血清中LN、CIV、PIIIP和HA應用于肝纖維化及肝硬化患者診斷的臨床研究

黃祥磊

（徐州市中心醫院，江蘇 徐州 221006）

0 引言

肝纖維化是指各種疾病引起的肝組織異常增生，導致肝細胞外基質過度沉淀的病理過程。肝硬化是指由一個或多個原因引起的肝損傷，是進行性的。肝纖維化是許多慢性肝病的共同病理過程，尚未被認為是一種獨立的疾病，肝硬化是一種常見的慢性肝病，可以看作是一種獨立的疾病[1]。肝纖維化是可抵抗的，而肝硬化是肝纖維化的進一步發展，是各種肝病的晚期表現，通過快速有效的治療可以早期逆轉，但中晚期逆轉率很低[2]。對于肝纖維化及肝硬化患者目前的治療目的主要是保肝治療，暫時還沒有找到能夠徹底將其根治的有效方法。目前，肝纖維化及肝硬化的診斷方法包括病理學、影像學和血清學三種診斷方法，但因為病理診斷患者的接受度較低，不能反復取樣動態檢測，還有肝癌穿刺的盲目性、肝臟病變的異質性等諸多缺點。影像學采用B超和CT檢測，由于影像學的局限性，一旦發現肝纖維化則為晚期。因此，肝纖維化的血清學診斷方法越來越受到重視[3]。為了分析探討血清中LN、CIV、PIIIP和HA應用于肝纖維化及肝硬化患者診斷的臨床研究，本次研究報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選取我院2020年慢性肝病檢測者1200例與健康體檢人員100例為觀察對象，入選標準：①所有病例均符合接受血清學檢測診斷標準；②患者均自愿接受治療，且患者家屬全部知情，并與我院簽署同意書；③患者均無精神異常者，聽力完好，思維邏輯正常；④患者病歷本齊全。其中1200例肝纖維化及肝硬化患者中，男846例，女354例，年齡20～80歲，平均（40.20±3.11）歲；健康體檢者100例中，男55例，女40例，年齡21～79歲，平均（43.50±1.14）歲。兩組患者的基本資料差異無統計學意義（P>0.05），有可比性。

1.2 方法

對所有受檢人員均進行LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測，采用我院深圳新產業化學發光儀MAGLUMI4000進行血清檢測，在檢查前3d內，保持飲食清淡，禁止過于辛辣的食物，對所有病例進行靜脈血液取樣，抽取靜脈血4mL，將血清分離后放置于冷藏室進行保存，冷藏室溫度為-20℃左右，然后采用化學發光法進行血清LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測，在檢測過程中嚴格遵循試劑說明書進行操作。

1.3 觀察指標

①將所有受檢人員的LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果進行比較；②對于肝纖維化及肝硬化患者的單項陽性檢測率進行統計總結。

1.4 統計學方法

用SPSS 20.0軟件對所統計的研究數據進行處理和分析，計量資料用均數±標準差（）表示，采用t檢驗，計數資料用率（%）表示，采用χ2檢驗，如P<0.05，則說明差異有統計學有意義。

2 結果

2.1 LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果

將所有受檢人員的LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果進行比較，健康體檢者的LN、CIV、PIIIP和HA指標與輕度肝纖維化及肝硬化患者之間差別無顯著性，但與中度肝纖維化及肝硬化患者、重度肝纖維化及肝硬化患者之間有明顯差異，數據對比差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 所有受檢人員的LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果（,ng/mL）

表1 所有受檢人員的LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果（,ng/mL）

2.2 肝纖維化及肝硬化患者的單項陽性檢測率統計

對于肝纖維化及肝硬化患者的單項陽性檢測率進行統計總結發現，一共檢測出陽性患者350例，隨著患者的病情加重，其血清檢測指標的陽性率也會逐漸增加。見表2。

表2 肝纖維化及肝硬化患者的單項陽性檢測率統計[n(%)]

