南江黃羊生長性能研究進(jìn)展

何向東

（四川省巴中市南江黃羊科學(xué)研究所，四川 巴中636600）

南江黃羊被毛黃色，沿背脊有一條明顯的黑色背線，富有光澤，耳大微垂，體格高大，前胸深寬，四肢粗長，結(jié)構(gòu)勻稱。公羊前胸、頸肩、腹部被毛黑而長，母羊顏面清秀。南江黃羊是以成都麻羊和努比山羊的雜交后代為父本，與金堂黑山羊、本地山羊雜交，以南江縣北極種畜場(chǎng)和元頂子牧場(chǎng)為基地，進(jìn)行不斷選育，最終形成我國第一個(gè)肉用山羊新品種。因該品種被毛黃色、主產(chǎn)在四川省南江縣，因此被命名為“南江黃羊”。該品種肉質(zhì)鮮嫩，營養(yǎng)豐富，膽固醇含量低，板皮品質(zhì)優(yōu)良，質(zhì)地柔軟，彈性較好，因此，深受消費(fèi)者喜愛。南江黃羊具有體重體格大、生長發(fā)育快、產(chǎn)肉性能好、繁殖力高、適應(yīng)性強(qiáng)、羊肉品質(zhì)好的特點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于與其它品種羊進(jìn)行改良，并得到好的生產(chǎn)性能效果。目前，南江黃羊現(xiàn)已基本推廣到全國各省區(qū)。目前對(duì)南江黃羊生長特性的研究進(jìn)展主要集中在放養(yǎng)模式與品種改良、日糧補(bǔ)充物、分子調(diào)控機(jī)制的研究。

1 放養(yǎng)模式與品種改良

研究表明，在舍飼條件下南江黃羊在早期隨著年齡的增加而增重速度加快，2月齡前增重速度最快；3～4月齡生長較慢、5～6月齡增重恢復(fù)出現(xiàn)，其中6月齡南江黃羊體重和屠宰率均增加，說明南江黃羊快長系隨著選育的加強(qiáng)，早期產(chǎn)肉性能不斷提高，這為今后南江黃羊品種優(yōu)良化提供了思路。南江黃羊放牧與圈養(yǎng)條件下的胴體品質(zhì)比較分析發(fā)現(xiàn)，圈養(yǎng)組肌肉總氨基酸和其中的賴氨酸等含量均顯著高于放牧組(P＜0.05)。說明圈養(yǎng)比放牧更加適合飼養(yǎng)南江黃羊。也有研究表明，“放牧”和“補(bǔ)飼”相結(jié)合，尤其是在羔羊處于哺乳期和斷奶過渡期進(jìn)行補(bǔ)飼，可使南江黃羊生長速度顯著加快。

南江黃羊繁殖性能強(qiáng)，是經(jīng)我國培育唯一的優(yōu)良肉用山羊新品種，通過雜交以改良其它山羊品種效果顯著。南江黃羊與其它本地羊雜交以后，雜交優(yōu)勢(shì)明顯，在屠宰率、凈肉率、胴體產(chǎn)肉率等方面均有所提高。貴州黑山羊耐粗飼，適應(yīng)性強(qiáng)，然而該山羊個(gè)體小，生長速度慢，因此，為了提高貴州黑山羊生長性能和產(chǎn)肉性能，將南江黃羊與貴州黑山羊雜交改良，發(fā)現(xiàn)雜交后代的屠宰率、凈肉率、胴體產(chǎn)肉率和肉骨比均明顯高于同齡貴州黑山羊。以處于高寒地區(qū)的青海省貴南縣本地山羊?yàn)槟副荆辖S羊?yàn)楦副具M(jìn)行雜交，發(fā)現(xiàn)6月齡雜交后代山羊的體高、體長和胸圍顯著高于本地羊（P＜0.05）；初生重、1月齡、3月齡和6月齡體重分別極顯著高于本地山羊（P＜0.01）；波爾山羊體格大、體形較豐滿、抗性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，以波爾公山羊?yàn)楦副荆辖S羊?yàn)槟副具M(jìn)行雜交，發(fā)現(xiàn)雜交后代的初生重極顯著地高于同期出生的南江黃羊羔羊(P＜0.01)，同時(shí)雜交后代的公、母羊2、4、6月齡的體重、日增重和舍飼育肥均顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)高于同期出生的南江黃羊。波爾山羊與南江黃羊雜交一代羊、南江黃羊出生到6月齡的生長發(fā)育和190日齡的屠宰為研究指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，在青海高寒牧區(qū)嚴(yán)酷的生態(tài)環(huán)境條件下，波爾山羊與南江黃羊雜交一代羊和南江黃羊生長發(fā)育快于藏系綿羊，6月齡公、母羊活重極顯著高于藏系綿羊（P＜0.01）；體長、體高、胸圍均極顯著大于藏系綿羊（P＜0.01）；產(chǎn)肉性能和胴體品質(zhì)均優(yōu)于藏系綿羊。波爾山羊與南江黃羊雜交一代羊和南江黃羊公、母羊胴體重、屠宰率、凈肉重和凈肉率比極顯著高于藏系綿羊（P＜0.01），同時(shí)，眼肌面積大于藏系綿羊。

