覆土添加硒對雙孢蘑菇產量與品質的影響*

吳圣進，陳雪鳳，張雯龍，王燦琴，劉增亮，郎 寧

（廣西農業科學院微生物研究所，廣西 南寧 530007）

硒是人和動物必需的微量營養元素之一，硒的營養狀況與人類衰老和多種疾病密切相關[1]。在全球缺硒地區普遍存在的情況下，開發富硒蔬菜和糧食等農作物產品，通過食物鏈補充硒營養，對促進人類健康具有重要意義[2]。食物中的硒歸根結底來源于土壤，在廣西等富硒土壤資源豐富的地區發展天然富硒農產品，具有得天獨厚的優勢[3]。

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）是人工栽培最廣泛的食用菌品種之一，是一種美味的菌類[4]。雙孢蘑菇在栽培過程中需要覆土才能出菇，覆土材料性狀極大地影響著雙孢蘑菇的產量和品質[5]。根據廣西土壤實際硒含量范圍，研究不同硒含量的覆土材料對雙孢蘑菇子實體產量和品質的影響，為優質富硒雙孢蘑菇的生產開發提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試雙孢蘑菇菌株As2796，為廣西農業科學院微生物所保存種；供試土壤為稻田土，收集自廣西南寧市邕寧區；栽培原料為稻草和花生麩，均來自南寧市周邊；化學試劑亞硒酸鈉（化學純），產自天津市光復精細化工研究所。

1.2 栽培試驗方法

雙孢蘑菇栽培原料配方為稻草83%、花生麩16%、石灰1%。栽培原料按照常規二次發酵法堆制發酵腐熟[6]，再將腐熟好的發酵料裝入規格為40 cm×50 cm的塑料筐中；裝筐時分3層鋪料和播種，裝料厚度約25 cm，共計裝15個塑料筐；裝好料的筐全部搬入培養室，于25℃下培養至雙孢蘑菇菌絲吃料完全。

提前1周將土壤打碎，將土壤按每50千克1份的標準分成5份，按不同處理分別對5份土壤添加不同濃度的亞硒酸鈉水溶液，處理1～處理4中添加硒的濃度分別為 0.15 mg·kg-1、0.30 mg·kg-1、0.45 mg·kg-1和 0.60 mg·kg-1，對照處理以蒸餾水代替亞硒酸鈉水溶液。各處理同時分別噴灑1 500 mL稀釋50倍的甲醛溶液消毒[7]，拌勻后成堆用塑料膜蓋好，消毒3 d～4 d后，分別將各處理土壤攤開，散去殘留甲醛，調好水分，并分別采集土樣分析備用。

將準備好的土壤鋪蓋在塑料筐中發好菌絲的培養料面上，土壤厚度約4 cm，每一處理覆土3個塑料筐作為重復。將覆土后的塑料筐搬入出菇房，按照雙孢蘑菇常規方法進行出菇管理[7]。待子實體八成熟時采收，共采收四潮菇，分別統計每筐四潮菇的總產量，并留出樣品供分析用。

1.3 樣品分析方法

樣品委托南寧益譜檢測技術有限公司進行硒、蛋白質、粗脂肪、粗纖維、多糖、碳水化合物、氨基酸等含量的測定。其中，雙孢蘑菇子實體樣品有機硒和無機硒的測定參照國家標準GB 5009.93-2017食品安全國家標準—食品中硒的測定進行；其余分別參照GB/T 15673-2009食用菌中粗蛋白含量的測定、GB/T 15674-2009食用菌中粗脂肪含量的測定、GB/T 5009.10-2003植物類食品中粗纖維的測定、NY/T 1676-2008食用菌中粗多糖含量的測定、GB 28050-2011食品安全國家標準預包裝食品營養標簽通則中總碳水化合物的測定及GB/T 5009.124-2003食品中氨基酸的測定等方法進行相關成分的測定。土壤有效態硒的測定參照陳娥等[8]的方法、土壤總硒的測定參照NY/T 1104-2006土壤中全硒的測定。出第二潮菇時，各處理分別隨機采摘子實體50個，測定子實體的單朵重、大小（體積）和密度，計算平均值，其中子實體體積采用排水法測定。

1.4 數據分析

采用Excel 2010和SPSS 19.0軟件進行試驗數據的分析（LSD法）。

2 結果與分析

2.1 不同處理對土壤和雙孢蘑菇子實體硒含量的影響

不同處理土壤有效態硒、總硒和雙孢蘑菇子實體有機硒、無機硒含量的測定結果見表1。

表1 不同處理土壤和雙孢蘑菇子實體硒含量Tab.1 Contents of selenium in soil and fruiting body of Agaricus bisporus from different treatments

