血清omentin-1和vaspin在非酒精性脂肪性肝病患者中的表達及意義

蘇秀麗 王同生 張英劍

關于網膜蛋白-1(omentin-1)、內臟脂肪組織來源的絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，vaspin)這些脂肪因子在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)中的發病機制和炎癥影響情況尚不清楚[1-3]。本研究通過檢測NAFLD患者omentin-1、vaspin、白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)和C反應蛋白(creactive protein，CRP)血清水平，評估這些脂肪因子與NAFLD患者IL-6和CRP的關系。

資料與方法

一、研究對象

2014年3月至2019年3月在河南科技大學第一附屬醫院消化科門診和病房診斷的NAFLD患者，均符合NAFLD的診斷標準。入選標準：NAFLD診斷標準參照2010年中華醫學會肝臟病學分會《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[4]。入選患者由3名固定的、有經驗的高年資醫生討論通過。

138名NAFLD患者(NAFLD組)：53名男性，85名女性，年齡35～50歲，平均年齡(43.8±6.1)歲；選擇同期健康體檢者，肝功能正常、經B型超聲檢查無脂肪肝癥狀，且無飲酒史或飲酒折合乙醇量符合納入或排除標準的人群作為對照組。129名健康無NAFLD者為對照組：50名男性，79名女性，年齡35～51歲，平均年齡(42.7±7.5)歲。兩組年齡、性別無統計學差異。本研究經河南科技大學第一附屬醫院倫理委員會審批通過(批號：20140208)，所有研究對象均簽署知情同意書。

二、研究方法

所有入選的對象均記錄性別、年齡、身高、體質量、腰圍，腰圍有固定人員應用非彈性軟尺測量，測量位置在髂前上嵴與最低肋骨連線中點處，檢測空腹(空腹12 h)血脂、血糖,抽血待查CRP、IL-6及omentin-1、vaspin的水平。

(一)肝臟B超檢查 由固定的、有經驗的超聲醫師應用Elegra-Siemens公司(德國)的B超儀扇形探頭(3.5～5.0 MHz)進行檢查。參照《非酒精性脂肪性肝病診療指南》中NAFLD的B超診斷標準進行診斷[4]。

(二)血生化參數的檢測 于上午8時空腹采取靜脈血查血糖(FBG)、總膽固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)，均在本院臨床檢驗中心采用全自動生化分析儀(美國,型號：BHBMD1600)檢測。

(三)測定CRP、IL-6 抽取肘靜脈血4 mL，注入干燥試管，4 ℃，3 000 r/min離心15 min，分離血漿-80 ℃保存待測CRP、IL-6,高靈敏度濁度法測定，單位mg/L。

(四)omentin-1、vaspin的測量 抽肘靜脈血8 mL，注入加有10%乙二胺乙酸二鈉30 μL及抑肽酶40 μL抗凝劑的試管中，混均，4 ℃，3 000 r/min離心15 min，分離血漿-80 ℃保存，待測omentin-1、vaspin。通過酶聯免疫吸附法(ELISA)測量(上海晶天生物科技有限公司)，單位均為ng/mL，嚴格按照操作說明書進行。

三、統計學處理

結 果

一、臨床特征

NAFLD組和對照組比較，腰圍(WC)、體質指數(BMI)、空腹血糖、膽固醇、LDL-C、TG差異有統計學意義(均P<0.05)。年齡、性別、HDL-C、ALT、AST差異沒有明顯統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 NAFLD組和對照組臨床特征比較

二、兩組IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比較

NAFLD組IL-6(117±8.2)高于對照組(103±9.1)，差異有統計學意義(P=0.01)，NAFLD組CRP中位數(四分位間距)為3.1(1.0～9.3)mg/L，顯著高于對照組1.1(1.0～6.9)mg/L；omentin-1中位數(四分位間距)1.6(0.5～7.5)ng/mL低于對照組2.8(0.4～7.5)ng/mL；vaspin水平中位數(四分位間距)2.1(0.7～6.3)ng/dL高于1.0(0.2～7.3)ng/dL，差異均有統計學意義(Z值-2.935～-1.605，P值0.003～0.03)。詳見表2。

表2 兩組IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比較[中位數(四分位間距)]

