潰瘍性結直腸炎患者腸道菌群、炎性因子變化及相關性分析

左二訊 劉輝

(1. 河南科技大學第一附屬醫院消化內科，河南 洛陽 471000；2. 洛陽市中心醫院超聲科，河 南洛陽471000)

潰瘍性結腸炎屬于非特異性慢性腸道疾病，同時也屬于較為常見的胃腸道炎性疾病，多出現炎癥或潰瘍現象，可累及直腸及遠端結腸，臨床多表現為腹瀉、腹痛、血便等癥狀。臨床對于潰瘍性結腸炎的發病機制并不完全清楚，但有研究認為潰瘍性結腸炎的發作主要與環境、遺傳、機體免疫功能以及腸道菌群有關[1]。

腸道內存在細菌群體，正常情況下參與腸道內物質的分解、代謝，維持腸道正常生理功能以及免疫系統的穩定、抑制疾病的發生發展。當處于慢性疾病狀態下，菌群數量、種類會出現，可能參與內源性腸道感染的啟動和免疫系統的抑制等[2]。對此，本研究對潰瘍性結直腸炎患者腸道菌群、炎性因子變化及相關性進行分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2020年7月于我院救治的122例潰瘍性結直腸炎患者為此次研究對象，根據分組時患者病情將其分為活動組（n=75）以及緩解組（n=47）；其中活動組女36例，男39例；平均年齡為（36.69±6.78）歲。緩解組女20例，男27例；平均年齡為（56.78±6.49）歲。

納入標準：（1）經過臨床檢查，所有患者均符合《潰瘍性結腸炎中西醫結合診療共識意見（2017年）》中潰瘍性結腸炎臨床診斷標準[3]；（2）全程在本院治療且臨床資料完整；（3）患者及家屬均知情并同意參與本研究。排除標準：（1）中途退出研究者；（2）患有其他感染性腸道疾病者；（3）精神疾病或存在相關家族史，不能配合本研究者。

另選取同時間在我院進行健康體檢者62例設為對照組，男30例，女32例，平均年齡為（37.13±6.36）歲，將三組資料進行比較無明顯差異，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

取所有患者0.5 g的糞便，放入含有4.5 mL稀釋液的小瓶內，將混合器設置為300 rpm將其震蕩1 min。后使用稀釋液根據10倍稀釋法將其稀釋至10-8后，取10 μL進行接種，需氧培養基培養大腸桿菌、腸球菌，厭氧培養基培養乳酸桿菌、雙歧桿菌，均置于37℃溫箱中培養。上述培養基均購于常州貝源鑫生物科技有限公司。

1.3 評價指標

1.3.1 腸道菌群

經革蘭染色、生化進行鑒定，計算每克糞便所含菌群的數量（CUF·g-1）。

1.3.2 炎性因子

收集所有參與研究者早晨空腹靜脈血2ml靜置30 min后，使用離心機3000r/min分離血清，10 min后取出低溫保存。使用酶聯免疫吸附法（Enzyme Linked Immune Sorbent Assay，ELISA）對腫瘤壞死因子-α( Tumor necrosis factor，TNFα) 、白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、白介素-17（Interleukin-17，IL-17）進行檢測；內毒素采用鱟試劑三肽顯色基質偶氮法檢測。

1.3.3 免疫指標

收集所有參與研究者早晨空腹靜脈血3ml，使用枸櫞酸鈉抗凝，隨后使用離心機3000 rpm離心20 min后獲取上清液，存放于-80℃冰箱待檢。使用免疫透射比濁法檢測免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgA）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）、免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）

1.3.4 相關性

采用Spearman分析菌群數量和炎性指標間雙變量相關性。

1.4 統計方法

本研究數據使用SPSS22.0軟件進行分析，計量資料通過平均數±標準差（±SD）描述，t進行檢驗；計數資料通過率或構成比描述，χ2進行檢驗，菌群數量和炎性指標間進行雙變量相關性分析，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組腸道菌群比較

大腸桿菌、腸球菌數量：活動組>緩解組>對照組，雙歧桿菌、乳酸桿菌數量：活動組<緩解組<對照組（P<0.05）。見表1。

表1 三組腸道菌群比較（±SD）

表1 三組腸道菌群比較（±SD）

注：與緩解組、對照組相比，*P＜0.05。

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2.2 三組炎性因子比較

將三組炎性因子（TNF-α 、IL-6、IL-17）以及內毒素進行對比，活動組>緩解組>對照組（P<0.05）。見表2

表2 三組炎性因子比較（±SD）

表2 三組炎性因子比較（±SD）

注：與緩解組、對照組相比，*P＜0.05。

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2.3 三組免疫指標比較

IgG、IgA水平：活動組<緩解組<對照組，IgM水平：活動組>緩解組>對照組（P>0.05）。見表3。

表3 三組免疫指標比較（±SD，g·L-1）

表3 三組免疫指標比較（±SD，g·L-1）

注：與緩解組、對照組相比，*P>0.05。

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2.4 相關性

將菌群數量和炎性指標間進行相關性分析，結果顯示，大腸桿菌、腸球菌數量與TNF-α、IL-6、IL-1以及內毒素呈正相關，雙歧桿菌、乳酸桿菌數量與TNF-α 、IL-6、IL-17以及內毒素水平呈負相關，見表4。

表4 菌群數量和炎性指標間進行雙變量相關性分析

3 討論

機體內復雜的腸道微生態系統大多由腸道菌群構成，其在腸道免疫系統、抑制致病菌、吸收合成營養等方面具有十分重要的作用[4]。有研究認為，潰瘍性結直腸炎發病原因為腸黏膜的屏障功能出現異常，腸道菌群紊亂、異常免疫反應等共同的作用下所導致的[5]。

因此，本研究對潰瘍性結直腸炎患者的腸道菌群數量進行分析比較，結果顯示，活動組患者大腸桿菌、腸球菌數量高于緩解組、對照組，雙歧桿菌、乳酸桿菌數量明顯低于緩解組、對照組，說明當患者體內菌群失調時，會導致腸黏膜的屏障功能降低，導致機體免疫功能下降，機體出現腸道炎癥。本研究對患者免疫指標水平進行研究，發現三組免疫水平比較無差異，可能是由于本次研究納入病例數較少，同時潰瘍性結直腸炎是多種因素相互影響所形成的疾病，免疫因素并不是唯一因素，因此導致IgG、IgM、IgA無明顯變化。

炎性因子具有調節細胞功能、維持生理平衡等作用，其中促炎因子與抗炎因子失衡在潰瘍性結直腸炎發生發展中起到一定作用[6]?，F代研究表明TNF-a是炎癥啟動因子，參與著炎癥的發生發展過程。IL-6屬于促炎細胞因子，可加劇腸黏膜炎性反應；IL-17對腸黏膜的炎癥損傷具有直接的介導作用[7-9]。因此本研究對患者體內炎性因子進行檢測，觀察其變化，同時還對炎性因子與腸道菌群的相關性進行分析。

結果顯示?；顒咏MTNF-α、IL-6、IL-17以及內毒素均明顯高于緩解組以及對照組；且大腸桿菌、腸球菌數量與炎性因子呈正相關，雙歧桿菌、乳酸桿菌數量與炎性因子呈負相關。主要是由于腸管內菌群失調致使機體產生或加劇炎性反應，增加腸管黏膜通透性，促使內毒素與相應的炎癥因子分泌顯著增加[10]。

綜上所述，潰瘍性結直腸炎患者存在明顯菌群失衡，且菌群變化與疾病炎性程度關系密切。