2 日糧補(bǔ)充物

日糧是指動(dòng)物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需要，提供給1頭（只）動(dòng)物24h的所有飼料，即以1頭（只）動(dòng)物24h的營養(yǎng)需要為基礎(chǔ)供給的飼料總和。為了提高南江黃羊生長特性，在日糧中添加了補(bǔ)充物，以促進(jìn)羊的生長特性。

2.1 銀合歡銀合歡是一種生長在亞熱帶和熱帶的植物，其葉中蛋白含量高，可達(dá)20%以上，有著“蛋白質(zhì)庫”的美譽(yù)。在精料中添加20%的氨化或風(fēng)干銀合歡葉粉替代部分常規(guī)蛋白原料，結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，精料中添加氨化或風(fēng)干銀合歡葉粉（試驗(yàn)組）對(duì)南江黃羊均無不良癥狀；試驗(yàn)組南江黃羊提高了日增體質(zhì)量，日糧料重比最低。血常規(guī)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，氨化銀合歡組白蛋白水平顯著提高(P＜0.05)。這表明，飼喂20%的氨化銀合歡葉粉配制的精料可提高日糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化率和蛋白質(zhì)利用效率以改善其生長性能。

2.2 硒在基礎(chǔ)日糧相同的日糧中添加0.15mg/kg的硒（試驗(yàn)組）與對(duì)照組相比，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組每只增重和平均日增重顯著高于對(duì)照組，說明日糧中添加硒可提高南江黃羊的生長性能，而且日糧中添加硒以飼養(yǎng)南江黃羊斷奶羔羊進(jìn)行育肥有廣闊的前景。在基礎(chǔ)日糧相同的情況下，試驗(yàn)組日糧中添加含Se0.15mg/kg、Fe60mg/kg、Zn40mg/kg，所選添加制劑均先均勻混合到混合精料中，接下來飼喂生長發(fā)育正常的3～4月齡斷奶南江黃羊公羊，結(jié)果表明硒、鐵、鋅是促進(jìn)羔羊生長發(fā)育的重要營養(yǎng)物質(zhì)，具有促生長和提高畜禽生產(chǎn)性能的作用。

2.3 稀土混合物

試驗(yàn)組日糧分別添加69、138、207mg稀土混合物，試驗(yàn)組日增重、飼料增重比均顯著高于對(duì)照組。結(jié)果表明，稀土混合物可改善南江黃羊生長性能，促進(jìn)其生長代謝，提高其抗氧化能力。其中，添加69mg稀土混合物促生長效果最為顯著。

以上方法均采用傳統(tǒng)營養(yǎng)的方式對(duì)南江黃羊生長性能進(jìn)行了研究，為了進(jìn)一步研究日糧補(bǔ)充物對(duì)南江黃羊生長性能的影響，可采用分子營養(yǎng)的方式進(jìn)行繼續(xù)探討，以便更加精確研究其營養(yǎng)代謝分子機(jī)制。

3 分子調(diào)控機(jī)制

哺乳動(dòng)物生長性能是一個(gè)極其復(fù)雜的生物學(xué)過程，其會(huì)涉及基因和蛋白表達(dá)、信號(hào)通路的激活與沉默等調(diào)控過程。

