催產素在妊娠晚期及剖宮產術后大鼠體內藥物代謝動力學研究

曲星銘， 張 紀， 徐 輝, 張 雷

北部戰區總醫院 1.血液病科；2.婦產科；3.衛勤部，遼寧 沈陽 110016;4.遼寧省婦幼保健院，遼寧 沈陽 110005

近年來，無痛分娩因其良好的鎮痛效果，越來越受到產婦和醫師的關注。盡管無痛分娩可以在一定程度上緩解產婦疼痛，但會引起子宮平滑肌松弛和子宮收縮抑制，從而導致分娩時間延長[1]。在無痛分娩過程中使用催產素可以有效地促進子宮頸成熟，加速子宮頸擴張，縮短分娩時間，節省產婦體力和精力，改善母嬰結局[2]。催產素可增強子宮收縮，靜脈注射迅速生效。但催產素的半衰期短(4～10 min)，維持時間短，需要通過連續靜脈內給藥維持有效的血藥濃度[3]。因此，在剖宮產期間連續輸注催產素可以使子宮在整個手術過程中和手術后2 h內持續收縮，從而減少因子宮無力而引起的產后出血。目前，關于不同劑量的催產素對產婦的影響報道較少。本研究通過給予妊娠晚期和剖宮產術后大鼠尾靜脈注射不同濃度催產素構建催產素藥物代謝動力學模型，并用高效液相色譜-二級質譜聯用法測定血漿催產素濃度，探討其藥物代謝動力學變化的特點。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 選取36只妊娠晚期清潔級SD大鼠為研究對象，體質量400～520 g，孕期18 d。實驗動物由北部戰區總醫院動物實驗科提供。將大鼠隨機分為妊娠晚期組(n=18)與剖宮產術后組(n=18)。將妊娠晚期組大鼠分為A組、B組、C組3個亞組，每組各6只。將剖宮產術后組大鼠分為D組、E組、F組3個亞組，每組各6只。本研究對大鼠的處置符合動物倫理學標準。

1.2 模型制備 術前12 h禁食。麻醉后將大鼠仰臥位固定于手術臺上，頸靜脈插管成功后用于放血。通過尾靜脈注射給藥。A組、B組、C組分別尾靜脈注射0.1、0.5、5.0 U/kg不同濃度的催產素。D組、E組、F組參照Jankowski等[4]的方法構建動物模型，下腹部正中切口打開腹腔，顯露子宮，切開大鼠子宮及孕囊。取出胎鼠后，縫合子宮，依次將各層組織逐層縫合至皮膚，維持。剖出胎鼠后，D組、E組、F組立即尾靜脈推注0.1、0.5、5.0 U/kg不同濃度的催產素。于給藥后1、2、4、6、8、10、15、20、45、60 min(分別記為T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10)各時間點采集頸靜脈血0.5 ml，置肝素化EP管中，3 000 r/min離心5 min，取上清，-80℃保存。

1.3 觀察指標 取催產素溶液，用流動相A精密稀釋至濃度分別為0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的催產素標準儲備液，分別進樣，4℃避光保存。取孕鼠空白血漿50 μl，進樣5 μl，記錄色譜圖；將一定濃度的標準溶液加至空白血漿中，同法測定，記錄色譜圖。取催產素溶液，用流動相A精密稀釋至濃度分別為0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的溶液，分別進樣。以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線。

2 結果

2.1 妊娠晚期大鼠催產素血藥濃度比較 A組、B組、C組藥物達峰時間均為給藥后1 min。C組T1～T10各時間點血藥濃度均明顯高于B組與A組，且B組高于A組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 妊娠晚期給予大鼠不同濃度催產素血藥濃度比較

2.2 剖宮產術后大鼠催產素血藥濃度比較 D組、E組、F組藥物達峰時間均為給藥后1 min。F組T1～T10各時間點血藥濃度均明顯高于D組與E組，且E組高于D組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 剖宮產術后給予大鼠不同濃度催產素血藥濃度比較

2.3 妊娠晚期大鼠藥物代謝動力學參數比較 C組峰值藥物濃度、曲線下面積(area under the curve，AUC)、血漿清除率、表觀分布容積均高于A組與B組，且B組高于A組，差異有統計學意義(P<0.05)。C組半衰期短于A組與B組，且B組短于A組，差異有統計學意義(P<0.05)。C組藥物體內平均駐留時間(mean retention time，MRT)短于A組與B組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 妊娠晚期大鼠藥物代謝動力學參數比較

2.4 剖宮產術后大鼠藥物代謝動力學參數比較 F組峰值藥物濃度濃、AUC、血漿清除率、表觀分布容積均高于D組及E組，且E組高于D組，差異有統計學意義(P<0.05)。F組半衰期短于D組及E組，且E組短于D組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 剖宮產術后大鼠藥物代謝動力學參數比較

3 討論

目前，臨床上測定催產素血藥濃度的方法有酶聯免疫吸附法、化學物質放射免疫檢驗、高效液相色譜-二級質譜聯用法等[5]。高效液相色譜具有高壓、高效、高靈敏度、應用范圍廣，以及分析速度快等優點。二級質譜對一級質譜中有疑問的峰進行再次解離分析以確定一級質譜中不確定的峰的結構。本研究首次采用高效液相色譜-二級質譜聯用法檢測妊娠晚期及剖宮產術后催產素的濃度，該方法提取回收率較高，樣品預處理簡單，運行時間較短，能夠滿足實際生物樣品的測定。

腎小球濾過、催產素酶等因素影響催產素的代謝與清除[6-7]。在催產素酶水解前，催產素必須與內皮細胞表面的催產素受體結合，隨后通過網格蛋白介導的信號通路，最終回收到細胞表面[8]。有研究報道，催產素在人體內的半衰期為1～3 min[9]。本研究采用高效液相色譜-二級質譜聯用法測定妊娠晚期和剖宮產術后大鼠體內不同濃度催產素的半衰期為7～10 min，且隨著催產素給藥濃度增加，孕鼠體內半衰期均變短，提示高濃度催產素代謝快，半衰期短。本研究催產素半衰期較相關文獻報道[9]的半衰期長，其原因可能是高效液相色譜質譜聯用的方法高效、快速、準確、靈敏，避免了血漿催產素在體外的降解。因為催產素半衰期短，因此，催產素的最佳給藥方式非肌肉注射和靜脈推注，而是靜脈滴注持續給藥。

綜上所述，催產素半衰期短，給予妊娠晚期和剖宮產術后大鼠不同濃度催產素后，達峰時間均為1 min。在剖宮產術中當胎頭或胎肩娩出后，及時經靜脈給予催產素將會快速產生宮縮的效應。