黑江榮，解雁飛，張利平

延安大學附屬醫院產科，陜西 延安 716000

宮頸癌是發生在子宮頸部的惡性腫瘤，作為婦科常見腫瘤其發病率居第二位，且呈不斷上升趨勢，逐漸成為威脅女性生命安全的重要疾病。有研究顯示，人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是引發宮頸癌的重要因素，高危型HPV長期持續感染是誘發和加速宮頸細胞惡性轉化的重要原因。但宮頸癌的發生是多種因素共同作用的結果，僅感染HPV常不足以進展為宮頸癌，感染高危型HPV后引起的機體免疫功能改變、宮頸病變轉歸和微環境改變均是促進癌變的重要因素。機體免疫調控機制較為復雜，免疫細胞與局部微環境之間相互制約、相互調節，當機體免疫功能下降時，無法清除體內HPV，使機體長期處于HPV感染狀態使得病情逐漸發展為宮頸癌。因此，對宮頸癌患者HPV水平與宮頸局部免疫功能的相關性進行研究，可為早期預防和診斷宮頸癌提供科學依據?；诖耍狙芯刻接慔PV水平與宮頸局部免疫功能對高危型HPV感染宮頸癌患者的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2019年7月至2020年9月于延安大學附屬醫院就診的宮頸癌患者、慢性宮頸炎患者和宮頸上皮內瘤變患者的病歷資料。納入標準：①宮頸癌和宮頸上皮內瘤變患者均經病理組織檢查確診；②均經熒光定量聚合酶鏈反應（quantitative polymerase chain reaction，qPCR）確診感染HPV；③均有性生活史；④臨床資料完整。排除標準：①伴有嚴重的肝腎損傷和凝血功能異常；②合并其他惡性腫瘤；③納入研究前3個月內進行過免疫治療或放化療；④妊娠期或哺乳期婦女；⑤有嚴重內外科疾病；⑥納入研究前3天進行過陰道用藥或性生活；⑦有精神疾病或認知障礙難以配合研究。根據納入、排除標準，共納入76例宮頸癌患者（宮頸癌組）、40例慢性宮頸炎患者（慢性宮頸炎組）和40例宮頸上皮內瘤變患者（宮頸上皮內瘤變組）。宮頸癌組患者，年齡 25～57歲，平均（42.37±4.96）歲；體重指數（body mass index，BMI）為（23.37±1.12）kg/m。慢性宮頸炎組患者，年齡25～56歲，平均（41.97±5.05）歲；BMI為（23.41±1.20）kg/m。宮頸上皮內瘤變組患者，年齡25～57歲，平均（42.20±4.92）歲；BMI為（23.35±1.23）kg/m。3組患者年齡、BMI比較，差異均無統計學意義（

P

＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批通過。

1.2 檢測方法

HPV水平檢測：在所有患者入院后采集樣本，用無菌擴陰器撐開患者陰道使宮頸充分暴露后，用棉簽擦拭去宮頸處分泌物，用HPV宮頸刷沿宮頸口順時針旋轉取樣，旋轉5圈左右并稍作停留后取出，折斷刷柄保存在專用細胞保存液取樣管中，蓋好管蓋，樣本保存在4℃左右環境中待檢。按照試劑盒說明書抽提mRNA和反轉錄合成cDNA，利用qPCR檢測步驟測定

HPV

-DNA。

宮頸局部免疫功能檢測：在所有患者入院后采用無菌刷子采集患者宮頸內口分泌物8 ml于無菌試管中。應用流式細胞檢測儀檢測患者宮頸局部免疫功能指標水平，包括 CD4、CD8、CD4/CD8、CD56和調節性T細胞（Treg）水平。

1.3 觀察指標

①比較3組患者免疫功能指標水平和HPV水平。②比較有無淋巴結轉移組宮頸癌患者的免疫功能指標水平。③比較死亡組和生存組宮頸癌患者免疫功能指標水平。④分析HPV水平與各免疫功能指標之間的關系。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 免疫功能指標和HPV水平的比較

