ER、EGFR、P53在乳腺癌中的免疫組化研究

劉 麗 白春俠 曹美榮

（營口市中心醫院，遼寧 營口 115000）

乳腺癌是一種十分常見的婦科疾病，也是女性最常見的惡性腫瘤之一，世界衛生組織的調查結果顯示，乳腺癌發病率占全身各種惡性腫瘤的7%～10%，在婦女疾病中僅次于子宮頸癌，現已成為威脅婦女健康的主要疾病。乳腺癌屬于乳房腺上皮組織病變，在男性中發病十分罕見，占1%～2%[1]。乳腺癌發病常與遺傳因素有關，在40～60歲或絕經期前后的婦女發病率較高。近年來乳腺癌的發病率在臨床上有明顯提升的趨勢，因此針對乳腺癌的臨床診斷至關重要。為深入探析乳腺癌的病癥機制，本次研究采取免疫組化法，對比分析EGFR、P53、ER蛋白過度表達與腋淋巴結轉移、臨床分期及其相關性，從而探究其作為有效預防因子的可能性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2018年5月至2019年5月收治的156例原發性乳腺癌患者為研究對象，在患者原發乳腺癌組織中，觀察其雌激素受體（ER）、表皮生長因子受體（EGFR）、P53的表達水平；抽取原發性乳腺癌標本156例，所有患者術前均未存在化療及放療史，病理診斷明確，其中包括未吸收細胞、實驗中脫片30例，執行ER、EGFR有效標本100例，良性病變20例，乳腺癌80例，執行P53試驗的有效標本80例，良性病變20例，乳腺癌56例。

1.2 方法 ①將本次研究選中的標本以蒸餾水進行沖洗，在H2O2甲醇液作用下持續10 min，隨后將正常的馬血清完全封閉，添加一抗，于4 ℃的條件下持續放置20 h，隨后添加二抗與三抗，此階段需在溫室下作用，途中選擇Tris/HCl液進行洗滌，促使其于DAB中顯色，并以蘇木素復染，以乙醇梯度脫水，隨后進行封片，由相關人員進行長期觀察。②Tris/HCl液代謝一抗進行空白對照分析，根據結果觀察其ER、P53細胞核的著色情況，本次研究可見，ER、P53細胞核著色情況為陽性，EGFR結果顯示，其細胞核著色情況為陽性。

1.3 觀察指標 觀察本次研究選中的156例標本執行ER、EGFR、P53的有效標本例數，同時觀察其臨床分期中的陰性與陽性差異，統計ER、EGFR、P53表達與乳腺癌臨床病理參數關系。

1.4 統計學方法 使用統計學軟件SPSS21.0處理數據，（）和率（%）分別表示計量資料和計數資料，分別應用t和χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER表達與乳腺癌臨床病理參數的關系 執行ER有效標本100例，80例乳腺癌中，共有陽性66例，陽性率為82.50%。ER與臨床分期及淋巴結轉移情況呈現明顯的負相關性。見表1。

2.2 EGFR表達與乳腺癌臨床病理參數關系 執行EGFR有效標本100例，在80例乳腺癌中陽性共72例，陽性率為90.00%；將EGFR與乳腺癌患者臨床參數執行相關性分析可見，156例標本中，EGFR與臨床分期、淋巴結轉移情況呈現明顯的正相關性，與ER呈明顯的負相關性，P＜0.05。見表2。

3 討 論

乳腺癌是目前最常見的婦科腫瘤之一，世界衛生組織調查的結果顯示，全球乳腺癌發病率自20世紀70年代末開始一直呈上升趨勢[2]。我國雖然并非乳腺癌高發國家，但現狀仍舊不宜樂觀，近年我國乳腺癌發病率的增長速度高出高發國家1～2個百分點。英國《獨立報》指出，2000—2019年，我國乳腺癌年平均增長率約3.8%，而相較于美國同期下降了0.5%[3]。且隨著國家經濟水平的發展、人民生活壓力增大，乳腺癌的發病率正呈現出不斷發展、增加的趨勢。

表1 ER表達與乳腺癌臨床病理參數的關系（n，%）

表2 EGFR表達與乳腺癌臨床病理參數關系（n，%）

早期階段乳頭可見于溢液現象，甚至乳房外觀還可能會出現變形；因此臨床上多提倡患者避免應用激素類藥物，維持樂觀的心態，合理均衡飲食，從而最大程度的避免病情影響[4]。隨著病情進展，在中晚期階段，乳腺癌患者的病灶組織將合并有嚴重的紅腫反應，生長較快，體積較大的腫瘤，可出現皮膚表淺靜脈怒張，腫瘤局部皮溫升高。如腫瘤接近皮膚表面時皮膚可發紅。如癌細胞阻塞了皮下淋巴管，即可出現皮膚水腫，出現橘皮樣變[5-6]。同時，腫瘤發展到晚期，腫塊長大，可使皮膚隆起，如血供不足，隨著皮膚發紅，變薄，可發生破潰。由于創面有大量的壞死組織及血性分泌物滲出，患者常因此出現消瘦、貧血征象。另外，有相對較低的概率導致皮膚結節、鎧甲癌等表現[7]。最終造成乳腺輪廓改變，導致乳頭乳暈改變及乳頭濕疹樣改變，發展至晚期時，將促使其區域淋巴結腫大，造成遠處轉移表現，經血液或淋巴途徑發生遠方轉移，好發部位以肺、胸膜、骨、肝、腦及軟組織較多見[8]。

值得注意的是，乳腺癌的確切病因尚未完全明確，一般認為與遺傳、月經、婚育等多種內在和外界的因素共同作用有關，通常將其歸納為月經初潮時間、遺傳因素、婚育、電離輻射、不健康飲食習慣等類型[9]。隨著臨床研究的不斷進展，自Jensen發現乳腺癌中的ER成分以來，隨著乳腺癌研究地不斷深入，相關研究發現，存在EGFR表達的乳腺癌患者，相較于不存在EGFR表達的乳腺癌患者具有更強的浸潤性，且EGFR陽性的檢出率相對較高，因此，EGFR陽性或陽性程度與累及淋巴結的數目具有極高的關聯性。本次研究結側面佐證了這一理論。同時，EGFR與淋巴結的關聯性并非局限于腫瘤組織中，但僅在ER陽性的腫瘤中，二者方能存在清晰的關聯性，因此，EGFR在分化不良的腫瘤中同樣具有頻繁的表達效果，自然其強度也較為明顯，可證實其與臨床分期之間的關聯[10]。

P53是一種十分常見的癌癥因子抑制基因，其具有十分靈活的基因缺失與基因重組功能，多見于基因突變，而此類基因與乳腺癌的病變存在密切關聯。值得關注的是，近年來臨床研究表明，P53對穩定蛋白質的影響較為密切，能夠參與抑制細胞增殖的過程中，因此，P53免疫反應多表現為核染色，其中的部分胞質著色較為常見，因此在細胞角蛋白的交叉反應影響下，可判定乳腺癌的中野生型P53隱藏在其胞質組織中，是影響其無法正常運行的關鍵因素。本次研究結果可見，P53與雌激素受體存在明顯的負相關性，與上述研究結果基本一致。

綜上所述，在乳腺癌中，患者臨床分期的高低與其腋淋巴結的轉移均是導致患者預后不良的重要指標，ER陰性可提示其預后不良現象，EGFR、P53蛋白表達與臨床分期、腋淋巴結轉移呈正相關，與ER呈負相關，因此，在臨床診斷過程中，應用EGFR與P53均可有效判定患者預后情況，提升治療針對性。