兒童結核病分子生物學診斷方法研究進展

焦偉偉

2019年，全球估算新發兒童結核病患者約120萬例，但實際上報例數不足50%，診斷困難是其主要影響因素[1]。對兒童結核病患者及時有效的診斷有助于早期干預治療，可明顯改善患兒預后。但與成年人相比，兒童咳嗽反射較弱，難以獲取合格的痰標本；加之結核病患兒痰標本細菌載量較低，病原學陽性檢出率低，極大地制約著臨床診斷工作的開展。近年來，隨著分子生物學檢測技術的飛速發展，新型結核病診斷方法不斷涌現，我國新的行業標準《WS 288—2017肺結核診斷》也將分子生物學檢測納入到結核病的確診標準中，可見其對結核病的診斷具有重要應用價值。筆者現針對這些新型診斷方法在兒童結核病診斷中的應用進行綜述。

一、GeneXpert MTB/RIF(簡稱“GeneXpert”)

GeneXpert是以結核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis, MTB)的RNA聚合酶活性位點編碼區(81 bprpoB核心序列)為靶標，采用半巢式實時半定量PCR進行病原體檢測的方法。由于95%以上的利福平耐藥MTB菌株在rpoB核心區發生核苷酸變異，因此，該方法可同時檢測MTB對利福平的耐藥情況。

隨著GeneXpert在兒童人群中應用研究的不斷增多，世界衛生組織(World Health Organization, WHO)在2014年公布的數據顯示，在兒童肺結核診斷中，GeneXpert檢測咳出痰、誘導痰或胃液標本的敏感度相近，均高于40%，特異度也較高，約為93%～100%；且對兒童痰液和胃液的檢測敏感度分別高于抗酸染色37%和44%，其中，對抗酸染色陽性患兒的檢測敏感度可達95%，對抗酸染色陰性患兒的檢測敏感度也達到55%～62%；以MTB培養為金標準，GeneXpert檢測痰液和胃液的總敏感度和總特異度約為66%和98%[2]。……