3.1 基因單核苷酸多態(tài)性

目前，對(duì)南江黃羊生長性能主要集中于基因單核苷酸多態(tài)性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP)的研究。南江黃羊、簡州大耳羊、美姑山羊、藏山羊、川南黑山羊共5個(gè)山羊品種為試驗(yàn)材料，（1）研究南江黃羊瘦素（Leptin，LEP）基因單核苷酸多態(tài)性（Single Nucleotide Polymorphism，SNP)，并分析SNP位點(diǎn)與生長性狀的關(guān)聯(lián)性，發(fā)現(xiàn)LEP基因在117 T＞C位點(diǎn)，TT基因型個(gè)體24月齡體重和胸圍顯著高于CC基因型個(gè)體(P＜0.05)。在1642 G＞A和2883 G＞A位點(diǎn)的GG基因型個(gè)體在出生重和2月齡體重顯著高于AA基因型或GA基因型個(gè)體(P＜0.05)。在3053 T＞C和3190 G＞A位點(diǎn)，突變純合基因型個(gè)體的24月齡體長顯著高于其他基因型個(gè)體(P＜0.05)。在3314 T＞C位點(diǎn)，TT型個(gè)體出生體重顯著高于其它兩種基因型個(gè)體(P＜0.05)，而CC型個(gè)體在6月齡體長和體高顯著高于TC型(P＜0.05)。基因型關(guān)聯(lián)分析表明：攜帶H2H3基因型個(gè)體初生重和2月齡體重最高，其他所有生長性狀中表現(xiàn)最好是攜帶H1H5基因型的個(gè)體。（2）南江黃羊生長激素基因SNP多態(tài)性與體尺體重性狀的相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，AA基因型個(gè)體平均體重極顯著小于群體均值(P＜0.01)，AB型個(gè)體平均體重極顯著大于AA型、BB型和群體均值(P＜0.01)。AA型體長極顯著大于BB型和群體均值(P＜0.01)。AB型體高和胸圍顯著大于其它兩種基因型和群體均值(P＜0.05)。體重和體尺性狀的變異度AB型和BB型大于AA型。這說明，雜合基因型對(duì)羊性狀具有優(yōu)良作用。（3）在骨骼肌的生成過程中，細(xì)胞在分子調(diào)控機(jī)制的作用下，最終分化形成肌肉組織結(jié)構(gòu)。MRF基因家族對(duì)骨骼肌在時(shí)間和空間發(fā)育的有序進(jìn)行等均經(jīng)復(fù)雜的信號(hào)通道系統(tǒng)進(jìn)行精確的調(diào)控。MRF基因家族包括生肌決定因子(myogenic determining factor，MyoD)、肌細(xì)胞生成素(MyoG)、生肌調(diào)節(jié)因子5(Myf5)、生肌調(diào)節(jié)因子4(MRF4)，共4種調(diào)節(jié)因子。以上4個(gè)成員在肌肉發(fā)育過程中扮演不同的角色，共同調(diào)控肌肉發(fā)育。Myf5和MyoD基因主要在肌肉發(fā)育起始和成肌細(xì)胞增殖過程中表達(dá)；MyoG基因在分化末期表達(dá)量最高，參與整個(gè)肌肉發(fā)育過程；而Myf6基因主要在動(dòng)物出生后表達(dá)。以南江黃羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)材料。分別在出生后0d、15d、30d、60d、90d、和120d時(shí)采取不同肌肉組織的半鍵肌、半膜肌、背最長肌、股四頭肌和臀中肌。在肌肉組織中分離克隆得到以上山羊4個(gè)基因的序列，然后使用RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)山羊不同基因家族在不同肌肉不同發(fā)育階段的相對(duì)表達(dá)量。Myf5基因的表達(dá)量峰值出現(xiàn)在15d和120d，而Myf6基因表達(dá)峰值出現(xiàn)在90d。MyoD基因的表達(dá)峰值出現(xiàn)在0d，隨后基因表達(dá)量下調(diào)并維持穩(wěn)定。MyoG基因的表達(dá)在南江黃羊不同肌肉組織發(fā)育時(shí)期沒有顯著性差異。（4）南江黃羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，以生長激素（Growth Hormone，GH）基因?yàn)楹蜻x基因，利用PCR-SSCP技術(shù)和DNA序列分析技術(shù)篩選其多態(tài)位點(diǎn)，并與南江黃羊的生長性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，以期篩選與南江黃羊生長性狀相關(guān)的分子標(biāo)記。比對(duì)序列分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GH基因外顯子4有個(gè)4 SNPs分別為27 G/A、68 C/A、136 G/A、170 C/T)，其中有3個(gè)SNPs引起了氨基酸替代。