由表1可知，對照土壤總硒含量達0.38 mg·kg-1，而有效態硒含量僅0.05 mg·kg-1，說明自然土壤中硒的形態多為非有效態；隨著人工添加硒的增多，土壤有效態硒和總硒含量均顯著增加（P＜0.05），說明人工添加的硒多呈有效態存在覆土中；隨著人工添加硒的增多，雙孢蘑菇子實體有機硒含量也呈增長趨勢，其中處理3和處理4的硒含量顯著高于對照（P＜0.05），而處理1和處理2與對照相比無顯著增加（P＞0.05），處理1～處理4的雙孢蘑菇子實體硒含量無顯著差異（P＞0.05）。以上結果說明覆土中添加硒可以提高雙孢蘑菇子實體的硒含量，但添加的硒濃度低于0.30 mg·kg-1時，子實體中硒含量的增加不明顯。

2.2 不同處理對雙孢蘑菇子實體產量的影響

不同處理對雙孢蘑菇子實體產量的影響見圖1。

圖1 不同處理的雙孢蘑菇子實體產量Fig.1 Yields of fruiting body of Agaricus bisporus in different treatments

由圖1表明，人工添加硒的4個處理中，雙孢蘑菇子實體產量均高于對照處理，其中處理4的產量顯著高于對照（P＜0.05），而處理1～處理3與對照的子實體產量無顯著差異（P＞0.05），說明覆土中添加硒對提高雙孢蘑菇子實體產量有一定作用。

2.3 不同處理對雙孢蘑菇子實體營養成分的影響

不同處理對雙孢蘑菇子實體的營養成分影響見表2。

表2 不同處理對雙孢蘑菇子實體營養成分含量的影響Tab.2 Effect of different treatments content of nutritive components in fruiting body of Agaricus bisporus

由表2可知，隨著人工添加硒含量的增加，雙孢蘑菇子實體蛋白質含量也呈增長趨勢，其中，處理4的子實體蛋白質含量顯著高于對照（P＜0.05），而處理1～處理3與對照的子實體蛋白質無顯著差異（P＞0.05）；人工添加硒處理和對照的子實體中粗脂肪、粗纖維、粗多糖、碳水化合物和氨基酸含量均無顯著差異（P＞0.05）。以上結果說明，雙孢蘑菇覆土中人工添加硒可提高其子實體蛋白質含量，而對粗脂肪、粗纖維、粗多糖、碳水化合物和氨基酸含量無顯著影響。

2.4 不同處理對雙孢蘑菇子實體性狀的影響

不同處理雙孢蘑菇子實體的性狀見表3。

表3 不同處理對雙孢蘑菇子實體性狀的影響Tab.3 Effect of different treatments on fruiting body characters of Agraricus bisporus

由表3可知，不同處理間雙孢蘑菇子實體單朵重和單朵體積均無顯著差異（P＞0.05），而子實體密度隨著覆土中硒添加量的增加呈遞增趨勢，其中處理2～處理4的子實體密度無顯著差異（P＞0.05），但均顯著高于對照（P＜0.05），說明添加硒元素不會影響雙孢蘑菇子實體大小，但可以提高子實體的緊實度。

3 討論與結論

食用菌能將無機硒轉化為安全形態的有機硒，是良好的硒生物轉化載體，其中雙孢蘑菇是富硒能力較強的食用菌品種之一[9]。雙孢蘑菇不僅能吸收富集栽培基質中的硒元素，還能富集覆土中的硒[10]。試驗結果顯示，雙孢蘑菇子實體硒含量隨著覆土硒含量的增加而呈上升趨勢，說明雙孢蘑菇對覆土中的硒有吸收富集作用。但是，各處理覆土中的硒含量與雙孢蘑菇子實體硒含量的協同性不高，前者隨處理濃度增加幅度大，而后者增加幅度小，只有處理3和4的子實體硒含量顯著高于對照，這可能是因為雙孢蘑菇吸收了較多的栽培基質中的硒。研究表明雙孢蘑菇子實體硒含量與培養料中的硒含量呈高度正相關[10]；金順姬等[11]研究也表明，分別在培養料和覆土中添加相同濃度的硒栽培雙孢蘑菇時，前者的子實體硒含量高于后者。說明雙孢蘑菇中的硒主要來源于栽培基質，其次才是覆土材料。

