沙門(mén)氏菌的檢測(cè)技術(shù)與方法

劉穎

摘 要：作為一種能夠感染人畜的常見(jiàn)病原菌，沙門(mén)氏菌會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物的傷寒、霍亂病癥，同時(shí)還會(huì)使人類(lèi)換上壞血病、胃腸炎癥等，對(duì)人畜的健康都有著巨大的危害，而因其引發(fā)的食品安全事件更是在近年來(lái)經(jīng)常出現(xiàn)。為此為了保證食品安全就需要對(duì)食品當(dāng)中的沙門(mén)氏菌進(jìn)行快速準(zhǔn)確的檢驗(yàn)，目前生物學(xué)、化學(xué)、物理學(xué)等領(lǐng)域在其檢驗(yàn)方面得到了長(zhǎng)足的發(fā)展，因此沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)已經(jīng)由傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方式演化成為更加高效的方式，其技術(shù)的發(fā)展不僅為未來(lái)沙門(mén)氏菌的檢測(cè)提供了實(shí)用價(jià)值，在發(fā)展方向也能夠起到引領(lǐng)作用，為此本文將對(duì)其進(jìn)行總結(jié)并詳細(xì)描述，以此來(lái)完成未來(lái)發(fā)展的展望。

關(guān)鍵詞：沙門(mén)氏菌;檢測(cè)技術(shù);檢測(cè)方法

1.沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)與方法現(xiàn)狀

1.1傳統(tǒng)方法

在傳統(tǒng)的方法當(dāng)中會(huì)將培養(yǎng)法標(biāo)準(zhǔn)作為基礎(chǔ)，對(duì)沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)及繁殖特性進(jìn)行參考完成相關(guān)檢定方案的測(cè)定，其具體的步驟首先是完成樣品的取樣，此后分別進(jìn)行增菌及繁殖并通過(guò)分離培養(yǎng)的方式來(lái)對(duì)可疑菌落進(jìn)行識(shí)別，在識(shí)別可疑菌落后對(duì)其進(jìn)行采樣并落實(shí)生化實(shí)驗(yàn)及血清學(xué)的鑒定。通過(guò)這樣的步驟能夠保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，且其檢測(cè)結(jié)果也已經(jīng)經(jīng)過(guò)了無(wú)數(shù)次的驗(yàn)證。目前十分廣泛地應(yīng)用在食品及藥品的沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)當(dāng)中，在需要進(jìn)行沙門(mén)氏菌法定仲裁時(shí)也是多使用此方式。但是在進(jìn)行疫情及疾病的防護(hù)時(shí)往往對(duì)時(shí)效有著較為嚴(yán)苛的要求，希望能夠在最短的時(shí)間內(nèi)得出檢測(cè)結(jié)果，此時(shí)傳統(tǒng)方式的4-7天顯然不符合要求，為此對(duì)同樣準(zhǔn)確且高效的檢驗(yàn)方法進(jìn)行研究很有必要[1]。

1.2免疫分析方法

沙門(mén)氏菌的免疫分析檢測(cè)技術(shù)建立在免疫學(xué)的理論之上，其主要是利用抗體與抗原之間反應(yīng)的特異性并使用免疫放大技術(shù)來(lái)完成沙門(mén)氏菌的鑒別。通常情況下免疫分析方法能夠劃分成為標(biāo)記免疫分析方法及非標(biāo)機(jī)免疫分析方法兩種形式，眼前得到實(shí)際應(yīng)用的方法分別由酶聯(lián)免疫吸附、免疫熒光法及同位素標(biāo)記法作為操作基礎(chǔ)，而使用的具體技術(shù)則有免疫傳感器技術(shù)、乳膠凝集技術(shù)及免疫印跡技術(shù)等。

1.3分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用在沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)當(dāng)中時(shí)其原理是對(duì)特異性的核算序列進(jìn)行比較，以此完成不同物種、同物種不同個(gè)體的差異分析。目前較為常見(jiàn)的檢測(cè)技術(shù)由熒光定量PCR技術(shù)、基因芯片技術(shù)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)等，同時(shí)還有將測(cè)序技術(shù)作為根本的檢測(cè)方式，上述技術(shù)在靈敏度、特異性及精準(zhǔn)度上都有著一定的優(yōu)勢(shì)，因此在現(xiàn)實(shí)工作當(dāng)中已經(jīng)得到了一定的應(yīng)用，但是其在操作人員及使用儀器上都有著一定的門(mén)檻，因此始終無(wú)法在基層得到普及[2]。