宮頸癌組患者HPV、CD8和Treg水平最高，宮頸上皮內瘤變組患者次之，慢性宮頸炎組患者最低，差異均有統計學意義（

P

＜0.05）；宮頸癌組患者CD4、CD4/CD8、CD56水平最低，宮頸上皮內瘤變組患者次之，慢性宮頸炎組患者最高，差異均有統計學意義（

P

＜0.05）。（表1）

表1 3組患者免疫功能指標和HPV水平的比較（±s）

2.2 有無淋巴結轉移患者HPV和免疫功能指標水平的比較

淋巴結轉移宮頸癌患者CD4、CD4/CD8、CD56水平均低于無淋巴結轉移患者，HPV、CD8、Treg水平均高于無淋巴結轉移患者，差異均有統計學意義（

P

＜0.05）。（表2）

表2 有無淋巴結轉移宮頸癌患者HPV和免疫功能指標水平的比較（±s）

2.3 死亡患者與生存患者HPV和免疫功能指標水平的比較

死亡宮頸癌患者CD4、CD4/CD8、CD56水平均低于生存患者，HPV、CD8和Treg水平均高于生存患者，差異均有統計學意義（

P

＜0.05）。（表3）

表3 死亡和生存宮頸癌患者HPV和免疫功能指標水平的比較（±s）

2.4 HPV與各免疫功能指標的相關性分析

經 Pearson 相關性分析，CD4、CD4/CD8和CD56與HPV水平均呈負相關（

r

=-0.48、-0.35、-0.40，

P

＜0.05），CD8、Treg與HPV水平均呈正相關（

r

=0.45、0.26，

P

＜0.05）。

3 討論

宮頸癌的發生發展包括癌前病變、早期浸潤癌和浸潤癌三個階段，持續感染高危型HPV會引起上皮內瘤變，若繼續感染下去，可能進展為宮頸癌，但該過程時間較長，大約需要10年左右。因此在宮頸癌早期進行檢測和預防，對于改善預后具有重要意義。免疫系統在腫瘤發生發展中具有重要作用，機體感染HPV后，通過免疫系統可有效清除體內HPV，該過程主要包括T細胞介導的細胞免疫和漿細胞抗體介導的體液免疫。有研究顯示，高危型HPV感染患者病變早期，機體全身免疫功能并未出現明顯改變，但病變局部已存在免疫抑制?？赡苁且驗镠PV感染不是全身的，不會通過血液傳播，因此宮頸局部免疫狀態與全身免疫狀態不一致。

本次研究結果顯示，宮頸癌組患者HPV、CD8和Treg水平最高，宮頸上皮內瘤變組患者次之，慢性宮頸炎組患者最低，差異均有統計學意義；宮頸癌組患者CD4、CD4/CD8、CD56水平最低，宮頸上皮內瘤變組患者次之，慢性宮頸炎組患者最高，差異均有統計學意義。表明宮頸癌患者HPV水平呈高表達，宮頸局部免疫功能明顯降低，且隨著病變程度增加，患者免疫功能呈降低趨勢。由T淋巴細胞介導的細胞免疫在HPV拮抗中具有重要作用。其中CD4和CD8是該環節的重要細胞因子，其中CD4是輔助性T細胞標志，可提高患者免疫力，殺傷腫瘤細胞，CD8在免疫過程中起負調控作用。CD4和CD8共同調節機體免疫應答，CD4/CD8水平可反映機體免疫功能水平。CD56是自然殺傷（natural killer，NK）細胞的標志物，可抑制和殺傷腫瘤細胞。Treg可明顯抑制機體免疫功能，幫助腫瘤細胞逃脫免疫系統的監視作用。因此其水平較高表明免疫抑制作用較強，腫瘤細胞易在機體聚集，造成持續感染。在淋巴結轉移宮頸癌患者中CD4、CD4/CD8、CD56水平均低于無淋巴結轉移患者，HPV、CD8、Treg水平均高于無淋巴結轉移患者，差異均有統計學意義。表明發生淋巴結轉移患者免疫功能較無淋巴結轉移患者更低，HPV感染程度更高，這與武麗蕊等的研究結果基本一致。死亡宮頸癌患者 CD4、CD4/CD8、CD56水平均低于生存患者，HPV、CD8和Treg水平均高于生存患者，差異均有統計學意義。表明隨著病情進展，患者免疫功能呈不斷下降趨勢，進一步促進了腫瘤細胞的增殖和轉移。由于宮頸局部免疫功能降低導致宮頸抗瘤和促瘤平衡被打破，對宮頸癌發展產生促進作用。經 Pearson 相關性分析，CD4、CD4/CD8和CD56水平與HPV水平呈負相關，CD8、Treg與HPV水平呈正相關。表明患者HPV水平受宮頸局部免疫功能影響，高危型HPV患者免疫功能降低是促進宮頸癌發生的重要原因。綜上所述，高危型HPV感染宮頸癌患者HPV水平呈異常高表達且患者宮頸局部免疫功能明顯降低，是導致患者持續感染高危型HPV和加重宮頸病變的重要原因。