一般認為，硒含量達0.4 mg·kg-1以上的土壤為富硒土壤[10]。廣西富硒土壤資源豐富，其硒含量最高達 2.29 mg·kg-1，但多數土壤硒含量在 1.00 mg·kg-1以下，屬于中等富硒土壤[3，12]。本研究覆土的硒處理濃度設置在 0.15 mg·kg-1～0.60 mg·kg-1的較低濃度范圍，主要是模擬廣西土壤硒含量實際情況。試驗中，各處理的雙孢蘑菇子實體只檢測出有機硒的含量，而無機硒含量未檢出，這可能與施用的硒濃度較低有關。潘亞璐[13]的研究表明，硒處理的濃度為20 mg·kg-1時，雙孢蘑菇子實體總硒含量達 41.59 mg·kg-1，其中有機硒含量占50%以上，隨著硒處理濃度增大，有機硒所占比例逐漸下降。本研究低濃度硒處理下，雙孢蘑菇子實體中硒均為有機態硒，說明低硒處理濃度下，雙孢蘑菇有機硒所占比例更高，與潘亞璐的結論一致。根據全國供銷行業標準（GH/T 1135-2017）富硒農產品的界定，富硒食用菌的適宜硒含量為 0.10 mg·kg-1～5.00 mg·kg-1，試驗中各處理的雙孢蘑菇硒含量范圍為 1.49 mg·kg-1～1.68 mg·kg-1，均符合“富硒農產品”標準要求，對照處理雙孢蘑菇還屬于天然富硒蘑菇產品，這可能與采用的栽培原料來源于本地富硒地區有關[10，14]。開展富硒雙孢蘑菇相關研究時，研究者多采用較高的硒處理濃度[11，13]，雙孢蘑菇子實體硒含量往往超出“富硒農產品”標準要求。硒具有兩面性，含量過高時對生物體有毒害作用[15]，因此，生產富硒雙孢蘑菇時應特別注意控制硒肥的濃度。

添加硒對雙孢蘑菇產量提高有一定作用，其中處理4（添加硒濃度0.60 mg·kg-1）的雙孢蘑菇子實體硒含量和產量均顯著高于對照，而其他加硒處理的雙孢蘑菇子實體硒含量和產量均與對照差異不顯著，產量提高與子實體硒含量升高協同性高，說明提高雙孢蘑菇硒含量有助于其產量的提高。硒元素對秀珍菇 （Pleurotus pulmonarius）[16]、平菇 （Pleurotus ostreatus）[17]等食用菌的增產作用也有報道，但金順姬等[11]研究卻表明，添加硒對雙孢蘑菇產量無影響，可能與其采用的硒濃度范圍（30 mg·kg-1）不同有關。胡婷等[9]認為，富硒食用菌栽培中需要綜合考慮食用菌品種、外源硒的化學形態和硒濃度，以免降低食用菌產量。因此，外源硒對雙孢蘑菇產量的影響還有待作進一步深入研究。

雙孢蘑菇子實體蛋白質含量隨硒處理濃度的增加呈上升趨勢，但只有處理4顯著高于對照，與子實體硒含量的變化高度協同，說明提高雙孢蘑菇子實體硒含量也有利于其子實體蛋白質含量的增加，這與前人研究報道一致[13，16，18-19]。本研究中添加硒對雙孢蘑菇子實體粗脂肪、粗纖維、粗多糖、碳水化合物和氨基酸含量均無顯著影響，而施怡等[17]的結果表明雙孢蘑菇子實體多糖和氨基酸含量隨硒使用濃度的升高而增加，結果的不同可能與本研究采用的硒處理濃度較低有關。本研究中，硒處理對雙孢蘑菇子實體單朵重和單朵大小（體積）無明顯影響，但硒濃度為0.30 mg·kg-1以上的處理，雙孢蘑菇密度顯著高于對照，說明提高硒含量還可使雙孢蘑菇更緊實，提高了雙孢蘑菇的感官品質。

綜上所述，向雙孢蘑菇覆土材料中添加0.15 mg·kg-1～0.60 mg·kg-1濃度的亞硒酸鈉可顯著提高覆土的有效態硒與總硒含量，也提高了雙孢蘑菇子實體有機硒含量，并在一定程度上提高了雙孢蘑菇的產量，改善了雙孢蘑菇的品質。今后有待擴大硒使用濃度范圍作進一步試驗，以獲得最適的硒肥使用濃度。