三、相關分析

Vaspin水平分別與腰圍、LDL-C、CRP、IL-6成正比(r值分別為0.335，0.231，0.341，0.285，均P<0.05)；與HDL-C、omentin-1呈負相關(r值分別為-0.221，-0.246，均P<0.05)。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負相關(r值為別-0.250，-0.238，-0.319，均P<0.05)，與HDL-C呈正相關(r=0.326，P<0.05)。

四、Logistic回歸分析

NAFLD為因變量，以omentin-1、vaspin、腰圍、BMI、空腹血糖、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6為自變量進行Logistic回歸分析，結果表明omentin-1、vaspin、腰圍、CRP、IL-6為患者發生NAFLD的獨立相關因素[β值分別為1.896，1.471，2.012,2.971,1.984,2.0982,OR值(1.021～3.012)，95%CI(1.431～4.979)，均P<0.05]。

討 論

本研究探索了NAFLD患者omentin-1、vaspin血清水平，并與健康組對照研究，評估了這些脂肪因子與患者的IL-6、CRP關系。

研究認為，NAFLD是代謝綜合征的組成部分，轉氨酶檢測正常的NAFLD，是NAFLD的早期階段，與胰島素抵抗合并的糖脂代謝紊亂密切相關[5]。本實驗中，NAFLD組與正常對照組比較，體質指數、腰圍、空腹血糖、三酰甘油、總膽固醇、LDL-C的差異有統計學意義，HDL-C、ALT、AST差異沒有明顯統計學意義，也支持上述觀點。

研究顯示，omentin-1與肥胖、IR等代謝紊亂呈負相關性[3.6]。Omentin-1通過抑制胞外調節蛋白激酶/NF-κB通路活性，降低炎癥細胞誘導的內皮黏附分子的表達。因此，omentin-1還具有抗炎，抗動脈粥樣硬化作用[7]。本研究發現，NAFLD組與對照組相比，omentin-1較低，差異有統計學意義。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負相關，與HDL-C呈正相關，腰圍、IL-6、CRP是omentin-1水平下降的影響因素，HDL-C是omentin-1水平升高的危險因素，也符合上述觀點。國外研究[8]報道omentin-1與NAFLD的發生密切相關，是NAFLD的獨立危險因素，與本研究發現omentin-1是NAFLD發生的獨立危險因素相一致。本研究發現血清omentin-1水平與BMI無關，omentin-1與腰圍呈負相關，表明在表述身體脂肪分布方面，腰圍比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平與NAFLD患者的HDL-C水平呈正相關，提示omentin-1可能是NAFLD發生的保護因素。

對經肝穿刺證實的NAFLD患者研究發現，血清vaspin水平明顯升高，是NAFLD患者肝細胞纖維化程度的獨立預測因素[9-10]。血清vaspin水平升高，且vaspin水平與超聲診斷下的肝臟脂肪變性嚴重程度及肝內脂肪含量呈正相關[11]。本研究中，與健康對照受試者相比，NAFLD患者的vaspin濃度更高。血清vaspin與腰圍和LDL呈正相關。Vaspin是NAFLD的獨立危險因素，說明vaspin可能是NAFLD發生的預測因子。

IL-6可誘導肝臟合成CRP，還可刺激肝臟分泌極低密度脂蛋白，導致高三酰甘油血癥，TNF-α和IL-6可參與調節其他脂肪因子的分泌[6，12]。本研究發現vaspin分別和IL-6、CRP呈正相關，omentin-1與CRP、IL-6 呈負相關，說明了NAFLD可能與慢性炎癥有關。推測omentin-1、vaspin在NAFLD患者體內表達可能受到IL-6、CRP炎癥因子的影響。隨著人脂肪含量(尤其是內臟脂肪含量)增多，游離脂肪酸脂解增強，TNF-α、IL-6、CRP等炎癥因子表達增強，致使機體處于慢性炎癥狀態，omentin-1表達由于受到炎癥因子的抑制，其表達水平降低，抗炎作用減弱，致使機體慢性炎癥持續存在，并逐漸加重，進而促進NAFLD的發生,而vaspin則因為炎癥因子的作用，表達增加，促進了NAFLD的發生[13]。

NAFLD患者omentin-1、vaspin、IL-6、CRP和健康組不同。Vaspin可能是NAFLD發生的預測因子，而omentin-1可能是預防NAFLD發生的保護性因子。其機制可能與炎癥因子有關，具體機制需進一步研究。