2.新型技術(shù)應(yīng)用與展望

2.1納米技術(shù)應(yīng)用

使用納米技術(shù)對(duì)沙門(mén)氏菌進(jìn)行測(cè)定的傳感器為微流體納米生物傳感器，其在原理方面是通過(guò)量子點(diǎn)檢測(cè)的方式來(lái)統(tǒng)計(jì)沙門(mén)氏菌細(xì)胞的數(shù)量，同時(shí)將其固定在量子點(diǎn)的表面，分離、富集方式則是通過(guò)磁性顆粒及控制芯片來(lái)完成的。而在使用熒光儀對(duì)其進(jìn)行觀(guān)測(cè)時(shí)則能夠找出納米顆粒當(dāng)中的熒光信號(hào)點(diǎn)數(shù)量，其熒光相應(yīng)數(shù)量會(huì)隨著細(xì)胞濃度的增加而不斷上升。在目前進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中使用的是雞肉及經(jīng)過(guò)連續(xù)稀釋的沙門(mén)氏菌硼酸鹽緩沖液作為研究對(duì)象，能夠發(fā)現(xiàn)在二者之中的沙門(mén)氏菌檢測(cè)限度均為103cfu/ml。同時(shí)也是通過(guò)這一實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)納米技術(shù)與生物傳感器能進(jìn)行較好的結(jié)合，且在生物傳感器未來(lái)的發(fā)展上也是具有較為清晰的路線(xiàn)的。納米生物技術(shù)制成的傳感器不僅有著很高的靈敏度，其在體積上也是更加輕便便于攜帶的，因此在食品、環(huán)境的檢測(cè)當(dāng)中有很大的利用價(jià)值[3]。

2.2生物傳感器技術(shù)

使用光學(xué)顯微成像系統(tǒng)與免疫傳感器相結(jié)合的技術(shù)能夠快速的對(duì)食品當(dāng)中存在的沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢驗(yàn)，在實(shí)際的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中對(duì)103cfu/25g的雞肉樣品進(jìn)行檢驗(yàn)既能夠完成樣品沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)，由此能夠發(fā)現(xiàn)此檢測(cè)方式的靈敏度相對(duì)較高。同時(shí)在生物傳感器技術(shù)當(dāng)中其能夠發(fā)揮出的優(yōu)點(diǎn)還體現(xiàn)在計(jì)數(shù)準(zhǔn)確及便于觀(guān)察方面，在將其與光學(xué)顯微成像技術(shù)進(jìn)行結(jié)合后能夠發(fā)現(xiàn)其優(yōu)勢(shì)更是體現(xiàn)在敏銳及實(shí)用方面。例如在實(shí)驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中已經(jīng)能夠建立基于 3-吡咯羧基多聚物適配體的阻抗傳感器，其傳感器類(lèi)型屬于非標(biāo)機(jī)傳感器，且在鼠傷寒沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)當(dāng)中被證明有效。其原理是通過(guò)適配體及靶標(biāo)物之間的3-吡咯羧基多聚物內(nèi)部效應(yīng)及相關(guān)的電學(xué)屬性相互作用來(lái)對(duì)阻抗進(jìn)行測(cè)定的，在具體的濃度范圍上數(shù)值為102-108cfu/ml，同時(shí)此檢測(cè)方式兼具經(jīng)濟(jì)性及效率[4]。

2.3研究結(jié)論及展望

目前對(duì)于沙門(mén)氏菌研究的關(guān)注度正在不斷提升，為此其在檢測(cè)技術(shù)及檢測(cè)方法上都得到了長(zhǎng)遠(yuǎn)的進(jìn)步，作為常用檢測(cè)方法的傳統(tǒng)檢測(cè)法、免疫學(xué)檢測(cè)法及分子生物學(xué)檢測(cè)法更是得到了廣泛的應(yīng)用，目前國(guó)際官方分析化學(xué)家協(xié)會(huì)、美國(guó)食品藥品監(jiān)督局、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織等仍然是將生物培養(yǎng)法作為檢測(cè)沙門(mén)氏菌的黃金標(biāo)準(zhǔn)，該方法在成本及硬件條件要求上相對(duì)較低，同時(shí)其也是各種檢測(cè)方法的基礎(chǔ)，但是其也存在著一定的弊端，例如無(wú)法按照時(shí)效完成食品安全性的評(píng)價(jià)，因此在未來(lái)的發(fā)展當(dāng)中必然會(huì)隨著時(shí)間的推移被淘汰，由此可知對(duì)沙門(mén)氏菌的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步的研究是很有必要的[5]。

結(jié)語(yǔ)：

不同的檢測(cè)方法都會(huì)有自身的優(yōu)點(diǎn)及不足，當(dāng)前新式的沙門(mén)氏菌檢測(cè)方法是通過(guò)結(jié)合兩種或以上的方式共同使用以達(dá)到取長(zhǎng)補(bǔ)短的目的，而隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展大量的新型材料應(yīng)用其中，例如本文提及的納米材料就是很好的范例。而在技術(shù)層面上例如傳感器技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)的結(jié)合也幫助沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)得到了很大程度上的提升。新技術(shù)雖然有一定存在的價(jià)值，但是其在成本及技術(shù)需求上也是始終居高不下，這樣的問(wèn)題使得其僅僅能夠在實(shí)驗(yàn)室或大型食品企業(yè)當(dāng)中完成。但是在不久的將來(lái)相信會(huì)有更多的新興技術(shù)以更強(qiáng)的靈敏度及精準(zhǔn)度出現(xiàn)在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中，且在造價(jià)方面也會(huì)更加低廉使得大量的食品企業(yè)都能夠得以普及，幫助完成沙門(mén)氏菌并的控制與預(yù)防。

參考文獻(xiàn)：

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[2]李杰，丁承超，翟續(xù)昭，王廣彬，劉武康，曾海娟，王淑娟，孫靜娟，董慶利，劉箐.沙門(mén)氏菌檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].微生物學(xué)雜志，2017，37（04）：126-132.

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