3 討論

肝纖維化是肝硬化的早期病理階段，是肝臟慢性損傷時的細胞外基質，有很多種肝細胞（PFF細胞、Kupffer細胞、竇周內皮細胞）和肝外血小板、淋巴細胞、中性粒細胞等參與了這一過程，活性氧（ROS）、一系列細胞因子和纖維蛋白原的釋放引起炎癥細胞浸潤和炎癥，靜息期星狀細胞（HSCs）被一系列細胞因子激活、增殖并轉化為肌成纖維樣細胞，如轉化生長因子-β（TGF-β）、血小板源性生長因子（PDGF）、內皮素（ET）、成纖維細胞生長因子（FGF）、結締組織生長因子（CTGF）、瘦素等[4]。這些細胞因子都通過了相應的途徑，如Smads信號途徑、絲裂原活化蛋白激酶途徑（Ras/ERK途徑）、P38通路、JNK/sh-pk通路、PI-3K通路。靶細胞的生物學反應是通過JAK/STAT通路、NF-KB信號通路、PPAR通路和JAK/STAT通路的作用產生的[5]。單個細胞因子可以激活多種信號轉導途徑，單個信號轉導途徑可以被多種細胞因子刺激，不同路徑之間存在著多種相互作用，形成了一個復雜的信號調節網絡，使得組織更加靈活，細胞外基質（ECM）的合成和分泌增加，ECM的合成和釋放也增加大量的基質蛋白抑制劑，降低了膠原酶等蛋白酶的活性與ECM的降解，最終導致ECM的降解，導致ECM積聚和肝纖維化、肝硬化。肝纖維化早發現、早診斷、早治療意義重大，血清肝纖維化四項指標的聯合檢測是無創性診斷肝纖維化的良好診斷指標，目前，可以反映肝纖維化的指標很多，但是在臨床應用上LN、CIV、PIIIP和HA的使用較多[6]。

血清肝纖維化指標可以反映肝纖維化的不同方面，其中，HA和PIIIP四項指標的升高能較好地反映肝纖維化的各個方面，其活動性、敏感性和特異性均高于90%。有研究表明，LN、CIV、PIIIP和HA的變化水平與肝功能有關，肝纖維化程度與肝損傷程度密切相關，肝纖維化的非創傷性診斷具有重要意義[7]。作為肝臟纖維化的機制是不同的，HA是一種多肽糖，是肝細胞外基質的主要成分之一，肝細胞外基質可被肝竇內皮細胞細分肝細胞損傷，會影響內皮細胞的功能與HA含量的增加，肝臟受損時，HA合成增加并降解減少，相關研究報道顯示，從肝炎到肝僵硬過程中，患者的血清HA含量在化療過程中逐漸升高，對肝硬化的診斷是準確的靈敏度為86.89%。CIV是肝內皮細胞與肝纖維化的功能性基底膜，基底膜的形成和破壞增加，會導致血清CIV水平升高，研究表明CIV是肝損傷最早增加的原纖維，是膠原蛋白合成的一個指標，是檢測肝纖維化進展的重要方法，也是一個很好的指標，因此CIV可作為早期肝纖維化的指標，它能靈敏地反映肝炎發展為肝硬化的過程和程度[8]。LN是在肝纖維中形成的主要基質是膜糖蛋白，在這個過程中，LN沉積在DISSE空間，形成完整的內皮細胞基底，實驗研究發現，它與肝纖維化的形成有重要關系，血清LN的水平與CIV、HA水平平行，正常肝組織中LN含量很低，主要分布在肝膽管和血液中，血管壁和淋巴管壁是基底膜的重要組成部分[9]。LN是肝纖維化最常見的病因，血清中的含量隨著合成量的增加而增加。LN和CIV一起形成肝基，基底膜形成纖維隔膜，參與肝竇毛細血管化，使肝竇腔變窄，導致肝纖維化肝內血流阻力的增加和門脈高壓的形成可作為肝纖維化的發病機制，因此，LN和CIV可以作為早期肝硬化的診斷指標。而細胞外基質的基本結構是膠原，膠原在肝纖維化中表現良好胞質的增殖和活化以及Ⅲ型膠原合成的增加會導致血清PIIIP水平血壓的升高[10]。本次研究報告顯示，將所有受檢人員的LN、CIV、PIIIP和HA指標檢測結果進行比較，健康體檢者的LN、CIV、PIIIP和HA指標與輕度肝纖維化及肝硬化患者之間差別無顯著性，但與中度肝纖維化及肝硬化患者、重度肝纖維化及肝硬化患者之間有明顯差異，數據對比差異有統計學意義（P<0.05）；對于肝纖維化及肝硬化患者的單項陽性檢測率進行統計總結發現，一共檢測出陽性患者350例，隨著患者的病情加重，其血清檢測指標的陽性率也會逐漸增加。說明肝纖維化及肝硬化患者的血清LN、CIV、PIIIP和HA指標變化與患者的病情嚴重程度與病情變化趨勢有密切關系，可以作為檢測患者病情進展的有效參考指標，可以明顯將患者病情在不同時間的纖維變化狀況以及肝功能損傷狀況反映出來，將患者的臨床癥狀、過往病史、生命體征等各方面指標進行結合，降低病情誤診率與漏診率，對病情診斷治療有重要意義。

綜上所述，血清中LN、CIV、PIIIP和HA應用于肝纖維化及肝硬化患者的臨床診斷中，可以有效輔助患者病情的鑒別與診斷，血清LN、CIV、PIIIP會隨著患者的病情加重，其血清檢測指標的陽性率也會逐漸增加，動態監測血清水平變化對于患者病情評估與預測具有重要意義，值得推廣與應用于肝纖維化及肝硬化患者的臨床診斷中。