類風濕因子引起孕婦TSH假性增高1例分析

孟改利 黃彬 王琪 姚倩 謝云

作者單位：710061 西安，西北婦女兒童醫院醫學檢驗中心(孟改利，黃彬，姚倩，謝云)；西安交通大學第二附屬醫院檢驗科(王琪)

甲狀腺刺激素(thyroid-stimulating hormone，TSH)水平在臨床實驗室常采用全自動免疫發光分析法進行測定。然而，在免疫分析中常存在一些干擾因素，如類風濕因子(rheumatoid factor，RF)、自身抗體和嗜異細胞抗體，這些干擾可能導致TSH濃度假性升高，最終導致誤診[1]。研究發現，血清中的RF可導致分析物水平假性升高，包括CA19-9、細胞因子、心肌肌鈣蛋白I和甲狀腺功能[2-5]。本文報告一名孕婦在孕早期接受甲狀腺功能篩查時，其血清中的RF對貝克曼庫爾特DXI800平臺測定造成干擾，導致TSH假性增高。

臨床資料

患者是一名27歲婦女，于2018年4月在西北婦女兒童醫院接受孕早期常規產檢。患者閉經50 d，尿液妊娠試驗呈陽性，此前的醫學檢查未顯示其有關節炎、甲狀腺腫或其他特殊情況。實驗室檢查結果顯示，其血常規、凝血、肝功能、腎功能、心肌酶和血脂水平，均在正常人群的參考范圍內。感染篩查結果顯示，乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、HIV和梅毒均為陰性。除TSH(23.4 mU/L)外，甲狀腺功能的所有結果(貝克曼Coulter Dxi800，美國)均在正常人群的參考范圍內(表1)。根據表1和患者臨床表現，懷疑TSH結果可能存在異常。

表1 患者甲狀腺功能檢測結果

為了驗證這一假設，首先以與患者樣本相同的檢測方式重新檢測質量控制樣本，質控結果與預期一致，表明儀器工作正常。其次，用兩個不同批次的試劑重復分析兩次，得到的TSH濃度分別為22.9 mU/L和24.9 mU/L，仍為高值，表明原始測量值不是儀器測定錯誤。

此前有報道內源性抗體會干擾免疫分析[2-5]。然而，此患者血清中甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)和甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)的水平不足以引起干擾。本研究使用抗核抗體膜條(Omont，德國)測試了15種自身抗體的干擾，但發現所有15種抗體均為陰性(圖1)。然而，患者的RF效價(70.9 U/mL，貝克曼 Coulter AU5800，美國)是正常人群參考范圍(0～30 U/mL)上限的2.4倍。因此，本研究用1∶5和1∶10的RF吸附劑(Wigrun，德國)對患者樣品進行預處理，并使用貝克曼 Coulter Dxi800分析儀再次測量TSH濃度，結果顯示TSH水平(分別為4.9 mU/L和3.0 mU/L)在正常范圍內。

通過使用雅培Architect i2000平臺的比對分析，驗證了用RF吸附劑處理后貝克曼 Coulter Dxi800測量的TSH濃度。有趣的是，對未經處理和預處理的血清(混合1∶5和1∶10 RF吸附劑)樣品進行測試，使用雅培Architect i2000測定TSH水平的差異是極其微小的：未經處理為2.7mU/L，1∶5 RF吸附劑預處理為2.2 mU/L和1∶10 RF吸附劑預處理為2.2 mU/L，這表明RF水平對雅培Architect i2000的TSH檢測基本無干擾。用雅培Architect i2000測量的預處理和未處理樣品顯示，TSH水平都在正常范圍內，與貝克曼 Coulter Dxi800測量的預處理樣品結果一致。以上結果表明，患者的TSH水平正常，患者血清中的RF干擾了貝克曼 Coulter Dxi800的檢測，造成TSH假性增高。

CO：對照；M2：抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)；RIB：核糖體P蛋白；HI：組蛋白；NUC：核小體；DNA：雙鏈DNA；PCNA：增殖細胞核抗原；CB：著絲粒蛋白B(CENP-B)；Jo：Jo-1抗原(組氨酸t-RNA合成酶)；PM：PM/Scl復合物；Scl：拓撲異構酶I(Scl-70)；SSB：干燥綜合征相關抗原B(SS-B)；52：Ro-52；SSA：干燥綜合征相關抗原A(SS-A)；Sm：史密斯抗原；RNP/Sm：非組蛋白核蛋白/Sm復合物。0：陰性，+：陽性。圖1 15種抗核抗體膜條掃描結果

討論

所有基于抗原抗體反應的檢測平臺都會受到分析物以外抗體的干擾，從而導致錯誤結果，給患者和實驗室帶來風險[6]。本病例研究中，貝克曼 Coulter Dxi800測量患者的TSH水平異常增高，需要探尋結果異常的原因。由于患者血清中TPOAb、TGAb和抗核抗體的水平很低或不存在，因而這些干擾被排除。在使用另外兩個不同批次的試劑進行重復檢測后，TSH水平仍保持升高，因試劑因素導致的錯誤也被排除。最后，盡管患者血清中的RF水平僅中度升高，本研究決定將患者血清經RF吸附劑處理后檢測TSH水平，以減少IgG抗體的干擾性。RF是一種能夠橋接捕獲抗體和檢測抗體并抑制抗原和捕獲抗體(或標記抗體)特異性結合的嗜異性抗體，這可能導致免疫測定中檢測值的假性增加[7]。有研究報道在TSH分析中觀察到由異常高水平的RF(>1 400 U/mL)引起的陽性干擾[8]。然而，在這個案例中，RF濃度僅為參考范圍上限的兩倍左右。患者血清經RF吸附劑處理后，TSH濃度明顯下降到正常參考范圍。稀釋5倍后，水平處于正常參考范圍的上限，而用RF吸附劑稀釋10倍后，TSH滴度降低超過87%。本研究結果證實了患者血清樣品中的RF干擾了貝克曼 Coulter Dxi800平臺的TSH檢測，這與此前的研究一致[8]。此外，本研究證明，RF干擾貝克曼 Coulter Dxi800平臺的TSH檢測系統可發生在濃度較低(70.9 U/mL)的水平。

在結果不確定的情況下，有時會使用另一種免疫分析法確認結果的準確性。在本病例中，應用雅培Architect i2000平臺比對測定了該名患者的TSH水平，并驗證了患者血清的TSH濃度水平在正常參考范圍內，這與1∶5和1∶10 RF吸附劑處理血清后貝克曼 Coulter Dxi800測量的結果一致。綜上所述，RF的存在干擾了貝克曼Coulter Dxi800平臺TSH的測定過程，造成結果異常。然而雅培Architect i2000分析儀沒有觀察到這種亞型RF的干擾。可能導致這種差異的原因很多，例如抗體的特定空間結構、其來源的物種、制造商為盡量減少抗體相關干擾而使用的不同的封閉阻斷劑，以及RF亞型的多樣性[9]。

結論

雖然目前的免疫測定中各檢測平臺應用的試劑都制定了阻斷RF抗體干擾的措施，但由于人血清中抗體不可預測的親和能力，試劑組分和血清特殊組分之間的相互作用仍然可能發生。因此，當TSH濃度與患者的臨床表現不一致時，實驗室人員應考慮是否存在干擾，并采用一系列方法找到造成結果異常的干擾因素。如有可能，應采用不同的分析平臺以獲得更加可靠的結果。

志謝：本文患者。