BAP、uNTx聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的價(jià)值

楊艷榮 鄭先雷 李洪洋

骨轉(zhuǎn)移是晚期肺癌患者常見的僅次于肺與肝臟的主要轉(zhuǎn)移部位之一[1]。有資料統(tǒng)計(jì)[2]30%～40%的晚期肺癌患者出現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移。一旦發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，骨形成和骨吸收代謝紊亂，骨質(zhì)遭到破壞，出現(xiàn)骨痛、病理性骨折、高鈣血癥等骨相關(guān)事件，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量并縮短生存期限[3]。臨床上常依靠骨組織活檢和影像學(xué)手段，但前者為有創(chuàng)檢查，患者順應(yīng)性較低，且檢查耗時(shí)。而影像學(xué)檢查反映骨病變不及時(shí)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)骨轉(zhuǎn)移效果差，制約了對(duì)疾病進(jìn)展和療效的監(jiān)測(cè)[4-5]。目前很少有關(guān)于與骨代謝相關(guān)的血清學(xué)標(biāo)志物水平在肺癌骨轉(zhuǎn)移檢測(cè)中的報(bào)道。本研究對(duì)比分析了肺癌骨轉(zhuǎn)移患者(轉(zhuǎn)移組)和肺癌未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的患者(對(duì)照組)血清骨代謝過程中骨形成標(biāo)志物骨堿性磷酸酶(BAP)及骨吸收標(biāo)志物β-Ⅰ型膠原羧基端肽(β-CTX)、尿Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基末端肽(uNTx)的水平差異，旨在確定上述指標(biāo)在肺癌伴骨轉(zhuǎn)移病情和療效評(píng)估的臨床價(jià)值。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2019年10月我院經(jīng)放射性核素骨掃描確診的64例肺癌骨轉(zhuǎn)移患者(轉(zhuǎn)移組)、60例肺癌未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的患者(對(duì)照組)。轉(zhuǎn)移組，年齡51～77歲，平均(63.8±8.6)歲；性別構(gòu)成：男性38例、女性26例；TNM分期：ⅢB期22例、Ⅳ期42例；組織學(xué)分化程度：高分化16例、中分化24例、低分化24例。對(duì)照組患者年齡44～79歲，平均(61.4±12.0)歲；性別構(gòu)成：男性35例、女性25例；TNM分期：Ⅱ期25例、ⅢA期26例、ⅢB期的有9例；組織學(xué)分化程度：高分化22例、中分化21例、低分化17例。2組患者的年齡、性別、腫瘤分化程度比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；2組TNM分期比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

1.2 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)《原發(fā)性肺癌診療規(guī)范2018年版》中的標(biāo)準(zhǔn)，肺癌骨轉(zhuǎn)移的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《2014版肺癌骨轉(zhuǎn)移診療專家共識(shí)》中的標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①肺癌均經(jīng)過病理學(xué)檢查證實(shí)；②骨轉(zhuǎn)移的診斷標(biāo)準(zhǔn)以放射性核素骨掃描結(jié)果為準(zhǔn)；③患者入組時(shí)均為初診患者，未使用放化療、免疫學(xué)藥物，未使用抗骨質(zhì)疏松相關(guān)藥物；④本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定。排除標(biāo)準(zhǔn)：①長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素、鈣劑及影響骨代謝指標(biāo)的患者；②原發(fā)性骨腫瘤、骨結(jié)核患者；③合并其他系統(tǒng)重大疾病；④長(zhǎng)期臥床患者。

1.3 方法

uNTx、sBAP、β-CTX檢測(cè)：uNTx應(yīng)用ELISA法檢測(cè)，所需檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)Ostex Inter-national公司，操作過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書。用 UA400Ol ympas全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定同一標(biāo)本尿肌酐(Cr)，uNTx結(jié)果按照Cr校正值(uNTx/Cr)。sBAP應(yīng)用ELISA法檢測(cè)，所需檢測(cè)試劑盒購(gòu)自Quidel公司，操作

過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書。β-CTX：采用Cobas6000 系列全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行定量檢測(cè)，嚴(yán)格按照儀器說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 轉(zhuǎn)移組和對(duì)照組的β-CTX、BAP、uNTx比較

轉(zhuǎn)移組患者的β-CTX、BAP、uNTx水平均高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；見表1。

表1 轉(zhuǎn)移組和對(duì)照組的β-CTX、BAP、uNTx比較

2.2 不同轉(zhuǎn)移灶數(shù)量的轉(zhuǎn)移患者的β-CTX、BAP、uNTx比較

≥2個(gè)轉(zhuǎn)移部位患者的β-CTX、BAP、uNTx水平均高于1個(gè)轉(zhuǎn)移部位的患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；見表2。

表2 不同轉(zhuǎn)移灶數(shù)量的轉(zhuǎn)移患者的β-CTX、BAP、uNTx比較

2.3 β-CTX、BAP、uNTx單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用診斷肺癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的價(jià)值

β-CTX診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度為49.21%、特異度為76.42%、AUC值為0.675；BAP診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度為57.88%、特異度為79.85%、AUC值為0.738；uNTx診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度為68.33%、特異度為81.30%、AUC值為0.758；β-CTX、BAP、uNTx聯(lián)合應(yīng)用診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移的靈敏度為91.27%、特異度為80.55%、AUC值為0.889；見表3。

