FQ-PCR和ELISA聯合檢測用于乙型肝炎的臨床價值

許 嬌

（盤錦市中心醫院檢驗科，遼寧 盤錦 124010）

乙型肝炎即為乙型病毒性肝炎，是由乙型肝炎病毒感染引起的以肝臟炎性病變為主的一種傳染性疾病，同時其也是一種多器官傳染性疾病。此病癥在世界各地流行，一年四季均可發病，多為散發。患者的主要臨床表現為惡心、食欲減退、上腹部不適、肝區疼痛等癥狀[1-2]。隨著乙型肝炎病情的發展，部分患者還會出現肝硬化、肝衰竭或原發性肝細胞癌等，對患者的生命安全及生活質量造成嚴重影響，因此盡早實施有效的診治措施，對提高治療效果具有積極的作用。相關研究表明，把握好乙型肝炎的檢測時機，了解病毒復制情況與肝炎治療進展，對治療與預后效果有重要的作用[3-4]。在乙型肝炎病毒感染診斷中，傳統方式為酶聯免疫吸附法（ELISA），其可通過檢測血清了解及評價血清中的特異性抗體與抗原，以此來判斷有無感染。隨著醫療技術的不斷進步與發展以及分子生物學技術的進步，實時熒光定量聚合酶鏈反應（FQ-PCR）法在臨床疾病的診斷中發揮著獨特的作用，特別是在乙型肝炎診斷中可有效反映乙型肝炎病毒的復制性與活性，有助于指導治療與評價預后。本研究旨在評價FQ-PCR和ELISA聯合檢測在乙型肝炎診療中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 基本資料 選取2017年10月至2018年12月盤錦市中心醫院收治的100例乙型肝炎患者為研究對象，采用隨機數字分組法將其分為研究組（34例）、對照1組（33例）、對照2組（33例）。研究組中13例女性患者、21例男性患者；年齡在19～80歲，平均年齡（49.58±10.23）歲。對照1組中13例女性患者、20例男性患者；年齡在20～79歲，平均年齡（49.05±10.45）歲。對照2組中14例女性患者、19例男性患者；年齡在19～81歲，平均年齡（50.22±10.34）歲。3組基本資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本次研究經醫院倫理委員會批準。參與研究者均知情，并簽署知情同意書。所有參與者均參照病毒性肝炎防治方案中關于慢性乙型肝炎的診斷標準進行判定，同時結合FQ-PCR檢測，對患者的病情進行確診。將有血液系統疾病者、惡性腫瘤者、相關性代謝系統疾病者、精神疾病者排除。

1.2 方法 所有患者均實施FQ-PCR和ELISA聯合檢測。先抽取患者清晨空腹靜脈血，對其進行離心處理（3 000 r/min），離心10 min后，分離血清，將其保存于4 ℃的條件下備用。選用相關儀器進行檢測，即用熒光定量分析儀（美國ABI公司，ABI7500Fast）與FQ-PCR診斷試劑盒（中山大學達安基金股份有限公司）、全自動酶標儀（上活科華生物工程股份有限公司，ST-360），ELISA試劑（上海科化生物股份有限公司）。乙型肝炎病毒血清標志物檢測：采用ELISA檢測血清標志物，所有參與檢驗者均應由同一家試劑生廠公司提供，嚴格執行無菌操作流程進行操作。檢驗順序：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙肝病毒e抗體（HBeAb）、乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）。乙肝病毒DNA定量檢測：乙肝病毒DNA采用FQ-PCR法實施定量檢測，在整個操作過程中，需嚴格按照試劑操作說明書進行。乙肝病毒DNA＞10×102IU/mL為陽性。

1.3 觀察指標 分析不同免疫學標志物下的檢測結果。評價HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陽性檢出率。

1.4 統計學方法 采用SPSS 21.0統計學軟件對數據進行分析。計量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗；計數資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗；P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陽性檢出率比較 研究組HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陽性檢出率顯著高于對照1組、對照2組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 3組大三陽乙型肝炎病毒DNA載量比較 研究組大三陽乙型肝炎病毒DNA載量明顯高于對照1組、對照2組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 3組HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陽性檢出率比較[n（%）]

表2 大三陽乙型肝炎病毒DNA載量比較（）

表2 大三陽乙型肝炎病毒DNA載量比較（）

3 討論

乙型肝炎多由乙型肝炎病毒引起，臨床發病率較高。乙型肝炎病毒具有較強的傳染力，部分患者在被感染后易轉變為慢性肝炎。在乙型肝炎病情的進展過程中，易引起肝硬化或是肝癌等，對患者生命安全產生嚴重影響，故乙型肝炎已成為世界性的一種公共衛生問題。因此，早期診斷對提高乙型肝炎病情判斷及治療方案的制定具有重要的作用[5-8]。

目前，臨床上在乙型肝炎病毒的檢測中主要采用FQ-PCR和ELISA、放射免疫法、化學發光法等方法。其中ELISA操作方法簡單、靈敏度及特異度高、檢測時間短、價格低等，被廣泛應用于臨床中。但ELISA法僅能反映乙型肝炎病毒的免疫應答狀態，可為乙型肝炎病毒感染提供間接參考，并不能準確反映乙型肝炎病毒的感染復制與傳染風險[9-13]。FQPCR通過檢測乙型肝炎病毒DNA載量，可反映乙肝病毒的傳染與復制風險，在治療方案的選擇、預后效果的判斷中發揮著重要的作用[14-17]。但乙型肝炎病毒DNA不能判斷其是否為復制狀態下的感染。困此，臨床需要將FQ-PCR和ELISA檢測法聯合，以此來提高診斷準確性[18-2]。本研究表明，研究組HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陽性檢出率顯著高于對照1組、對照2組，且研究組大三陽乙型肝炎病毒DNA載量明顯高于對照1組、對照2組（P＜0.05）。由此說明，乙型肝炎病毒的復制率較高，且傳染性較強。此外，HBeAb是乙肝病毒的核心，也是乙型肝炎病毒基因組前區段的主要表達方式，通常可作為病毒傳染性強、復制活躍的標準。

綜上所述，應用FQ-PCR和ELISA聯合檢驗乙型肝炎病毒，在乙型肝炎患者早期診斷中具有積極的作用，同時還可提高診斷準確率。其中的免疫學標志物水平有助于指導治療與評價預后。