外顯子4多態(tài)與初生重、2月齡體重、6月齡體重和部分體尺指標(biāo)顯著相關(guān)(P＜0.05)；FF基因型是初生重、2月、6月齡體重、2月齡體長和2月齡胸圍的有利基因型。這說明，GH基因外顯子4的多態(tài)性作為南江黃羊生長性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，但還需要在南江黃羊群體中進(jìn)一步的驗(yàn)證，以確定調(diào)控生長性能的分子機(jī)制。采用PCR-SSCP方法檢測(cè)405只南江黃羊GH基因外顯子3多態(tài)性并與生長性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，南江黃羊GH基因第1161處堿基發(fā)生了G→A突變的同義突變；第1171位點(diǎn)堿基發(fā)生G→A突變引起了GH激素第89個(gè)氨基酸由絲氨酸替代甘氨酸。其對(duì)初生重、2月齡體長、2月齡胸圍、6月齡體重、6月齡體長、6月齡體高、6月齡胸圍、12月齡體長和12月齡胸圍的影響不顯著；對(duì)2月齡體重和體高、12月齡體重和體高的影響顯著高于基因型BB所對(duì)應(yīng)2月齡體高顯著高于基因型AA；基因型AA和BB所對(duì)應(yīng)的2月齡體重、12月齡體重和體高均顯著高于基因型CC和基因型AC。因此，這表明利用該位點(diǎn)的多態(tài)對(duì)南江黃羊生長性狀進(jìn)行標(biāo)記可進(jìn)行輔助選擇。南江黃羊A-FABP基因第3內(nèi)含子和第4外顯子序列上分別發(fā)現(xiàn)T143C和T546C，后一個(gè)位點(diǎn)為同義突變，這2處突變各自產(chǎn)生3種基因型CC、TC和CC。關(guān)聯(lián)分析顯示T143C位點(diǎn)TC基因型成年公羊個(gè)體胸圍顯著長于TT；T546C位點(diǎn)CC基因型公羊個(gè)體的周歲體長顯著長于IT基因，TC基因型母羊個(gè)體的6月齡胸圍顯著長于CC基因，其余生長性狀在不同基因型個(gè)體間差異不顯，表明南江黃羊A-FABP基因第3內(nèi)含子和第4外顯子多態(tài)性可能對(duì)個(gè)體生長性狀有影響。在南江黃羊群體中共發(fā)現(xiàn)ARHGAP11A基因SNPs位點(diǎn)，g.3483A＞G和g.3621G＞A的純合突變具有增加南江黃羊體重(2月齡、6月齡和12月齡)以及胸圍(6月齡)指標(biāo)的趨勢(shì)(P＞0.05)，而在3525 A＞G位點(diǎn)AG型羊初生重、12月齡體重和12月齡胸圍顯著高于GG型個(gè)體(P＜0.05)。AAGT單倍型山羊體重體尺均高于AGGT和GGAT個(gè)體(P＞0.05)。南江黃羊母羊群體中ARHGAP11A基因突變與生長發(fā)育密切相關(guān)，表明在后期選育中可考慮其作為輔助選擇進(jìn)行標(biāo)記。心肌細(xì)胞增強(qiáng)因2（Myocyte enhancer factor 2，MEF2）通過轉(zhuǎn)錄途徑在細(xì)胞分化和發(fā)生中起調(diào)控作用，進(jìn)一步增強(qiáng)動(dòng)物的發(fā)育。MEF2尤其是MEF2C（肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C）突變與家畜生長之間有關(guān)聯(lián)，為了探討南江黃羊MEF2C的SNP，發(fā)現(xiàn)76303 A＞G，143180 T＞G，176090 A＞G和176845 T＞C與山羊生長顯著相關(guān)，并且體重增速最快與143180 T＞G相關(guān)，這些結(jié)果表明MEF2C與動(dòng)物發(fā)育之間的密切關(guān)系，闡明MEF2C可作為促進(jìn)哺乳動(dòng)物生長提供了重要的研究理論。這說明南江黃羊生長性能的分子調(diào)控主要集中于SNP研究，然而某基因、信號(hào)通路等對(duì)脂肪沉積、屠宰率、凈肉率、胴體產(chǎn)肉率等研究還甚少，可在這些方面作進(jìn)一步研究，以探討南江黃羊生長性能分子調(diào)控機(jī)制。

4 總結(jié)

南江黃羊具有體重體格大、生長發(fā)育快、產(chǎn)肉性能好、繁殖力高、適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，深受畜牧業(yè)青睞。目前，集中于放養(yǎng)模式與品種改良、日糧補(bǔ)充物、分子調(diào)控機(jī)制對(duì)南江黃羊生長性能的影響，在一定程度上探討了南江黃羊生長特性，對(duì)南江黃羊發(fā)展取得了重要研究成果，然而，如何精準(zhǔn)從分子層面探討南江黃羊生長特性的研究，還知之甚少。