表3 β-CTX、BAP、uNTx單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用診斷肺癌發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的價(jià)值

3 討論

正常生理狀態(tài)下的骨質(zhì)更新依賴于破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收過程和成骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨形成過程間的動(dòng)態(tài)反饋環(huán)路實(shí)現(xiàn)的。破骨和成骨細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡是保持骨完整性的關(guān)鍵。成人每年有將近10%的骨質(zhì)發(fā)生更新[6-7]。骨轉(zhuǎn)移晚期肺癌患者常見的其他臟器轉(zhuǎn)移表現(xiàn)，其過程復(fù)雜而有序，是病理因素/分子或細(xì)胞機(jī)制共同作用的結(jié)果[8]。有研究報(bào)道[9]腫瘤細(xì)胞刺激分泌的腫瘤壞死因子、白介素Ⅰβ、白介素6及其受體等可促進(jìn)腫瘤在骨骼中的生長(zhǎng)。影響骨骼正常的發(fā)生、發(fā)育和重塑，最終導(dǎo)致骨質(zhì)破壞。骨代謝標(biāo)志物是成骨和破骨過程中產(chǎn)生的可反映骨吸收和形成的速度，有望成為腫瘤骨轉(zhuǎn)移病情評(píng)估的臨床應(yīng)用過程。

β-Ⅰ型膠原羧基端肽(β-CTX)是骨吸收過程中破骨細(xì)胞產(chǎn)生的膠原降解產(chǎn)物，是溶骨性指標(biāo)，反映骨破壞水平[10]。本研究結(jié)果顯示，發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者比未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移肺癌患者血清β-CTx顯著升高，說明，肺癌骨轉(zhuǎn)移患者處于破骨狀態(tài)，有可能導(dǎo)致病理性骨折和溶血性血鈣升高，臨床需警惕并采取及時(shí)有效的措施。

uNTx是破骨細(xì)胞介導(dǎo)的通過降解骨膠原產(chǎn)生的一種含有獨(dú)特氨基酸序列的Ⅰ型膠原N末端肽，釋放至血液循環(huán)最終經(jīng)尿液排出[11]。uNTx在血液中受食物影響小，是尿中最穩(wěn)定的骨質(zhì)溶解最終代謝產(chǎn)物，可特異性反映骨吸收程度和速度，是靈敏度和特異性較高的骨吸收指標(biāo)[12]。本研究結(jié)果顯示，伴骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者血清uNTx水平顯著高于未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的患者，證實(shí)肺癌患者骨吸收代謝活躍，可作為肺癌患者骨轉(zhuǎn)移病情程度的評(píng)估指標(biāo)。

sBAP是成骨細(xì)胞合成的堿性磷酸酶的同工酶的一種，其通過多糖鏈與磷脂酰肌醇結(jié)合固定在細(xì)胞膜表面，在多糖-肌醇磷酸特異性酶的水解下進(jìn)入血液循環(huán)[13]，為骨形成過程中羥磷灰石結(jié)晶的沉積提供必需的磷酸，同時(shí)降低焦磷酸鹽在骨形成過程中的抑制作用，共同促進(jìn)骨形成[14-15]。本研究結(jié)果顯示，伴骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者血清sBAP水平顯著高于無骨轉(zhuǎn)移組，說明肺癌骨轉(zhuǎn)移患者出現(xiàn)骨代謝紊亂狀況。本研究發(fā)現(xiàn)骨吸收標(biāo)志物β-CTX、uNTx和骨形成標(biāo)志物sBAP共同升高，說明骨吸收和骨形成指標(biāo)之間具有相關(guān)性，可協(xié)助診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移。通過監(jiān)測(cè)上述與成骨和破骨相關(guān)的標(biāo)志物水平的動(dòng)態(tài)變化，可間接掌握成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性情況，有利于對(duì)骨轉(zhuǎn)移病情的有效評(píng)估。

本研究還發(fā)現(xiàn)，β-CTX、BAP、uNTx水平升高程度在伴有多發(fā)性骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者血清中顯著高于單發(fā)性骨轉(zhuǎn)移的患者。說明，β-CTX、BAP、uNTx水平與肺癌骨轉(zhuǎn)移程度和數(shù)目有關(guān)。一般肺癌骨轉(zhuǎn)移程度用骨腫瘤負(fù)荷表示，說明β-CTX、BAP、uNTx升高越顯著代表骨腫瘤負(fù)荷越大。本研究還發(fā)現(xiàn)聯(lián)合上述三種骨代謝標(biāo)志物對(duì)肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷特異性和靈敏度顯著高于任意一種單一指標(biāo)的檢測(cè)靈敏度和特異性。說明，聯(lián)合上述三種骨代謝血清標(biāo)志物檢測(cè)有利于提高肺癌骨轉(zhuǎn)移診斷正確率，減少誤診率和漏診率，有利于臨床有效針對(duì)性地治療。

綜上所述，β-CTX、BAP、uNTx聯(lián)合應(yīng)用診斷肺癌骨轉(zhuǎn)移能顯著地提高診斷的靈敏度。本研究確定β-CTX、BAP、uNTx在肺癌骨轉(zhuǎn)移病情評(píng)估中的臨床價(jià)值，為臨床診斷提供無創(chuàng)且靈敏度、特異性均較高的檢測(cè)方法，具有重要的臨床意義。