血清8-OHdG、MnSOD水平與急性缺血性腦卒中患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復的相關性分析

文微微，王燚鑫，張蔚蔚

0 引言

腦卒中是指因腦部血管發生突然破裂,或突然堵塞致使大腦血液循環障礙,最終造成腦部缺血引起腦組織損傷的一組疾病,致死率高,隨著社會老齡化進程,發病率逐漸增加[1]。急性缺血性腦卒中(Acute ischemic stroke,AIS)是腦卒中最常見類型,重組組織型纖溶酶原激活劑(Recombinant Tissue Plasminogen Activator,rt-PA)靜脈溶栓法是臨床治療AIS的有效方法[2]。8-羥基脫氧鳥苷酸(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)由活性氧簇攻擊DNA分子中的鳥嘌呤堿基第8位碳原子產生,是一種評估DNA氧化損傷程度的生物學指標,錳超氧化物歧化酶(MnSOD)可清除體內自由基,抑制機體氧化損傷進程[3-4]。8-OHdG、MnSOD與認知功能的研究廣泛[5-8],但與AIS患者經rt-PA靜脈溶栓治療后認知功能恢復情況的關系尚無報道,本文就此展開研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取112例2016年3月至2018年10月在我院行rt-PA靜脈溶栓治療的AIS患者為研究對象(總例數179例,排除67例,最終入選112例),男64例,女48例。納入標準:①經頭顱CT檢查,符合中華醫學會神經病學分會發布的《中國急性缺血性腦卒中診治指南》(2014)診斷標準[9];②年齡18～80歲;③為首次發病者;④發病在4.5 h內;⑤患者在治療前30 min癥狀未緩解;⑥缺血面積小于同側大腦半球面積1/3。排除標準:①患者6個月內發生過嚴重腦外傷;②合并心肝肺腎臟器功能嚴重障礙者;③合并惡性腫瘤者;④合并出血性疾病者;⑤血糖<2.7 mmol/L或>22.2 mmol/L;⑥妊娠、哺乳期女性;⑦血小板計數<100×109/L;⑧臨床資料不完整者。所有患者采用rt-PA靜脈溶栓治療(注射用阿替普酶,國藥準字:S20110051,德國Boehringer Ingelheim公司),按照0.9 mg/kg計算劑量,最大劑量為90 mg,給藥方法:1 min內靜脈推注10%,剩余90%采用靜脈輸液泵持續推注,在60 min內完成。根據rt-PA靜脈溶栓治療后7 d蒙特利爾認知評估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)評分分為2組:認知功能恢復良好組(MoCA≥26分)52例,認知功能恢復不良組(MoCA<26分)60例?；颊呒凹覍倬炇鹬橥鈺?本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 AIS患者于rt-PA靜脈溶栓治療前抽取5 ml靜脈血,離心(3 000 r/min,10 min),血清于-80 ℃保存。采用日立7600全自動生化儀檢測空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)、三酰甘油(Triglycerides,TG)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)。采用酶聯免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清8-OHdG、MnSOD水平,嚴格按照試劑盒說明書進行操作,試劑盒均購于美國R&D公司。

1.2.2 認知功能評估 采用MoCA評分量表評估AIS患者認知功能損傷程度。MoCA包括視空間與執行能力、記憶、注意力、語言功能、抽象等8個分項目,共30分,MoCA≥26分為認知功能正常,受教育年限<12年者以MoCA得分加1分計算。記錄患者接受rt-PA靜脈溶栓治療前及治療后7 d MoCA評分。

2 結果

2.1 兩組患者一般資料比較 兩組患者性別、年齡、BMI、收縮壓、舒張壓、高血壓史、溶栓前MoCA評分相比,差異無統計學意義(P>0.05)； 兩組患者心房纖顫史、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、美國國立衛生院神經功能缺損(NIHSS)評分相比,差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01),見表1。

表1 兩組患者一般資料比較[例(%)]

2.2 兩組患者實驗室指標比較 兩組患者8-OHdG、MnSOD、FPG、TC、LDL-C比較，差異有統計學意義(P<0.05),TG、HDL-C比較，差異無統計學意義(P>0.05),見表2。

表2 兩組患者實驗室指標比較

2.3 認知功能恢復不良組血清8-OHdG、MnSOD水平與溶栓治療后7 d MoCA評分相關性分析 Pearson相關分析結果顯示,認知功能恢復不良組血清8-OHdG水平與溶栓治療后7 d MoCA評分呈負相關(r=-0.623,P<0.001),MnSOD水平與溶栓治療后7 d MoCA評分呈正相關(r=0.577,P<0.001),見圖1、圖2。

圖1 認知功能恢復不良組血清8-OHdG、溶栓治療后7 d MoCA評分散點圖

圖2 認知功能恢復不良組血清MnSOD、溶栓治療后7 d MoCA評分散點圖

2.4 多因素Logistic回歸分析 以AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能是否恢復良好為因變量,以心房纖顫史、NIHSS評分、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、8-OHdG、MnSOD、FPG、TC、LDL-C為自變量進行多因素Logistic回歸分析,結果表明,心房纖顫史、NIHSS評分、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、8-OHdG、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復不良的危險因素(P<0.05),MnSOD是保護因素(P<0.05),見表3。

表3 影響AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復因素Logistic回歸分析

3 討論

認知功能障礙是腦卒中患者常見臨床癥狀,對患者、家庭都造成嚴重負擔,是腦卒中患者預后重要評估指標[10]。心房纖顫是心律失常最常見的類型,研究發現，心房纖顫患者心房收縮功能減退,心房血流減緩,血液黏滯度增大,最終導致心房附壁形成血栓[11-12],是公認的認知功能障礙、癡呆的獨立高危因素[13]。NIHSS評分是評估神經功能缺損的權威量表,分值越高說明腦神經微環境變化越大,從而影響認知功能。馮清春等[14]研究表明,高血壓史、高血脂癥是AIS患者發生認知功能障礙的危險因素,可采取預防措施以減緩認知功能障礙的發生。rt-PA是臨床常用溶栓藥物,可通過激活纖溶酶原轉化為纖溶蛋白參與酶促反應,進而促進交聯纖維蛋白降解,致使血栓溶解,但也存在時間窗的限制,并與AIS患者預后密切相關[15-16]。權青云等[17]研究發現,卒中后認知功能障礙患者血清LDL-C水平較同期健康對照者高,且LDL-C水平越高,認知功能損傷越嚴重,是卒中患者發生認知功能障礙的危險因素。熊益等[18]研究發現,FPG、低密度脂蛋白是非糖尿病AIS患者認知功能受損的危險因素,應在臨床工作中予以關注。本研究發現,AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復不良組與良好組相比,房纖顫史、NIHSS評分、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、FPG、TC、LDL-C差異均有統計學意義,提示以上因素可能與AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復有關,進一步研究顯示,房纖顫史、NIHSS評分、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復的危險因素。

氧化應激可以對神經細胞的凋亡起到促進作用,參與阿爾茨海默癥的病理過程[19]。研究發現,肝郁型輕度認知障礙患者經過治療后,肝氣郁結癥狀減輕,認知功能改善,尿中8-OHdG水平降低[5]。陸邦超等[6]發現,癡呆糖尿病患者、輕度認知障礙糖尿病患者、認知正常糖尿病患者與健康對照者相比,血清8-OHdG水平依次降低。血清8-OHdG水平可以反映老年糖尿病患者認知功能損傷程度,是老年糖尿病患者發生認知功能障礙的獨立危險因素。吳瓊等[7]研究發現,持續低壓缺氧法造模成功的老年大鼠學習記憶能力降低,腦組織中8-OHdG水平升高,模型大鼠經過治療后,學習記憶能力提升,8-OHdG水平降低,提示缺氧造成氧化損傷產物8-OHdG增加越多,大鼠的認知功能損傷程度越重。殷玥等[8]研究發現，高脂飲食法造模成功的肥胖小鼠學習記憶能力顯著降低,海馬神經元中活性氧水平增高,海馬神經元線粒體中MnSOD水平降低,經有氧間歇訓練的模型小鼠MnSOD水平升高,海馬神經元氧化應激作用減弱,學習記憶能力得到改善。本研究發現,與認知功能恢復良好組相比,認知功能恢復不良組8-OHdG水平較高、MnSOD水平較低,差異均有統計學意義,提示8-OHdG、MnSOD與AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復狀況有關。Pearson相關分析結果顯示,認知功能恢復不良組血清8-OHdG與溶栓治療后7 d MoCA評分呈負相關,MnSOD與溶栓治療后7 d MoCA評分呈正相關,可能是氧化作用標志物8-OHdG與抗氧化作用標志物MnSOD在機體內參與氧化應激反應影響AIS患者溶栓治療后認知功能的恢復;多因素Logistic回歸分析表明,8-OHdG是AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復的危險因素,MnSOD是保護因素,提示氧化應激反應與AIS患者rt-PA靜脈溶栓治療后認知功能恢復情況密切相關。

綜上所述,AIS患者rt-PA靜脈溶栓治療后認知功能恢復不良組與認知功能恢復良好組相比,氧化應激反應相關指標8-OHdG水平較高,MnSOD水平較低,認知功能恢復不良組8-OHdG水平與溶栓治療后7 d MoCA評分呈負相關,MnSOD水平與溶栓治療后7 d MoCA評分呈正相關,8-OHdG、房纖顫史、NIHSS評分、高血脂史、糖尿病史、發病到溶栓時間、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA靜脈溶栓后認知功能恢復的危險因素,MnSOD是保護因素,可能為預測AIS患者rt-PA靜脈溶栓治療后認知功能恢復情況提供參考依據,但具體作用機制尚需進一步研究。